Apolipoproteina B związana z erytrocytami po odstawieniu terapii statyną (EBABAST)

WSTĘP:

Wcześniej wykazano, że lipoproteiny zawierające aterogenną apolipoproteinę (apo) B wiążą się z erytocytami.1-3 Badania przeprowadzone w naszym laboratorium wykazały, że wiązanie apoB z erytrocytami (ery-apoB) może odzwierciedlać stan ochrony przed chorobami układu krążenia (CVD).4 Średnia wartość ery-apoB jest istotnie niższa u osób z rozpoznaną chorobą sercowo-naczyniową w porównaniu ze zdrowymi osobami z grupy kontrolnej. Jednak stosowanie statyn może być ważnym czynnikiem zakłócającym, ze względu na znane działanie obniżające poziom LDL-C i apoB w surowicy.5,6 W naszej trwającej populacji badanej 91% pacjentów z CVD było leczonych statynami w porównaniu z jedynie 19% osób bez CVD. Wstępne dane wykazały przynajmniej pewien wpływ leczenia statynami na ery-apoB. Stwierdzono niewielką, ale istotną ujemną korelację między ery-apoB a surowiczym apoB i cholesterolem LDL u osób nieprzyjmujących statyn (r Pearsona -0,172 i -0,185, p < 0,05), ale korelacje te zostały utracone u osób stosujących statyny. Statyny są znane z tego, że hamują reduktazę HMG-CoA, która jest niezbędna do syntezy cholesterolu przez wątrobę, i zwiększają ekspresję wątrobowych receptorów LDL, co prowadzi do obniżenia poziomu cholesterolu LDL i związanego z nim apoB.7,8 Teoretycznie ery- apoB może być również obniżone przez statyny, co może wyjaśniać różnice w ery-apoB między osobami z CVD lub bez CVD. To badanie interwencyjne ma na celu zbadanie wpływu terapii statynami na ery-apoB.

CEL:

Zbadanie wpływu terapii statynami na poziomy apolipoproteiny B związanej z erytrocytami w osoczu.

HIPOTEZA:

Ery-apoB wzrośnie po odstawieniu statyn ze względu na wyższy całkowity poziom apoB w osoczu.

METODY I MATERIAŁY:

Badana populacja Uczestnikami będą mężczyźni i kobiety w wieku 18 lat lub starsi, którzy są leczeni statynami z powodów medycznych, takich jak pierwotna lub wtórna hipercholesterolemia lub obecność CVD. Kryteria wykluczenia to niestabilna dławica piersiowa, ostry incydent sercowo-naczyniowy (tj. zawał mięśnia sercowego, przezskórna interwencja wieńcowa, udar lub operacja wszczepienia bajpasów) w ciągu ostatnich 6 miesięcy lub stosowanie jakiegokolwiek innego leku obniżającego stężenie lipidów, takiego jak ezetymib lub fibraty, oprócz leczenia statynami w ciągu ostatnich 6 miesięcy.

Projekt badania

Łącznie 53 osoby odwiedzą ambulatorium dwukrotnie. Podczas pierwszej wizyty wykonane zostaną następujące zabiegi:

• Kwestionariusz w celu uzyskania informacji na temat historii choroby pacjenta, profilu leczenia oraz danych kontaktowych lekarzy pierwszego kontaktu.
• Pomiar zmiennych antropometrycznych (ciśnienie krwi, długość, waga i talia).
• Nakłucie żyły (1 probówka z skrzepem, 1 probówka z heparyną, 1 probówka z EDTA i 1 probówka z glukozą, łącznie 18 ml krwi).
• Tymczasowe przerwanie leczenia statynami na 6 tygodni. Sześć tygodni po pierwszej wizycie uczestnicy ponownie zgłoszą się do przychodni w celu kolejnego nakłucia żyły (1 probówka z skrzepem, 1 probówka z heparyną, 1 probówka z EDTA i 1 probówka z glukozą, łącznie 18 ml krwi). Następnie pacjenci ponownie rozpoczną swoją pierwotną terapię statynami (ten sam rodzaj leku i dawkowanie). Jednakże, leczenie statyną zostanie rozpoczęte wcześniej, jeśli osobnik cierpi na ostry incydent sercowo-naczyniowy w okresie badania. Uczestnicy badania będą monitorowani telefonicznie pod kątem zdarzeń niepożądanych 8 tygodni po zakończeniu badania.

Interwencja Leczenie statynami zostanie przerwane na okres sześciu tygodni.

Oznaczenia analityczne Podstawowe parametry czynności nerek oraz stężenie glukozy, CRP, cholesterolu całkowitego, HDL-C i TG zostaną oznaczone za pomocą analizatora Synchrom LX (Beckman Coulter, Anaheim CA, USA). Wartości LDL-C zostaną obliczone przy użyciu wzoru Friedewalda. ApoAI i ApoB zostaną określone za pomocą nefelometrii szybkości przy użyciu IMAGE za pomocą dostępnych w handlu zestawów dostarczonych przez Beckmana (Beckman Coulter Anaheim CA, USA). Liczba krwinek zostanie określona automatycznie za pomocą analizatora LH (Beckman Coulter, CA, USA). Zróżnicowanie leukocytów zostanie określone jako pięcioczęściowe zróżnicowanie na tych samych instrumentach. ApoB na komórkach krwi zostanie wykryty za pomocą pośredniej immunofluorescencji ocenianej za pomocą cytometrii przepływowej, uprzednio zatwierdzonej i opublikowanej.9

