Prospektiv, randomiserad, dubbelblind jämförande studie om användningen av två krämer vid atopiska probands från Xerosis

Atopisk dermatit (AD) är en kroniskt återfallande inflammatorisk hudsjukdom och förekommer ofta med andra atopiska sjukdomar, såsom allergisk rinit, konjunktivit och astma (Biedermann och Röcken 1999, Biedermann et al. 2001, 2004, 2006; Leung et al. , 2003a, 2003b). Även om immunpatologin för AD inte är exakt förstådd, är det nya konceptet med atopisk dermatitpatologi idag baserat på en stor uppsättning data. Hos de flesta patienter med AD finns torr hud och dysfunktion av epidermal barriär. Som ett viktigt bevis på konceptet hittades en förlust av funktionsmutation av det epidermala proteinet filaggrin som försämrade hudbarriärfunktionen och kan detekteras hos cirka 15 % av kaukasiska AD-patienter (Palmer et al., 2006). Som en konsekvens är patienter med AD predisponerade för att utveckla sensibiliseringar som domineras av en Th2-immunfenotyp (Hudson, 2006).

Oberoende av filaggrinstudien visades det tidigare att en störd barriärfunktion i stratum corneum finns hos atopiker, inte bara i involverad hud, utan även i icke involverad torr hud, vilket underlättar genomträngning av olika miljöämnen i huden (Berardesca et al., 1990; Werner et al., 1985; Watanabe et al., 1991; Loden et al., 1992). Som en biomarkör kan en ökad nivå av transepidermal vattenförlust (TEWL) påvisas (Tagami et al., 1985; Ghadially et al., 1996). Olika funktionella och morfologiska studier på atopisk xeros som kliniskt uppträdde utan inflammation visade att cellulär inflammation redan finns i atopisk hud och ett viktigt och första steg i utvecklingen av atopisk dermatit (Watanabe et al., 1991; Uehara et al., 1984) . Faktum är att barriärdysfunktion, atopisk immunförändring och atopisk dermatitpatogenes inte är oberoende händelser, utan nära sammankopplade (Biedermann 2006; Hudson 2006). Th2-lymfocyter dominerar den atopiska immunfenotypen och är den underliggande celltypen som ansvarar för induktionen av IgE-antikroppar (Biedermann et al. 1999, 2004). Barriärdysfunktion predisponerar för utvecklingen av Th2-lymfocyter och Th2-celler är den första celltypen som invaderar atopisk hud som initierar inflammation och den inflammatoriska onda cirkeln av inflammation (Biedermann 2002; 2004; Lametschwandtner et al. 2004; Günther et al. 2005). Bredvid Th2-lymfocyter, i atopisk dermatit hudskador, hittas infiltrat av eosinofiler och celler från den mononukleära fagocytlinjen.

Den förändrade hudstrukturen hos personer med atopisk predisposition möjliggör ökad penetration av allergener och irriterande ämnen (Roll et al., 2004; Hudson 2006). Många studier har visat att omfattningen av S. aureus-kolonisering korrelerar med AD-sjukdomsaktivitet (Cho et al., 2001; Biedermann 2006). Hos mer än 90 % av AD-patienterna kan en massiv hudkolonisering med S. aureus (upp till 107cfu/cm2 lesional hud) hittas (Matsui et al., 2000). En förutsättning för bakteriell kolonisering är äkta barriärdysfunktion, mekanisk störning av barriären och utlösande av inflammation (repor), alkaliskt pH, minskad IgA-utsöndring genom svettproduktion, dominerande Th2-celler som hämmar anti-infektiösa immunsvar och minskade antimikrobiella peptider, allt representerar viktiga patofysiologiska egenskaper som leder till störningar av det primära hudförsvarssystemet (Biedermann et al. 2001; Biedermann&Röcken 2001; Biedermann et al. 2002; Biedermann 2006; Howell, 2005; Rieg 2005).

Bland flera mikrober som koloniserar huden kan bakterien Staphylococcus aureus (S. aureus) spela den viktigaste rollen i patogenesen av dermatit hos atopiska personer (Biedermann 2006). Denna kolonisering observeras inte bara i den involverade inflammatoriska huden utan även i den icke involverade torra huden. Förhållandet Staphylococcus aureus / Staphylococcus epidermidis är omvänt i jämförelse med frisk hud. Många studier har visat att omfattningen av S. aureus-kolonisering korrelerar med AD-sjukdomsintensitet (Cho et al., 2001).

Minskat uttryck av antimikrobiella peptider visades för AD-hud och gynnar kolonisering med S. aureus (Ong et al. N. Engl. J. Med. 2002; Howell et al.. Immunity. 2006;24:341-8; Rieg et al. JI 2006). Dessutom kan torr hud i sig tillåta kolonisering med bakterier såsom S. aureus. Minskade nivåer av sfingosin, som har antimikrobiella egenskaper och det faktum att S. aureus i sig stimulerar hydrolysen av ceramider av bakteriellt härrörande ceramidas i atopisk hud lägger till dysfunktionen hos immunbarriären vid AD (Arikawa et al., 2002; Kita et al. 2002). Cellmembranet hos S. aureus innehåller adhesiner för epidermalt och dermalt laminin och fibronektin som möjliggör vidhäftning av S. aureus. till huden och dessa dockningspositioner för S. aureus avslöjas i lesional hud (Cho et al, 2001). Den exakta mekanismen genom vilken S. aureus får tillgång till dermis är okänd, men det föreslås att återigen IL-4, producerat av T-hjälparceller av typ 2, inducerar fibronektinsyntes, vilket i kombination med plasmautsöndring av fibrinogen tillåter S. aureus för att binda till huden. Dessutom kan S. aureus innesluta sig i en slags biofilm som består av en hydratiserad matris av polysackarider (glycocalix) och proteiner, vilket stöder cellvidhäftning (Akiyama et al., 2003). Efter koloniseringen bidrar S. aureus till hudinflammation t.ex. genom att utsöndra toxiner och en rad så kallade patogenassocierade molekylära mönster (PAMP) som binder deras patogenigenkänningsreceptorer såsom Toll-liknande receptorer och som direkt utlöser inflammation (Biedermann 2006). Dessutom påverkar S. aureus PAMPs också T-cellsmedierad hudinflammation genom att indirekt reglera hudens målsökning av T-celler och orkestrera kronisk inflammation i AD-hud (Biedermann 2006; Biedermann et al. 2006).

