Erytrocytbundet apolipoprotein B efter utsättning av statinterapi (EBABAST)

INTRODUKTION:

Tidigare har det visats att aterogent apolipoprotein (apo) B-innehållande lipoproteiner binder till erytocyter.1-3 Studier från vårt laboratorium har visat att bindningen av apoB på erytrocyter (ery-apoB) kan återspegla en situation av skydd mot hjärt-kärlsjukdom (CVD).4 Genomsnittlig ery-apoB är signifikant lägre hos försökspersoner med känd hjärt-kärlsjukdom jämfört med friska kontroller. Användningen av statiner kan dock vara en viktig förvirrande faktor på grund av dess kända LDL-C och serum-apoB-sänkande effekter.5, 6 I vår pågående studiepopulation var 91 % av patienterna med hjärt-kärlsjukdom på statinbehandling jämfört med endast 19 % av försökspersonerna utan hjärt-kärlsjukdom. Preliminära data visade åtminstone en viss effekt av statinbehandling på ery-apoB. En blygsam, men signifikant negativ korrelation hittades mellan ery-apoB och serum-apoB och LDL-kolesterol hos försökspersoner utan statiner (Pearsons r -0,172 och -0,185, P < 0,05) men dessa korrelationer gick förlorade hos försökspersoner som använde statiner. Statiner är kända för sin hämning av HMG-CoA-reduktas, vilket är nödvändigt för levern för att syntetisera kolesterol, och öka uttrycket av lever-LDL-receptorer vilket resulterar i sänkning av LDL-kolesterol och dess relaterade apoB.7, 8 Teoretiskt sett apoB kan också sänkas av statiner, vilket kan vara en förklaring till skillnaderna i ery-apoB mellan patienter med eller utan hjärt-kärlsjukdom. Denna interventionsstudie är att utforska effekterna av statinterapi på ery-apoB.

SYFTE:

För att undersöka effekterna av statinbehandling på plasmanivåer av erytrocytbundet apolipoprotein B.

HYPOTES:

Ery-apoB kommer att öka efter utsättning av statin på grund av högre total plasma-apoB.

METODER OCH MATERIAL:

Studiepopulation Försökspersonerna kommer att vara män och kvinnor i åldern 18 år eller äldre som går på statinbehandling för medicinska ändamål som primär eller sekundär hyperkolesterolemi eller förekomst av hjärt-kärlsjukdom. Uteslutningskriterier är instabil angina pectoris, en akut kardiovaskulär händelse (dvs. hjärtinfarkt, perkutan kranskärlsintervention, stroke eller bypasskirurgi) under de senaste 6 månaderna eller användning av något annat lipidsänkande läkemedel som ezetimib eller fibrater förutom statinbehandling under de senaste 6 månaderna.

Studera design

Totalt kommer 53 försökspersoner att besöka polikliniken två gånger. Följande procedurer kommer att utföras under det första besöket:

• Enkät för att få information om patientens sjukdomshistoria, läkemedelsprofil och läkarnas kontaktuppgifter.
• Mätning av antropometriska variabler (blodtryck, längd, vikt och midja).
• Venpunktion (1 propprör, 1 heparinrör, 1 EDTA-rör och 1 glukosrör, totalt 18ml blod).
• Tillfälligt avbrytande av statinbehandling i 6 veckor. Sex veckor efter det första besöket kommer de deltagande försökspersonerna att besöka polikliniken igen för ytterligare en venpunktion (1 blodproppsrör, 1 heparinrör, 1 EDTA-rör och 1 glukosrör, totalt 18 ml blod). Försökspersonerna kommer att börja igen med sin ursprungliga statinbehandling efteråt (samma typ av läkemedel och dosering). Statinbehandling kommer dock att inledas tidigare om patienten lider av en akut kardiovaskulär händelse under studieperioden. Försökspersoner kommer att övervakas per telefon för biverkningar 8 veckor efter avslutad studie.

Intervention Statinbehandling kommer att avbrytas under en period av sex veckor.

