Effekten av n-3 fleromättade fettsyror hos patienter med psoriasisartrit

Metod Studiedesign: Studien utformades som en randomiserad, dubbelblind, placebokontrollerad, multicenterstudie. Patienterna tilldelades slumpmässigt i block om fem genom en datorgenererad blocksekvens. Under 24 veckor fick patienterna dagligt intag av 6 kapslar innehållande antingen 3 g n-3 PUFA (50 % EPA och 50 % DHA) från fiskoljekapslar eller 3 g olivolja (ungefär 80 % oljesyra och 20 % linolsyra). Alla utredare, patienter och forskningspersonal var blinda för kosttillskottskoderna. Patienterna ombads att behålla sin vanliga kost under hela studien. Studien genomfördes i enlighet med Helsingforsdeklarationen och god klinisk sed (GCP).

Patienter: Patienter med PsA definierad av klassificeringskriterier för psoriasisartrit (CASPAR) (25) inkluderades från reumatologiska avdelningar, Aalborg Universitetssjukhus och Reumatologiska avdelningen, Vendsyssel Hospital, i Danmark. Inklusionskriterierna var PsA hos vuxna över 18 år med någon sjukdomsaktivitet medan uteslutningskriterier var dokumenterade hjärtrytmrubbningar, behandling med biologiska läkemedel eller behandling med orala kortikosteroider.

Överensstämmelse bedömdes genom att räkna kapslar under det senaste besöket. Patienter definierades som icke-kompatibla om >150 kapslar returnerades och de inte ingick i analysen per protokoll.

Alla deltagare gav sitt skriftliga informerade samtycke och den regionala etiska kommittén i Northern Region Denmark godkände studien.

Klinisk bedömning: Patienterna utvärderades vid baslinjen, efter 12 veckors tillägg och efter 24 veckor. Vid baslinjen erhölls sjukdomens varaktighet, sjukdomshistoria, rökvanor och kost. Anamnes med diabetes mellitus, högt blodtryck och dyslipidemi bedömdes och definierades som närvarande om patienten fick diet eller medicinsk behandling för tillståndet. Ett matenkät användes för att bedöma patienters fiskkonsumtion vid lunch och middag. En poäng för fiskintag gavs enligt följande: ät aldrig fisk = 1; ät fisk en gång i månaden =2; ät fisk två till tre gånger i månaden = 3; ät fisk en gång i veckan = 4; ät fisk två till tre gånger i veckan = 5; och ät fisk minst en gång dagligen = 6.

Vid varje besök utvärderades konventionella kardiovaskulära riskfaktorer såsom rökvanor, blodtryck, kroppsmassaindex (BMI) och midja till höftförhållande (WHR) hos alla patienter. Dessutom utfördes en klinisk utvärdering, bestående av 68 ömma leder, 66 svullna leder, sjukdomsaktivitetspoäng (DAS) och psoriasis hudområdesinblandning (PASI).

Blodprov: Blodprover togs utan fastande på morgonen för bedömning av fettsyrasammansättningen av granulocyter och rutinmässig laboratorieutvärdering. Granulocyter isolerades från helblod och lipider extraherades och fettsyror förestrades som tidigare rapporterats (26). Fettsyrasammansättningen i granulocyter bestämdes genom gaskromatografi med en Chrompack CP-9002 gaskromatograf (Varian, Middelberg, Nederländerna) och uttrycktes som viktprocent (vikt. %) av totala fettsyror.

HRV: Fem min HRV-inspelningar erhölls med SphygmoCor Technology (SphygmoCor, mjukvaruversion 8.2; AtCor Medical, Sydney, NSW, Australien).

