Wpływ wielonienasyconych kwasów tłuszczowych n-3 na pacjentów z łuszczycowym zapaleniem stawów

Metoda Projekt badania: Badanie zostało zaprojektowane jako randomizowane, podwójnie ślepe, kontrolowane placebo, wieloośrodkowe badanie. Pacjenci zostali losowo przydzieleni w blokach po pięć według wygenerowanej komputerowo sekwencji bloków. Przez 24 tygodnie pacjenci byli przydzielani do dziennego spożycia 6 kapsułek zawierających 3 g n-3 PUFA (50% EPA i 50% DHA) z kapsułek oleju rybiego lub 3 g oliwy z oliwek (około 80% kwasu oleinowego i 20% kwasu oleinowego). kwas linolowy). Wszyscy badacze, pacjenci i personel badawczy byli ślepi na kody suplementacji. Pacjentów poproszono o utrzymanie zwykłej diety przez całe badanie. Badanie przeprowadzono zgodnie z Deklaracją Helsińską i Dobrą Praktyką Kliniczną (GCP).

Pacjenci: Pacjenci z łuszczycowym zapaleniem stawów (ŁZS) zgodnie z kryteriami klasyfikacji łuszczycowego zapalenia stawów (CASPAR) (25) zostali włączeni do badania z Oddziałów Reumatologii Szpitala Uniwersyteckiego w Aalborg i Oddziału Reumatologii Szpitala Vendsyssel w Danii. Kryteriami włączenia były ŁZS u dorosłych w wieku powyżej 18 lat z jakąkolwiek aktywnością choroby, natomiast kryteriami wykluczenia były udokumentowane zaburzenia rytmu serca, leczenie lekami biologicznymi lub leczenie doustnymi kortykosteroidami.

Zgodność oceniano przez liczenie kapsułek podczas ostatniej wizyty. Pacjentów definiowano jako nieprzestrzegających zaleceń, jeśli zwrócono >150 kapsułek i nie uwzględniono ich w analizie per-protocol.

Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę, a regionalna komisja etyczna Regionu Północnego Danii zatwierdziła badanie.

Ocena kliniczna: Pacjentów oceniano na początku badania, po 12 tygodniach suplementacji i po 24 tygodniach. Na początku badania uzyskano czas trwania choroby, historię medyczną, nawyki związane z paleniem tytoniu i dietę. Oceniono historię medyczną cukrzycy, nadciśnienia tętniczego i dyslipidemii, które zdefiniowano jako obecne, jeśli pacjent otrzymał dietę lub terapię medyczną z powodu tego stanu. Kwestionariusz żywieniowy wykorzystano do oceny spożycia ryb przez pacjentów w porze lunchu i kolacji. Punktację za spożycie ryb określono w następujący sposób: nigdy nie jedz ryb = 1; jedz ryby raz w miesiącu =2; jedz ryby dwa do trzech razy w miesiącu = 3; jedz ryby raz w tygodniu = 4; jedz ryby dwa do trzech razy w tygodniu = 5; i jedz ryby przynajmniej raz dziennie = 6.

Podczas każdej wizyty u wszystkich pacjentów oceniano konwencjonalne czynniki ryzyka sercowo-naczyniowego, takie jak palenie tytoniu, ciśnienie krwi, wskaźnik masy ciała (BMI) oraz stosunek talii do bioder (WHR). Dodatkowo przeprowadzono ocenę kliniczną obejmującą liczbę 68 tkliwych stawów, 66 obrzękniętych stawów, ocenę aktywności choroby (DAS) i zajęcie obszaru skóry łuszczycowej (PASI).

Próbki krwi: Próbki krwi pobierano rano, nie na czczo, w celu oceny składu kwasów tłuszczowych granulocytów i rutynowej oceny laboratoryjnej. Granulocyty izolowano z pełnej krwi, ekstrahowano lipidy i estryfikowano kwasy tłuszczowe, jak opisano wcześniej (26). Skład kwasów tłuszczowych w granulocytach określono metodą chromatografii gazowej na chromatografie gazowym Chrompack CP-9002 (Varian, Middelberg, Holandia) i wyrażono w procentach wagowych (wag. %) sumy kwasów tłuszczowych.

HRV: Pięć minutowych zapisów HRV uzyskano za pomocą technologii SphygmoCor (SphygmoCor, wersja oprogramowania 8.2; AtCor Medical, Sydney, NSW, Australia).