Analytiska bestämningar Grundläggande parametrar för njurfunktion samt glukos, CRP, totalkolesterol, HDL-C och TG kommer att bestämmas med Synchrom LX analysator (Beckman Coulter, Anaheim CA, USA). LDL-C-värden kommer att beräknas med Friedewald-formeln. ApoAI och ApoB kommer att bestämmas genom hastighetsnefelometri med hjälp av IMAGE av kommersiellt tillgängliga kit från Beckman (Beckman Coulter Anaheim, CA, USA). Antalet blodkroppar bestäms automatiskt med LH-analysator (Beckman Coulter, CA, USA). Leukocytdifferentieringen kommer att bestämmas som en femdelad differentiering på samma instrument. ApoB på blodkroppar kommer att detekteras genom indirekt immunfluorescens utvärderad med flödescytometri, tidigare validerad och publicerad.9

Nödvändigt material

• Flödescytometer (Beckman Coulter, USA)
• Validerat mätprotokoll för ery-apoB på flödescytometri
• Uttagningsutrustning för venöst blod och blodrör
• Finansiering: Stichting Onderzoek & Ontwikkeling Sint Franciscus Gasthuis och Klinisch Chemisch Laboratorium Sint Franciscus Gasthuis står för kostnaderna

Undersökningsprodukt Läkemedelsgruppen statiner är undersökningsprodukten. De vanligast föreskrivna statinerna är simvastatin, atorvastatin, rosuvastatin, pravastatin och fluvastatin med doser från 5 mg till 80 mg administrerat en gång dagligen.10 Statiner hämmar HMG-CoA-reduktas, som är nödvändigt för att levern ska syntetisera kolesterol, och sänker därefter LDL-kolesterol och dess relaterade apo B.7, 8 Atorvastatin och rosuvastatin visar den längsta terminala halveringstiden (11-14 timmar) jämfört med de andra statinerna (1-3 timmar).11 Biotillgängligheten av statiner är låg på grund av en omfattande first-pass-effekt i tarmen och i levern och alla utom pravastatin visar aktiva metaboliter.11 Alla aktiva metaboliter av statiner kommer att elimineras efter utsättning av statiner i sex veckor.

Statistikämnen kommer att fungera som sin egen kontrollgrupp. Därför kommer det parade T-testet att användas för att testa för signifikanta skillnader i ery-apoB före och efter utsättande av statinbehandling. Skillnaderna i ery-apoB före och efter utsättande av statinbehandling kontrolleras för normalitet med Shapiro-Wilk-testet. Ett P-värde under 0,05 kommer att betraktas som statistiskt signifikant.

Pågående observationsstudier har visat en genomsnittlig skillnad på 0,25 mellan patienter med och utan statinbehandling. En nyligen avslutad pilot har visat ett SD på skillnaden på 0,64 istället för tidigare uppskattat SD på 0,50. För att visa en signifikant skillnad av ery-apoB med en medelskillnad på 0,25 a.u. och ett SD på skillnaden på 0,64 bör minst 53 försökspersoner inkluderas i analysen (effekten är 80 %, alfa är 0,05 dubbelsidig).

Säkerhetsrapportering Utredaren kommer att informera försökspersonerna och den granskande ackrediterade METC om något inträffar, på basis av vilket det visar sig att nackdelarna med deltagande kan vara betydligt större än vad som förutsågs i forskningsförslaget. Studien kommer att avbrytas i avvaktan på ytterligare granskning av ackrediterade METC, förutom i den mån misstanke äventyrar försökspersonernas hälsa. Utredaren kommer att se till att alla försökspersoner hålls informerade.

Biverkningar (AE) definieras som alla oönskade upplevelser som inträffar hos en patient under studien, oavsett om de anses relaterade till den undersökta behandlingen eller inte. Alla biverkningar som rapporteras spontant av försökspersonen eller observeras av utredaren eller hans personal kommer att registreras. En allvarlig biverkning (SAE) är varje ogynnsam medicinsk händelse eller effekt som vid vilken dos som helst leder till döden, är livshotande, kräver sjukhusvistelse eller förlängning eller existerar i patienternas sjukhusvistelse, resulterar i ihållande funktionshinder eller påverkar patienternas säkerhet på något sätt. Dessa allvarliga biverkningar kommer att rapporteras via webbportalen "Toetsing Online" till den ackrediterade METC som godkände protokollet.

Biverkningar som kan förväntas när det gäller utsättande av statiner under en period av sex veckor är förekomsten av en akut kardiovaskulär händelse eller "statinabstinenssyndrom". Studier har visat att utsättande av statinbehandling är förenat med sämre resultat efter ett akut kranskärlssyndrom, stroke eller kärlkirurgi.12 Ingen ökning av negativa utfall observerades dock hos patienter med stabil kronisk kranskärlssjukdom efter det tillfälliga avbrottet av statinbehandlingen.12 Prevalensen av statinrelaterade muskelbesvär är 1-10%.13 Risken för statinrelaterade muskelbesvär efter återstart av statin efter fyra veckors uppehåll kommer dock att vara mycket liten eftersom försökspersonerna redan hade samma statin innan de deltog i studien. Det finns inga tydliga bevis för några betydande skador eller effekter på livskvalitet orsakade av statiner i en grupp på 34 272 försökspersoner.14