Связанный с эритроцитами аполипопротеин В после отмены статиновой терапии (EBABAST)

ВВЕДЕНИЕ:

Ранее было показано, что атерогенный аполипопротеин (апо) В, содержащий липопротеины, связывается с эритроцитами.1-3 Исследования, проведенные в нашей лаборатории, показали, что связывание апоВ с эритроцитами (эри-апоВ) может отражать состояние защиты от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ)4. Среднее значение ery-apoB значительно ниже у субъектов с известными сердечно-сосудистыми заболеваниями по сравнению со здоровыми людьми из контрольной группы. Тем не менее, использование статинов может быть важным искажающим фактором из-за их известного эффекта снижения уровня холестерина ЛПНП и апоВ в сыворотке. 19% субъектов без ССЗ. Предварительные данные показали, по крайней мере, некоторое влияние терапии статинами на ery-apoB. Скромная, но значимая отрицательная корреляция была обнаружена между ery-apoB и сывороточным апоB и холестерином ЛПНП у субъектов, не принимавших статины (r Пирсона -0,172 и -0,185, P <0,05), но эти корреляции были потеряны у субъектов, принимавших статины. Статины известны своим ингибированием ГМГ-КоА-редуктазы, которая необходима печени для синтеза холестерина, и повышением экспрессии печеночных рецепторов ЛПНП, что приводит к снижению уровня холестерина ЛПНП и связанного с ним апоВ. АпоВ также может быть снижен под действием статинов, что может быть объяснением различий в эри-апоВ между субъектами с сердечно-сосудистыми заболеваниями и без них. Это интервенционное исследование предназначено для изучения влияния терапии статинами на ery-apoB.

ЦЕЛЬ:

Исследовать влияние терапии статинами на уровень аполипопротеина В, связанного с эритроцитами, в плазме крови.

ГИПОТЕЗА:

Ery-апоВ будет увеличиваться после отмены статинов из-за более высокого уровня общего апоВ в плазме.

МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ:

Субъектами исследования будут мужчины и женщины в возрасте 18 лет и старше, получающие терапию статинами по медицинским показаниям, таким как первичная или вторичная гиперхолестеринемия или наличие сердечно-сосудистых заболеваний. Критериями исключения являются нестабильная стенокардия, острое сердечно-сосудистое событие (т. инфаркт миокарда, чрескожное коронарное вмешательство, инсульт или шунтирование) в течение последних 6 месяцев или использование любых других препаратов, снижающих уровень липидов, таких как эзетимиб или фибраты, кроме терапии статинами, в течение последних 6 месяцев.

Дизайн исследования

Всего амбулаторию дважды посетят 53 человека. Во время первого визита будут выполнены следующие процедуры:

• Анкета для получения информации об истории болезни пациента, профиле лекарств и контактной информации врачей общей практики.
• Измерение антропометрических переменных (артериальное давление, длина тела, вес и объем талии).
• Венепункция (1 пробирка со сгустком, 1 пробирка с гепарином, 1 пробирка с ЭДТА и 1 пробирка с глюкозой, всего 18 мл крови).
• Временное прекращение терапии статинами на 6 недель. Через шесть недель после первого посещения участвующие субъекты снова посетят амбулаторную клинику для еще одной венепункции (1 пробирка со сгустком крови, 1 пробирка с гепарином, 1 пробирка с ЭДТА и 1 пробирка с глюкозой, всего 18 мл крови). После этого субъекты снова начнут свою первоначальную терапию статинами (тот же тип препарата и дозировка). Однако терапия статинами будет начата раньше, если субъект страдает от острого сердечно-сосудистого события в течение периода исследования. Субъекты исследования будут отслеживаться по телефону на предмет нежелательных явлений через 8 недель после окончания исследования.

Вмешательство Терапия статинами будет прекращена на шесть недель.

