2 型糖尿病の治療アジュバントとしてのオレアノール酸 (OLTRAD 研究) (OLTRAD)

試験デザイン OLTRAD 研究は、OA 強化機能性オリーブオイルの定期的な摂取がメトホルミン療法の補助として (単独療法として、または他の抗糖尿病薬）を T2DM 患者の代謝制御に使用します。 OA 強化オリーブオイルの効果を、トリテルペンが強化されていない同じ市販のオリーブオイルからなる対照オイルの効果と比較します。

「ビルヘン・デル・ロシオ」大学病院（スペイン、セビリア）の内分泌・栄養サービスで治療を受けるT2DM患者の中から、男女合わせて100人のボランティアが選ばれる。

サンプルサイズの計算 血清グリコシル化ヘモグロビン (HbA1c) は、血糖コントロールの分析の主要な定量的変数として採用されます。 試験計画で述べられている帰無仮説は、OA ベースの食事介入により、患者のベースライン血清 HbA1c レベルが対照群と比較して少なくとも 7% 低下するというものです。 この片側仮説検定を 95% の信頼水準 (α リスク = 0.05) および 95% 検出力 (β リスク = 0.05) で検定するには、グループあたり 44 人のボランティアのサンプルサイズが必要です。 ただし、研究の特性 (長期的なライフスタイル介入) により、最大 15% の参加者の損失が想定されるため、サンプル サイズは 1 グループあたり 50 人に調整されます。

ランダム化 募集後、100 人の T2DM 患者は 2 つの研究グループのいずれかにランダムに割り当てられます。 50 人が介入グループに割り当てられ、OA が強化された機能性オリーブオイルを摂取します。一方、他の 50 人のボランティアは対照グループに割り当てられ、同じ非強化オリーブオイルが摂取されます。 入院時に、治験看護スタッフは、治験の臨床コーディネーター (プロジェクトの主任研究者 2) に電話で、参加者の研究グループへの割り当て (集中的無作為化) を要求します。 これらのグループへの割り当ては、コンピュータで生成された乱数テーブルを使用して行われます。 性別と年齢 (50 歳を上限) ごとに 4 つのランダム化層が構築されます。

介入 参加者は、割り当てられた油を 1 日あたり 55 mL 摂取するように指示されます。できれば生で、3 回の主な食事に自由に分配して摂取してください。 OA 強化オリーブオイルと対照オイルは両方とも英数字コードのラベルが付けられて納品され、その対応関係はプロジェクトの主任研究者 1 のみが知っています。 これにより、割り当てられたオリーブオイルの種類に関して臨床研究者や参加者を盲目にすることができます。

フォローアップ 臨床試験の参加者は、四半期ごとの訪問計画に従って、登録から 12 か月間フォローアップされます。

参加者は募集時とその後 3 か月ごとに、身体測定、血圧、心拍数の測定が行われます。 また、胃腸障害やその他の種類の苦情についても質問され、ライフスタイル (食事、身体活動、アルコールとタバコの使用)、病状、および薬の使用に関するアンケートに記入します。

また、研究への参加の開始時とその後3か月ごとに、絶食時の血液サンプルが肘静脈から採取され、真空システムを備えた滅菌プラスチックチューブに収集されます。 同様に、参加者は朝一番の尿のアリコートを滅菌プラスチックチューブに入れて提供します。 血液と尿の分析的測定は、セビリアの「ビルヘン・デル・ロシオ」大学病院（HUVR）の臨床生化学・分析研究室で行われます。

さらに、血漿のアリコートは、補完的な生化学的測定のために「Instituto de la Grasa」（IG-CSIC）に送られます。 両施設の検査技師は英数字の ID コードで識別されたサンプルを受け取るため、介入グループについては知らされません。

これらの四半期ごとの訪問では、ボランティアは栄養教育プログラムのセッションに参加し、割り当てられたオイル 6 L を無料で受け取ります。 食事介入の順守は、ヘインズ・サケットの自己申告による順守テストと、おそらく消費されたと思われる空のボトルの返却を通じて四半期ごとに評価されます。

この試験の主な成果は、HbA1c の変化によって評価される血糖コントロールの改善です。 二次的な結果として、人体計測学的変数と臨床変数、さらに血液と尿の生化学的パラメータに関するデータが得られます。

参加者の既往歴と臨床検査 プロジェクトの医学研究者は、アンダルシア保健サービスのプラットフォーム DIRAYA にある参加者の電子医療記録にアクセスし、参加者の既往歴と健康診断を実施します。これには重要なデータが含まれます。一般的な病歴と手術歴、およびその後の薬理学的治療。 ライフスタイル、自分の身体イメージの認識、食事、身体活動の種類と強度に関する情報も取得されます。 さらに、一般的な臨床検査が行われます。これには、手と腕、足と脚、皮膚、顔、目、口、首、腹部、浮腫、リンパ節、バイタルサイン（体温、脈拍、呼吸数と血圧）。

人体測定研究と身体組成 人体測定研究には、総体重、身長、体格指数 (BMI)、ウエストおよびヒップ周囲径の測定が含まれます。 これらの変数の研究と評価は、国際キナントロメトリー推進協会 (ISAK) のガイドラインに従って実行されます。 体組成の研究は電気生体インピーダンスによって行われます。 この手法では、年齢と性別を調整した検証済みの予測式を使用して、脂肪量、除脂肪量、筋肉量、総水分、骨量、基礎代謝、内臓脂肪を定量化します。

