Apolipoproteina B legata agli eritrociti dopo sospensione della terapia con statine (EBABAST)

INTRODUZIONE:

In precedenza è stato dimostrato che le lipoproteine ​​contenenti apolipoproteina (apo) B aterogenica si legano agli eritociti.1-3 Studi del nostro laboratorio hanno dimostrato che il legame dell'apoB sugli eritrociti (ery-apoB) può riflettere una situazione di protezione contro le malattie cardiovascolari (CVD).4 La media di ery-apoB è significativamente più bassa nei soggetti con CVD nota rispetto ai controlli sani. Tuttavia, l'uso di statine potrebbe essere un importante fattore di confusione, a causa dei suoi noti effetti di riduzione del C-LDL e dell'apoB sierica.5,6 Nella nostra popolazione di studio in corso il 91% dei pazienti con CVD era in terapia con statine rispetto a 19% dei soggetti senza CVD. I dati preliminari hanno mostrato almeno qualche effetto della terapia con statine su ery-apoB. Una modesta, ma significativa correlazione negativa è stata trovata tra ery-apoB e siero apoB e LDL-colesterolo in soggetti senza statine (r di Pearson -0,172 e -0,185, P <0,05) ma queste correlazioni sono state perse nei soggetti che usavano statine. Le statine sono note per la loro inibizione dell'HMG-CoA reduttasi, che è necessaria al fegato per sintetizzare il colesterolo, e per aumentare l'espressione dei recettori LDL epatici con conseguente abbassamento del colesterolo LDL e della sua apoB correlata. apoB può essere abbassato anche dalle statine, il che potrebbe spiegare le differenze di ery-apoB tra soggetti con o senza CVD. Questo studio interventistico ha lo scopo di esplorare gli effetti della terapia con statine su ery-apoB.

SCOPO:

Per studiare gli effetti della terapia con statine sui livelli plasmatici di apolipoproteina B legata agli eritrociti.

IPOTESI:

Ery-apoB aumenterà dopo la sospensione delle statine a causa dell'aumento dell'apoB plasmatica totale.

METODI E MATERIALI:

Popolazione in studio I soggetti saranno maschi e femmine di età pari o superiore a 18 anni che sono in terapia con statine per scopi medici come l'ipercolesterolemia primaria o secondaria o la presenza di CVD. I criteri di esclusione sono l'angina pectoris instabile, un evento cardiovascolare acuto (es. infarto del miocardio, intervento coronarico percutaneo, ictus o intervento chirurgico di bypass) negli ultimi 6 mesi o l'uso di qualsiasi altro farmaco ipolipemizzante come ezetimibe o fibrati oltre alla terapia con statine negli ultimi 6 mesi.

Progettazione dello studio

Un totale di 53 soggetti visiterà la clinica ambulatoriale due volte. Durante la prima visita verranno eseguite le seguenti procedure:

• Questionario per ottenere informazioni sulla storia medica del paziente, sul profilo terapeutico e sui recapiti del medico di medicina generale.
• Misurazione delle variabili antropometriche (pressione arteriosa, lunghezza, peso e vita).
• Venipuntura (1 tubo di coagulo, 1 tubo di eparina, 1 tubo di EDTA e 1 tubo di glucosio, per un totale di 18 ml di sangue).
• Interruzione temporanea della terapia con statine per 6 settimane. Sei settimane dopo la prima visita i soggetti partecipanti si recheranno nuovamente in ambulatorio per un'altra venipuntura (1 tubo di coagulo, 1 tubo di eparina, 1 tubo di EDTA e 1 tubo di glucosio, per un totale di 18 ml di sangue). Successivamente i soggetti ricominceranno con la loro terapia con statine originale (stesso tipo di farmaco e dosaggio). Tuttavia, la terapia con statine verrà iniziata prima se il soggetto soffre di un evento cardiovascolare acuto durante il periodo di studio. I soggetti dello studio saranno monitorati telefonicamente per eventi avversi 8 settimane dopo aver terminato lo studio.

Intervento La terapia con statine verrà interrotta per un periodo di sei settimane.

Determinazioni analitiche I parametri di base per la funzione renale così come glucosio, CRP, colesterolo totale, HDL-C e TG saranno determinati utilizzando l'analizzatore Synchrom LX (Beckman Coulter, Anaheim CA, USA). I valori di LDL-C saranno calcolati utilizzando la formula di Friedewald. L'ApoAI e l'ApoB saranno determinati mediante rate nephelometry utilizzando IMAGE mediante kit disponibili in commercio forniti da Beckman (Beckman Coulter Anaheim CA, USA). La conta delle cellule del sangue sarà determinata automaticamente utilizzando l'analizzatore di LH (Beckman Coulter, CA, USA). La differenziazione leucocitaria sarà determinata come differenziazione in cinque parti sugli stessi strumenti. L'ApoB sulle cellule del sangue sarà rilevata mediante immunofluorescenza indiretta valutata mediante citometria a flusso, precedentemente validata e pubblicata.9