Vitreoscilla filiformis (Vf) (ATCC15551) som används i denna studie är en icke-fotosyntetisk, icke-fruktgivande glidande bakterie som definieras enligt klassificeringen av Bergey's (1989). Denna filamentösa bakterie tillhör ordningen Beggiatoales. Det är en mikroorganism som finns i sodisk sulfurerade termiska källor som är kända för sina lokala anti-klåda och antiinflammatoriska egenskaper.

Mikroorganismen Vitreoscilla filiformis (Vf) odlades på ett definierat och sterilt medium, expanderades och isolerades för att bilda en biomassa som kallas "rent extrakt av termiskt plankton". Termen plankton beskriver djurplanktonet (kemiotropa mikroorganismer) i motsats till växtplanktonet (fototropa mikroorganismer). I slutet av odlingen koncentreras biomassan genom stabiliserad centrifugering och autoklaveras.

Den tekniska beredningen är en steril vattenhaltig suspension av planktonet. In vitro-studier visar att detta plankton stödjer produktionen av kollagen av fibroblaster och förstärker antioxidantsystemen; det förhindrar Langerhans cellförändringar (rekonstruerad hud eller organotypisk hudkultur) som utsätts för UVB. Det uppvisar icke-specifika immunmodulerande effekter på cellulär immunitet och i synnerhet på makrofager (patent US 6 190 671 B1; US ​​6 242 229 B1; WO-94/02158).

Prekliniska studier visade att detta extrakt har antiinflammatoriska aktiviteter (minskar öronödem efter sur arakidonbehandling och modulerar kontaktöverkänslighetsreaktion med oxazolon). Dessutom främjar denna nya förening läkning av epidermis och dermis (skrämmande efter sugblåsa eller efter snitt i prekliniska studier; patent US, 6 190 671 B1). Därför lovar denna nya förening att lindra infektioner som vanligtvis finns på huden efter hudbränning, skyddar huden mot ultravioletta förändringar och uppvisar fuktgivande egenskaper för huden.

Kliniska prövningar visade att bakterieextraktet Vitreoscilla filiformis är effektivt mot akne och seborroiskt eksem och främjar återfuktning av huden (studier i Seoul, Korea och i Nice, Frankrike och patent FR-2,283, 223) och har visat sig vara fördelaktigt för känsliga hud (klinisk prövning av Dr Desruelle F i Nice, Frankrike) Dessutom utfördes en randomiserad, dubbelblind, placebokontrollerad studie med ett formulerat 5% extrakt av Vitreoscilla filiformis på symmetriska aktiva lesioner av AD enligt en split-body design. med prof. J. F. Nicolas i Lyon, Frankrike.

I denna studie visade sig behandlingen (applicerad två gånger dagligen) med krämen innehållande 5 % Vitreoscilla filiformis-extrakt vara säker och väl tolererad. Dessutom lindrade detta extrakt signifikant AD hos äldre barn (från 7 år) och vuxna jämfört med vehikelbehandling (p=0,008; Wilcoxon undertecknade rangtestet). De terapeutiska effekterna av extraktet observerades inom den andra veckan efter appliceringen och ökade stadigt därefter. Denna effekt av krämen innehållande 5 % Vitreoscilla filiformis-extrakt verkade ha ett snabbt inträde, särskilt med avseende på klåda, vilket visades med hjälp av mEASI-index. Parade tester bekräftade en signifikant skillnad i minskningen av klåda på den 5 % Vitreoscilla filiformis-extraktbehandlade sidan på dag 28 (p=0,046, Wilcoxon exakt signerad rangtest). (Gueniche et al. 2006).

Vår uppgift var att utföra en dubbelblind randomiserad prospektiv studie som jämförde 5 % Vitreoscilla filiformis-extrakt (kräm B) med dess vehikel (kräm A) inklusive mätningar av biometriska förändringar som inträffar under användningen av de två krämerna.

Under studien dokumenterades biometriska och kliniska mätningar inklusive transepidermal vattenförlust, kvalificering och kvantifiering av hudens mikroflora och den kliniska utvärderingen av hudfynd före, under och efter användningen av krämerna. Vidare utvärderades probandens erfarenheter av användningen av krämerna. Biometriska variabler för huden bestäms före, under och efter användning av kräm A och kräm B.

Den transepidermala vattenförlusten som biometriskt värde uppskattades för att bedöma hudbarriärfunktionen vid alla besök.

Vi utvärderade om topisk applicering av kräm A och kräm B påverkade mikrofloran i huden hos atopiska frivilliga. Kvalificering och kvantifiering av flera bakterier (S. aureus, S. epidermis, P. acnes, streptokocker, E. coli) utfördes före, under och i slutet av studieperioden.

Dessutom bedömdes intensiteten av klåda och den kliniska aspekten av huden.

I slutet av studien fyllde varje volontär i ett frågeformulär som frågade om oljighet, distribution, konsistens och adsorption av krämerna.