食事摂取量の評価と栄養トレーニング 参加者の食事摂取量を評価し、与えられた食事推奨事項の順守を強化するために、栄養教育プログラムが実施されます。 食物摂取量を測定するには、ナバラ大学 (スペイン) が設計し、PREvención con DIeta MEDiterránea (PREDIMED) 研究などの他の試験で成功裏に使用されている食物摂取量登録フォームを使用します。 このフォームは、スペインに住む成人の食物摂取量を食品の部分または食品グループの観点から定量化する検証済みのツールです。 一方、参加者全員はワークショップに参加し、T2DM患者向けの具体的な食事の推奨事項を受け取り、高度に加工された食品、ケーキ、砂糖などを制限し、健康的な食事、最良の食品の選択肢と適切な量について指導されます。脂肪分の多い食べ物、甘い飲み物、アルコール飲料。 さらに、患者はレシピ、季節の買い物リスト、料理やドレッシングでのオリーブオイルの使用法についての情報を得ることができます。 参加者の食習慣は、24時間の回想アンケートによって四半期ごとに分析されます。 「NUTRIUM」ソフトウェア (https://nutrium.com/; ブラガ;ポルトガル）は、食事の栄養評価に使用されます。

HUVR での血液生化学 尺骨血液サンプルでは、​​循環脂質 [総トリグリセリド、総コレステロール、LDL、HDL、総アポリポタンパク質 B およびリポタンパク質 A] に関連する測定が行われます。グルコース恒常性[血糖、インスリン血症、C-ペプチド、HOMA-IRインデックス、HbA1c];酸化ストレスと炎症 [尿酸、ビリルビン、マロンジアルデヒド、超高感度 C 反応性タンパク質、甲状腺刺激ホルモン (TSH)]、肝臓および腎臓の損傷に関連するもの [乳酸デヒドロゲナーゼ (LDH)、肝トランスアミナーゼ (ALT、AST)] 、GGT）およびクレアチニン］が実行されます。

ビタミンB12の血漿レベルも評価されます。 さらに、肝線維症の出現の可能性は、年齢、性別、糖尿病の有無、血糖値、インスリン、アルブミン、血小板、そしてAST。 セビリア生物医学研究所 (IBiS) によって設計されたこのツールは、肥満、糖尿病、メタボリックシンドローム、脂肪肝、肝機能マーカー異常のある患者の線維症の疑いを評価することが示されています。 この方法は、FIB-4 や NAFLD 線維症スコアなどの他の方法よりも優れた診断の信頼性と費用対効果の比率を提供します。

継続的な血糖モニタリング 血漿グルコースは、「FreeStyle Libre」皮下システム（ABBOTT Diagnostics、シカゴ、イリノイ州、米国）を使用して継続的にモニタリングされる。 センサーは試験期間中、ベースライン時と12カ月の追跡調査後の2回に参加者に取り付けられ、48時間データを収集する。 このシステムを使用すると、曲線下面積 (AUC)、血糖変動の平均振幅 (MAGE)、平均血糖値、標準偏差 (SD) および血糖値の係数など、さまざまな血糖パラメーターが決定されます。バリエーション（CV）。

IG-CSIC における血漿生化学 IG-CSIC の研究者は、血漿 OA 濃度、グルタチオン (GSH および GSSG) レベル、脂肪酸組成、血清アディポカイン (セルロプラスミン) など、血漿サンプルの多くの補足的な測定を実行します。 、アディポネクチン、レプチン、レジスチン、グレリン）。 血清抗酸化酵素 (スーパーオキシドジスムターゼ、カタラーゼ) および炎症誘発性サイトカイン (TNF-α、IL-1β、IL-6) も測定されます。

一方、血漿リポタンパク質の VLDL 画分は超遠心分離 (230,000 × g、4 °C で 18 時間) によって分離されます。 これらの粒子では、脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、リン脂質、および総アポリポタンパク質 B の合計含有量が測定されます。

尿分析 朝一番の尿サンプルは、通常の物理的、化学的、および顕微鏡的測定 (pH、濃度、血糖、ケトン、亜硝酸塩、ウロビリノーゲン、ビリルビン、沈渣、白血球、微量アルブミン尿/クレアチニン g) のために分析されます。 これらのパラメーターの決定は、セビリアの「ビルヘン デル ロシオ」大学病院の臨床生化学および分析研究所の施設でも行われます。

統計分析 治験は治療意図（ITT）の原則に従って実施されます。 質的変数は絶対頻度と相対頻度で表されますが、正規分布を持つ量的変数は平均と標準偏差で表され、非正規分布の変数は中央値と四分位範囲 (IQR) で表されます。 質的変数の研究グループ間の比較はカイ二乗検定とマクネマー検定で実行され、量的変数の比較はスチューデントの t 検定と分散分析で実行されます。 割り当てグループに含まれる母集団の均一性は、マン・ホイットニー・ウィルコクソンの U 検定を使用して評価されます。 すべての P 値は、α = 0.05 で両側分布になります。 統計分析は SPSS 27 (IBM SPSS Statistics、ニューヨーク州、米国) ソフトウェアを使用して実行されます。