Studio comparativo prospettico, randomizzato, in doppio cieco sull'uso di due creme nei probandi atopici da xerosi

La dermatite atopica (AD) è una malattia infiammatoria della pelle cronicamente recidivante e spesso coesiste con altre malattie atopiche, come la rinite allergica, la congiuntivite e l'asma (Biedermann e Röcken 1999, Biedermann et al. 2001, 2004, 2006; Leung et al., 2000 , 2003a, 2003b). Anche se la patologia immunitaria dell'AD non è compresa con precisione, oggi il nuovo concetto di patologia della dermatite atopica si basa su un ampio insieme di dati. Nella maggior parte dei pazienti con AD si riscontra pelle secca e disfunzione della barriera epidermica. Come importante dimostrazione del concetto, è stata trovata la perdita della mutazione funzionale della proteina epidermica filaggrina che compromette la funzione della barriera cutanea e può essere rilevata in circa il 15% dei pazienti con AD kaukasiano (Palmer et al., 2006). Di conseguenza, i pazienti con AD sono predisposti a sviluppare sensibilizzazioni dominate da un fenotipo immunitario Th2 (Hudson, 2006).

Indipendentemente dallo studio sulla filaggrina, è stato dimostrato in precedenza che una funzione di barriera interrotta dello strato corneo è presente negli atopici non solo nella pelle coinvolta, ma anche nella pelle secca non coinvolta che facilita la permeazione di varie sostanze ambientali nella pelle (Berardesca et al., 1990; Werner et al., 1985; Watanabe et al., 1991; Loden et al., 1992). Come biomarcatore, può essere dimostrato un aumento del livello di perdita di acqua transepidermica (TEWL) (Tagami et al., 1985; Ghadially et al., 1996). Vari studi funzionali e morfologici sulla xerosi atopica che appariva clinicamente senza infiammazione hanno dimostrato che l'infiammazione cellulare è già presente nella pelle atopica e rappresenta un passaggio chiave e iniziale nello sviluppo della dermatite atopica (Watanabe et al., 1991; Uehara et al., 1984) . Infatti, la disfunzione della barriera, la disregolazione immunitaria atopica e la patogenesi della dermatite atopica non sono eventi indipendenti, ma strettamente collegati (Biedermann 2006; Hudson 2006). I linfociti Th2 dominano il fenotipo immunitario atopico e sono il tipo cellulare sottostante responsabile dell'induzione degli anticorpi IgE (Biedermann et al. 1999, 2004). La disfunzione della barriera predispone allo sviluppo dei linfociti Th2 e le cellule Th2 sono il primo tipo di cellula che invade la pelle atopica dando inizio all'infiammazione e al circolo vizioso infiammatorio dell'infiammazione (Biedermann 2002; 2004; Lametschwandtner et al. 2004; Günther et al. 2005). Accanto ai linfociti Th2, nelle lesioni cutanee della dermatite atopica si trovano infiltrati di eosinofili e cellule della linea dei fagociti mononucleati.

L'alterata struttura cutanea delle persone con predisposizione atopica consente una maggiore penetrazione di allergeni e sostanze irritanti (Roll et al., 2004; Hudson 2006). Molti studi hanno dimostrato che l'estensione della colonizzazione da S. aureus è correlata con l'attività della malattia AD (Cho et al., 2001; Biedermann 2006). In oltre il 90% dei pazienti con AD si può riscontrare una massiccia colonizzazione cutanea da S. aureus (fino a 107 cfu/cm2 di cute lesionata) (Matsui et al., 2000). Un prerequisito per la colonizzazione batterica è la vera disfunzione della barriera, la rottura meccanica della barriera e l'innesco dell'infiammazione (graffio), il pH alcalino, la diminuzione della secrezione di IgA attraverso la produzione di sudore, le cellule Th2 predominanti che inibiscono le risposte immunitarie anti-infettive e i peptidi antimicrobici ridotti, tutti che rappresentano importanti caratteristiche fisiopatologiche che portano alla rottura del sistema di difesa primario della pelle (Biedermann et al. 2001; Biedermann&Röcken 2001; Biedermann et al. 2002; Biedermann 2006; Howell, 2005; Rieg 2005).