HRV registrerades hos varje patient enligt gällande rekommendationer (27). Mätningarna erhölls på morgontimmarna efter vila i 15 minuter i ett rum med en konstant temperatur på 20°C. Patienterna instruerades att inte röka och undvika alkohol och koffeinhaltiga drycker inom 12 timmar före undersökningen. En utbildad tekniker förblindad för typen av tillskott utförde dessa analyser. Patienterna placerades i ryggläge (vila) i 10 minuter och andades spontant utan att prata. HRV analyserades i tidsdomänen och följande variabler användes:

• RR: medelvärde av alla normala RR-intervall under 5 min inspelningen
• SDNN: standardavvikelse för alla normala RR-intervall i 5 min inspelningen
• SDNNindex: medelvärde av standardavvikelsen för alla normala RR-intervall.
• pNN50: procentandel av successiva RR-intervallskillnader > 50 ms
• RMSSD: kvadratroten av medelvärdet av summan av kvadraterna av skillnader mellan intilliggande intervall

PWV: PWV- och pulsvågsanalys utfördes icke-invasivt med Sphygmocor-systemet (AtCor Medical, Sydney, NSW, Australien), som beskrivits tidigare (28) och enligt internationella rekommendationer (29). Alla mätningar gjordes i duplikat av en enda utbildad operatör och medelvärdet av de två värdena användes i analysen.

Carotis-radial och carotis-femoral PVW mättes med användning av arteriell tonometri. Alla mätningar utfördes på höger sida extremiteter. Ytavståndet mättes med ett måttband som en rät linje från den suprasternala skåran till karotisläget (proximal puls) och subtraherade avståndet från det suprasternala skåret till det radiella eller femorala läget (distal puls) (30,31). Tryckvågens transittid bestämdes som tiden mellan R-vågen för EKG:t och den proximala pulsen subtraherad från tiden mellan R-vågen för EKG:t och den distala pulsen. PWV beräknades därefter genom att dividera ytavståndet med tryckvågens transittid.

Det centrala blodtrycket uppskattades med hjälp av SphygmoCor®-enheten. Efter 10 minuters vila i ryggläge, mättes brachial BP tre gånger med 2 minuters intervall på vänster arm med den automatiska Microlife®-enheten, och den sista mätningen togs som representativ för brachial artär BP. Härefter togs prover från radiella artärtryckvågformer av höger arm. Med hjälp av den validerade generaliserade överföringsfunktionen uppskattades centralt blodtryck med hjälp av systoliskt och diastoliskt blodtryck (32,33). Aortaförstärkningsindex (AIx) standardiserades till en hjärtfrekvens på 75 slag per minut för att minimera effekten av hjärtfrekvensen. Endast mätningar med T1 (tiden till tryckvågens initiala uppslag) >80 och <150 ms och förstärkningsindex (AI, skillnaden mellan den första och andra toppen av den arteriella vågformen i procent av pulstrycket) <50 % och operatörsindex (ett godtyckligt tal mellan 1 och 100 som beskriver kvaliteten på den härledda pulsvågen) >80 accepterades enligt rekommendationer (AtCor Medical®-webbplatsen).

Statistisk analys Alla statistiska analyser utfördes med STATA version13 (StataCorp LP, TX, US) Vi antog att intervention med n-3 PUFA skulle öka HRV-parametern RR med 0,5 av en standardavvikelse (SD).

För att uppnå detta vid p<0,05 och 1-β = 0,80 behövde vi en provstorlek med 63 försökspersoner i varje grupp.

Skillnaden i de kontinuerliga resultaten mellan baseline och 24 veckor efter randomisering jämfördes mellan de två behandlingsgrupperna i en ensidig variansanalys (ANOVA). Likhet mellan varianser mellan behandlingsgrupperna bedömdes med Bartletts test. På grund av risken för förväxling efter den slumpmässiga behandlingsuppgiften utfördes en analys av kovarians (ANCOVA). Före denna analys utfördes en kontroll för kollinearitet mellan kovariaterna och modellen modifierades därefter. I denna modell utvärderades varianslikhet med Levenes test.

Det totala antalet parametrar i modellerna var begränsat till en tiondel av antalet studiedeltagare eller antalet av varje kategori när modellerna specificerades.

Alla analyser utfördes både som avsikt att behandla (ingen av patienterna är exkluderade och patienterna analyseras enligt randomiseringsschemat) och per protokoll (patienter som genomför hela den kliniska prövningen enligt protokollet) analyser. Analyserna kontrollerades för ålder, kön, rökstatus, närvaro och frånvaro av diabetes mellitus, högt blodtryck och hyperkolesterolemi, användning av icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID) och sjukdomsaktivitetspoäng.

Skillnader ansågs signifikanta med ett p-värde på <0,05 (tvåsvansad).