Materiali richiesti

• Citometro a flusso (Beckman Coulter, USA)
• Protocollo di misurazione convalidato per ery-apoB su citometria a flusso
• Apparecchiature per il prelievo di sangue venoso e provette per il sangue
• Finanziamento: Stichting Onderzoek & Ontwikkeling Sint Franciscus Gasthuis e Klinisch Chemisch Laboratorium Sint Franciscus Gasthuis coprono i costi

Prodotto sperimentale Il gruppo di farmaci delle statine è il prodotto della ricerca. Le statine più frequentemente prescritte sono simvastatina, atorvastatina, rosuvastatina, pravastatina e fluvastatina con dosaggi che vanno da 5 mg a 80 mg somministrati una volta al giorno.10 Le statine inibiscono l'HMG-CoA reduttasi, necessaria al fegato per sintetizzare il colesterolo, e successivamente abbassano il colesterolo LDL e la sua apo B correlata.7, 8 Atorvastatina e rosuvastatina mostrano l'emivita terminale più lunga (11-14 ore) rispetto a le altre statine (1-3 ore).11 La biodisponibilità delle statine è bassa a causa di un esteso effetto di primo passaggio a livello intestinale e a livello del fegato e tutte tranne la pravastatina mostrano metaboliti attivi.11 Tutti i metaboliti attivi delle statine saranno eliminati dopo l'interruzione delle statine per sei settimane.

I soggetti statistici fungeranno da gruppo di controllo. Pertanto, il test T appaiato verrà utilizzato per testare differenze significative in ery-apoB prima e dopo la sospensione della terapia con statine. Le differenze di ery-apoB prima e dopo la sospensione della terapia con statine vengono verificate per verificarne la normalità utilizzando il test di Shapiro-Wilk. Un valore P inferiore a 0,05 sarà considerato statisticamente significativo.

Studi osservazionali in corso hanno mostrato una differenza media di 0,25 tra soggetti con e senza terapia con statine. Un progetto pilota completato di recente ha mostrato una deviazione standard della differenza di 0,64 invece della deviazione standard precedentemente stimata di 0,50. Per dimostrare una differenza significativa di ery-apoB con una differenza media di 0,25 a.u. e una DS della differenza di 0,64, almeno 53 soggetti dovrebbero essere inclusi nell'analisi (la potenza è dell'80%, l'alfa è 0,05 a due code).

Segnalazione sulla sicurezza Lo sperimentatore informerà i soggetti e il METC accreditato di revisione se si verifica qualcosa, sulla base del quale sembra che gli svantaggi della partecipazione possano essere significativamente maggiori di quanto previsto nella proposta di ricerca. Lo studio sarà sospeso in attesa di ulteriore revisione da parte del METC accreditato, salvo nella misura in cui il sospetto metta a repentaglio la salute dei soggetti. L'investigatore si prenderà cura che tutti i soggetti siano tenuti informati.

Gli eventi avversi (AE) sono definiti come qualsiasi esperienza indesiderata verificatasi a un soggetto durante lo studio, considerata o meno correlata al trattamento studiato. Verranno registrati tutti gli eventi avversi segnalati spontaneamente dal soggetto o osservati dallo sperimentatore o dal suo staff. Un evento avverso grave (SAE) è qualsiasi evento o effetto medico sfavorevole che a qualsiasi dose provoca la morte, è pericoloso per la vita, richiede l'ospedalizzazione o il prolungamento o esiste durante l'ospedalizzazione dei pazienti, si traduce in una persistente disabilità o incapacità o pregiudica la sicurezza dei soggetti in ogni modo. Tali eventi avversi gravi saranno segnalati attraverso il portale web "Toetsing Online" al METC accreditato che ha approvato il protocollo.

Gli eventi avversi che possono essere attesi in relazione alla sospensione delle statine per un periodo di sei settimane sono il verificarsi di un evento cardiovascolare acuto o "sindrome da sospensione delle statine". Gli studi hanno dimostrato che l'interruzione della terapia con statine è associata a esiti peggiori dopo una sindrome coronarica acuta, un ictus o un intervento chirurgico vascolare.12 Tuttavia, non è stato osservato alcun aumento degli esiti avversi nei pazienti con malattia coronarica cronica stabile dopo la temporanea interruzione della terapia con statine.12 La prevalenza dei disturbi muscolari correlati alle statine è dell'1-10%.13 Tuttavia, il rischio di disturbi muscolari correlati alle statine dopo aver ripreso la statina dopo quattro settimane di sospensione sarà molto basso poiché i soggetti dello studio erano già sulla stessa statina prima della partecipazione allo studio. Non vi è alcuna chiara evidenza di danni o effetti significativi sulla qualità della vita causati dalle statine in un gruppo di 34.272 soggetti dello studio.14