Tra i numerosi microbi che colonizzano la pelle, il batterio Staphylococcus aureus (S. aureus) può svolgere il ruolo più importante nella patogenesi della dermatite delle persone atopiche (Biedermann 2006). Questa colonizzazione si osserva non solo nella pelle infiammatoria coinvolta ma anche nella pelle secca non coinvolta. Il rapporto Staphylococcus aureus / Staphylococcus epidermidis è inverso rispetto alla pelle sana. Molti studi hanno dimostrato che l'estensione della colonizzazione da S. aureus è correlata all'intensità della malattia di AD (Cho et al., 2001).

La ridotta espressione di peptidi antimicrobici è stata dimostrata per la pelle AD e favorisce la colonizzazione con S. aureus (Ong et al. N. inglese J.Med. 2002; Howell et al.. Immunità. 2006;24:341-8; Rieg et al. JI 2006). Inoltre, la pelle secca può da sola consentire la colonizzazione con batteri come S. aureus. Livelli ridotti di sfingosina, che ha proprietà antimicrobiche e il fatto che S. aureus stesso stimoli l'idrolisi dei ceramidi da parte della ceramidasi di derivazione batterica nella pelle atopica, aggiungono la disfunzione della barriera immunitaria nell'AD (Arikawa et al., 2002; Kita et al, 2002). La membrana cellulare di S. aureus contiene adesine per la laminina epidermica e dermica e la fibronectina che consentono l'adesione di S. aureus. alla pelle e queste posizioni di attracco per S. aureus sono scoperte nella pelle lesionata (Cho et al, 2001). Il meccanismo preciso con cui S. aureus ottiene l'accesso al derma è sconosciuto, ma si suggerisce che ancora una volta IL-4, prodotto dalle cellule T helper di tipo 2, induca la sintesi di fibronectina, che in combinazione con l'essudazione plasmatica del fibrinogeno, consente a S. aureus per legarsi alla pelle. Inoltre, S. aureus è in grado di racchiudersi in una sorta di biofilm composto da una matrice idratata di polisaccaridi (glicocalix) e proteine, che supporta l'adesione cellulare (Akiyama et al., 2003). Dopo la colonizzazione, S. aureus contribuisce all'infiammazione della pelle, ad es. secernendo tossine e una serie di cosiddetti pattern molecolari associati ai patogeni (PAMP) che legano i loro recettori di riconoscimento dei patogeni come i recettori Toll-like e innescando direttamente l'infiammazione (Biedermann 2006). Inoltre, i PAMP di S. aureus influenzano anche l'infiammazione cutanea mediata dalle cellule T regolando indirettamente l'homing cutaneo delle cellule T e orchestrando l'infiammazione cronica nella pelle AD (Biedermann 2006; Biedermann et al. 2006).

Vitreoscilla filiformis (Vf) (ATCC15551) utilizzato in questo studio è un batterio planante non fotosintetico e non fruttifero come definito secondo la classificazione di Bergey (1989). Questo batterio filamentoso appartiene all'ordine dei Beggiatoales. È un microrganismo presente nelle sorgenti termali solforate sodiche, riconosciuto per le sue proprietà locali antipruriginose e antinfiammatorie.

Il microrganismo Vitreoscilla filiformis (Vf) è stato coltivato su un terreno definito e sterile, espanso e isolato per costituire una biomassa denominata "estratto puro di plancton termale". Il termine plancton descrive lo zooplancton (microrganismi chemiotropi) in contrasto con il fitoplancton (microrganismi fototropi). Al termine della coltura, la biomassa viene concentrata mediante centrifugazione stabilizzata e autoclavata.

Il preparato tecnico è una sospensione acquosa sterile del plancton. Studi in vitro dimostrano che questo plancton supporta la produzione di collagene da parte dei fibroblasti e rafforza i sistemi antiossidanti; previene le alterazioni delle cellule di Langerhans (pelle ricostruita o coltura organotipica) esposte ai raggi UVB. Presenta effetti immunomodulatori aspecifici sull'immunità cellulare ed in particolare sui macrofagi (Brevetto US, 6,190,671 B1; US, 6,242,229 B1; WO-94/02158).