Аналитические определения Основные параметры почечной функции, а также глюкоза, СРБ, общий холестерин, HDL-C и TG будут определяться с использованием анализатора Synchrom LX (Beckman Coulter, Анахайм, Калифорния, США). Значения ХС-ЛПНП будут рассчитываться по формуле Фридевальда. ApoAI и ApoB будут определять с помощью нефелометрии скорости с использованием IMAGE с помощью коммерчески доступных наборов, предоставленных Beckman (Beckman Coulter Anaheim CA, USA). Количество клеток крови будет определяться автоматически с помощью анализатора ЛГ (Beckman Coulter, Калифорния, США). Дифференцировка лейкоцитов будет определяться как пятичастная дифференцировка на тех же инструментах. ApoB на клетках крови будет обнаружен с помощью непрямой иммунофлуоресценции, оцениваемой с помощью проточной цитометрии, ранее подтвержденной и опубликованной.9

Требуемые материалы

• Проточный цитометр (Beckman Coulter, США)
• Утвержденный протокол измерения ery-apoB при проточной цитометрии
• Оборудование для забора венозной крови и пробирки для крови
• Финансирование: Stichting Onderzoek & Ontwikkeling Sint Franciscus Gasthuis и Klinisch Chemisch Laboratorium Sint Franciscus Gasthuis покрывают расходы.

Исследовательский продукт Лекарственная группа статинов является продуктом исследования. Наиболее часто назначаемыми статинами являются симвастатин, аторвастатин, розувастатин, правастатин и флувастатин в дозах от 5 до 80 мг один раз в день.10 Статины ингибируют ГМГ-КоА-редуктазу, которая необходима печени для синтеза холестерина, и впоследствии снижают уровень холестерина ЛПНП и связанного с ним апоВ. другие статины (1-3 часа).11 Биодоступность статинов низкая из-за обширного эффекта первого прохождения через кишечник и печень, и все, кроме правастатина, обнаруживают активные метаболиты.11 Все активные метаболиты статинов выводятся после прекращения приема статинов в течение шести недель.

Субъекты статистики будут служить своей собственной контрольной группой. Таким образом, парный Т-тест будет использоваться для проверки значительных различий в ery-apoB до и после отмены статиновой терапии. Различия в ery-apoB до и после отмены статиновой терапии проверяют на нормальность с помощью теста Шапиро-Уилка. Значение P ниже 0,05 будет считаться статистически значимым.

Текущие обсервационные исследования показали среднюю разницу в 0,25 между субъектами с терапией статинами и без нее. Недавно завершенный пилотный проект показал стандартное отклонение разницы в 0,64 вместо ранее оцененного стандартного отклонения в 0,50. Чтобы продемонстрировать значительную разницу ery-apoB со средней разницей 0,25 а.е. и стандартное отклонение разницы 0,64, в анализ следует включить не менее 53 субъектов (мощность 80%, альфа 0,05 двусторонняя).

Отчеты о безопасности Исследователь информирует испытуемых и аккредитованную METC, проводящую обзор, в случае возникновения каких-либо обстоятельств, на основании которых создается впечатление, что недостатки участия могут быть значительно больше, чем это было предусмотрено в исследовательском предложении. Исследование будет приостановлено до дальнейшего рассмотрения аккредитованным METC, за исключением случаев, когда подозрение ставит под угрозу здоровье субъектов. Исследователь позаботится о том, чтобы все испытуемые были проинформированы.

Нежелательные явления (НЯ) определяются как любой нежелательный опыт, возникающий у субъекта во время исследования, независимо от того, считается ли он связанным с исследуемым лечением. Все нежелательные явления, о которых спонтанно сообщил субъект или которые наблюдал исследователь или его сотрудники, будут зарегистрированы. Серьезное нежелательное явление (СНЯ) — это любое неблагоприятное медицинское явление или эффект, который при любой дозе приводит к смерти, представляет угрозу для жизни, требует госпитализации или продления или существует при госпитализации пациентов, приводит к стойкой инвалидности или недееспособности или влияет на безопасность субъектов. в любом случае. Об этих серьезных нежелательных явлениях будет сообщено через веб-портал «Toetsing Online» в аккредитованный METC, утвердивший протокол.

Нежелательные явления, которые можно ожидать в связи с отменой статинов на период в шесть недель, представляют собой возникновение острого сердечно-сосудистого события или «синдром отмены статинов». Исследования показали, что прекращение терапии статинами связано с худшими исходами после острого коронарного синдрома, инсульта или операций на сосудах.12 Однако у пациентов со стабильной хронической ишемической болезнью сердца после временного прекращения терапии статинами увеличения числа неблагоприятных исходов не наблюдалось.12 Распространенность мышечных жалоб, связанных со статинами, составляет 1–10%.13 Тем не менее, риск мышечных жалоб, связанных со статинами, после возобновления приема статинов после отмены в течение четырех недель будет очень небольшим, поскольку испытуемые уже принимали тот же статин до участия в исследовании. Нет четких доказательств какого-либо значительного вреда или влияния статинов на качество жизни в группе из 34 272 участников исследования.14