Potrzebne materiały

• Cytometr przepływowy (Beckman Coulter, USA)
• Zwalidowany protokół pomiaru dla ery-apoB w cytometrii przepływowej
• Sprzęt do pobierania krwi żylnej i probówki krwi
• Finansowanie: Stichting Onderzoek & Ontwikkeling Sint Franciscus Gasthuis i Klinisch Chemisch Laboratorium Sint Franciscus Gasthuis pokrywają koszty

Produkt badany Produktem badania jest grupa leków obejmująca statyny. Najczęściej przepisywanymi statynami są symwastatyna, atorwastatyna, rozuwastatyna, prawastatyna i fluwastatyna w dawkach od 5 mg do 80 mg raz na dobę.10 Statyny hamują reduktazę HMG-CoA, która jest niezbędna do syntezy cholesterolu przez wątrobę, a następnie obniżają poziom cholesterolu LDL i związanego z nim apo B.7,8. Atorwastatyna i rozuwastatyna wykazują najdłuższy końcowy okres półtrwania (11-14 godzin) w porównaniu z inne statyny (1-3 godz.).11 Biodostępność statyn jest niska ze względu na rozległy efekt pierwszego przejścia przez jelita i wątrobę, a wszystkie oprócz prawastatyny wykazują aktywne metabolity.11 Wszystkie aktywne metabolity statyn zostaną wyeliminowane po odstawieniu statyn na sześć tygodni.

Statystyki Przedmioty będą służyć jako ich własna grupa kontrolna. Dlatego sparowany test T zostanie wykorzystany do sprawdzenia istotnych różnic w ery-apoB przed i po odstawieniu leczenia statynami. Różnice w ery-apoB przed i po odstawieniu statyn sprawdza się pod kątem normalności za pomocą testu Shapiro-Wilka. Wartość P poniżej 0,05 będzie uważana za istotną statystycznie.

Trwające badania obserwacyjne wykazały średnią różnicę 0,25 między osobami leczonymi statynami i niestosowanymi. Niedawno ukończony program pilotażowy wykazał różnicę SD wynoszącą 0,64 zamiast wcześniej szacowanej wartości SD wynoszącej 0,50. Aby wykazać istotną różnicę ery-apoB ze średnią różnicą 0,25 a.u. i SD różnicy 0,64, do analizy należy włączyć co najmniej 53 osoby (moc 80%, alfa 0,05 dwustronna).

Sprawozdania dotyczące bezpieczeństwa Badacz poinformuje osoby badane oraz akredytowanego METC dokonującego przeglądu, jeśli wystąpi coś, na podstawie czego okaże się, że wady uczestnictwa mogą być znacznie większe niż przewidziano w propozycji badań. Badanie zostanie zawieszone do czasu dalszej weryfikacji przez akredytowany METC, chyba że podejrzenie zagraża zdrowiu uczestników. Badacz zadba o to, aby wszystkie osoby badane były na bieżąco informowane.

Zdarzenia niepożądane (AE) definiuje się jako wszelkie niepożądane doświadczenia występujące u osobnika podczas badania, niezależnie od tego, czy uważa się je za związane z badanym leczeniem, czy nie. Wszystkie zdarzenia niepożądane zgłoszone spontanicznie przez badanego lub zaobserwowane przez badacza lub jego personel zostaną zarejestrowane. Poważne zdarzenie niepożądane (SAE) to każde nieprzewidziane zdarzenie medyczne lub skutek, który przy dowolnej dawce powoduje śmierć, zagraża życiu, wymaga hospitalizacji lub przedłużenia lub występuje w trakcie hospitalizacji pacjentów, powoduje trwałą niepełnosprawność lub niesprawność lub wpływa na bezpieczeństwo uczestników w jakikolwiek sposób. Te poważne zdarzenia niepożądane będą zgłaszane za pośrednictwem portalu internetowego „Toetsing Online” do akredytowanego METC, który zatwierdził protokół.

Zdarzeniami niepożądanymi, których można się spodziewać po odstawieniu statyn na okres sześciu tygodni, jest wystąpienie ostrego zdarzenia sercowo-naczyniowego lub „zespołu odstawienia statyn”. Badania wykazały, że przerwanie leczenia statynami wiąże się z gorszymi wynikami po ostrym zespole wieńcowym, udarze lub operacji naczyniowej.12 Nie zaobserwowano jednak wzrostu liczby działań niepożądanych u pacjentów ze stabilną przewlekłą chorobą wieńcową po czasowym odstawieniu leczenia statynami.12 Częstość występowania dolegliwości mięśniowych związanych ze stosowaniem statyn wynosi 1-10%.13 Jednak ryzyko wystąpienia dolegliwości mięśniowych związanych ze statyną po wznowieniu leczenia statyną po czterech tygodniach odstawienia będzie bardzo małe, ponieważ badani przyjmowali już tę samą statynę przed wzięciem udziału w badaniu. W grupie 34 272 badanych nie ma jednoznacznych dowodów na jakąkolwiek znaczącą szkodę lub wpływ na jakość życia statyn.14