Studi preclinici hanno dimostrato che questo estratto ha attività antinfiammatorie (diminuisce l'edema dell'orecchio dopo il trattamento con acido arachidonico e modula la reazione di ipersensibilità da contatto con ossazolone). Inoltre, questo nuovo composto favorisce la guarigione dell'epidermide e del derma (cicatrizzazione in seguito a vesciche da aspirazione o in seguito a incisione in studi preclinici; Brevetto US, 6,190,671 B1). Pertanto, questo nuovo composto promette di alleviare le infezioni solitamente riscontrate sulla pelle dopo la scottatura della pelle, protegge la pelle dalle alterazioni ultraviolette e mostra proprietà idratanti per la pelle.

Gli studi clinici hanno dimostrato che l'estratto batterico Vitreoscilla filiformis è efficace contro l'acne e la dermatite seborroica e favorisce l'idratazione della pelle (studi a Seoul, Corea e a Nizza, Francia e brevetto FR-2,283, 223) e ha dimostrato di essere benefico per le persone sensibili pelle (studio clinico del dott. Desruelle F a Nizza, Francia) Inoltre, è stato eseguito uno studio randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo con un estratto formulato al 5% di Vitreoscilla filiformis su lesioni attive simmetriche di AD secondo un disegno split-body con il Prof. J. F. Nicolas a Lione, Francia.

In questo studio, il trattamento (applicato due volte al giorno) con la crema contenente il 5% di estratto di Vitreoscilla filiformis è risultato sicuro e ben tollerato. Inoltre, questo estratto ha alleviato significativamente l'AD nei bambini più grandi (dai 7 anni) e negli adulti rispetto al trattamento con veicolo (p=0,008; Wilcoxon ha firmato il test dei ranghi). Gli effetti terapeutici dell'estratto sono stati osservati entro la seconda settimana dall'applicazione e successivamente sono aumentati costantemente. Questo effetto della crema contenente il 5% di estratto di Vitreoscilla filiformis sembrava avere una rapida insorgenza soprattutto per quanto riguarda il prurito, come dimostrato utilizzando l'indice mEASI. I test appaiati hanno confermato una differenza significativa nella diminuzione del prurito sul lato trattato con estratto di Vitreoscilla filiformis al 5% al ​​giorno 28 (p=0,046, test dei ranghi esatti di Wilcoxon). (Gueniche et al. 2006).

Il nostro compito era eseguire uno studio prospettico randomizzato in doppio cieco confrontando l'estratto di Vitreoscilla filiformis al 5% (crema B) con il suo veicolo (crema A), comprese le misurazioni dei cambiamenti biometrici che si verificano durante l'uso delle due creme.

Durante lo studio sono state documentate misurazioni biometriche e cliniche tra cui la perdita di acqua transepidermica, la qualificazione e la quantificazione della microflora cutanea e la valutazione clinica dei reperti cutanei prima, durante e dopo l'uso delle creme. Inoltre sono state valutate le esperienze del probando con l'uso delle creme. Le variabili biometriche della pelle vengono determinate prima, durante e dopo l'uso della crema A e della crema B.

La perdita di acqua transepidermica come valore biometrico è stata stimata per valutare la funzione di barriera cutanea a tutte le visite.

Abbiamo valutato se l'applicazione topica di crema A e crema B ha influenzato la microflora della pelle dei volontari atopici. La qualificazione e la quantificazione di diversi batteri (S. aureus, S. epidermis, P. acnes, Streptococchi, E. coli) è stata eseguita prima, durante e alla fine del periodo di studio.

Inoltre, è stata valutata l'intensità del prurito e l'aspetto clinico della pelle.

Alla fine dello studio ogni volontario ha compilato un questionario chiedendo informazioni su untuosità, distribuzione, consistenza e assorbimento delle creme.