HRV rejestrowano u każdego pacjenta zgodnie z aktualnymi zaleceniami (27). Pomiary wykonano w godzinach porannych po 15 min odpoczynku w pomieszczeniu o stałej temperaturze 20°C. Pacjentów poinstruowano, aby nie palili i unikali napojów zawierających alkohol i kofeinę w ciągu 12 godzin przed badaniem. Analizy te przeprowadzał wyszkolony technik, który nie znał rodzaju suplementu. Pacjentów układano w pozycji leżącej (spoczynkowej) na 10 min, oddychając spontanicznie bez mówienia. HRV analizowano w dziedzinie czasu i wykorzystano następujące zmienne:

• RR: średnia wszystkich normalnych odstępów RR podczas 5-minutowego zapisu
• SDNN: odchylenie standardowe wszystkich normalnych odstępów RR w 5-minutowym zapisie
• SDNNindex: średnia odchylenia standardowego wszystkich normalnych przedziałów RR.
• pNN50: odsetek kolejnych różnic odstępów RR > 50 ms
• RMSSD: pierwiastek kwadratowy ze średniej sumy kwadratów różnic między sąsiednimi przedziałami

PWV: Analizę PWV i fali tętna przeprowadzono nieinwazyjnie za pomocą systemu Sphygmocor (AtCor Medical, Sydney, NSW, Australia), jak opisano wcześniej (28) i zgodnie z międzynarodowymi zaleceniami (29). Wszystkie pomiary zostały wykonane w dwóch powtórzeniach przez jednego przeszkolonego operatora, a w analizie wykorzystano średnią z dwóch wartości.

PVW tętnicy szyjnej promieniowej i szyjno-udowej mierzono za pomocą tonometrii tętniczej. Wszystkie pomiary wykonano na kończynach prawych. Odległość powierzchniową mierzono taśmą mierniczą jako linię prostą od wcięcia nadmostkowego do miejsca na tętnicy szyjnej (tętno proksymalne) i odejmowano odległość od wcięcia nadmostkowego do miejsca promieniowego lub udowego (tętno dystalne) (30,31). Czas przejścia fali ciśnienia określono jako czas między załamkiem R EKG a tętnem proksymalnym odjętym od czasu między załamkiem R EKG a tętnem dystalnym. Następnie obliczono PWV, dzieląc odległość od powierzchni przez czas przejścia fali ciśnienia.

Centralne BP oszacowano za pomocą urządzenia SphygmoCor®. Po 10 min odpoczynku w pozycji leżącej trzykrotnie mierzono ciśnienie tętnicze ramiennej w odstępach 2-minutowych na lewym ramieniu za pomocą automatycznego urządzenia Microlife®, a ostatni pomiar uznano za reprezentatywny dla ciśnienia tętniczego tętnicy ramiennej. Następnie pobrano próbki krzywych ciśnienia w tętnicy promieniowej prawego ramienia. Wykorzystując zwalidowaną uogólnioną funkcję transferu, centralne BP oszacowano na podstawie skurczowego i rozkurczowego BP na ramieniu (32,33). Wskaźnik augmentacji aorty (AIx) standaryzowano do częstości akcji serca 75 uderzeń na minutę, aby zminimalizować wpływ częstości akcji serca. Tylko pomiary z T1 (czas do początkowego skoku fali ciśnienia w górę) >80 i <150 ms oraz wskaźnikiem augmentacji (AI, różnica między pierwszym a drugim szczytem fali tętniczej jako procent ciśnienia tętna) <50% oraz indeks operatora (dowolna liczba z przedziału od 1 do 100 opisująca jakość uzyskanej fali tętna) >80 zostały przyjęte zgodnie z zaleceniami (strona internetowa AtCor Medical®).

Analiza statystyczna Wszystkie analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu STATA wersja 13 (StataCorp LP, TX, US). Postawiliśmy hipotezę, że interwencja z n-3 PUFA zwiększy parametr HRV RR o 0,5 odchylenia standardowego (SD).

Aby to osiągnąć przy p <0,05 i 1-β = 0,80, potrzebowaliśmy wielkości próby z 63 osobami w każdej grupie.

Różnicę w ciągłych wynikach między wartością wyjściową a 24 tygodniami po randomizacji porównano między dwiema grupami terapeutycznymi w jednostronnej analizie wariancji (ANOVA). Równość wariancji między leczonymi grupami oceniano za pomocą testu Bartletta. Ze względu na możliwość wystąpienia zakłóceń po losowym przydzieleniu leczenia przeprowadzono analizę kowariancji (ANCOVA). Przed tą analizą przeprowadzono sprawdzenie współliniowości między współzmiennymi i odpowiednio zmodyfikowano model. W tym modelu równość wariancji oceniono za pomocą testu Levene'a.

Całkowita liczba parametrów w modelach została ograniczona do jednej dziesiątej liczby uczestników badania lub liczby każdej kategorii podczas określania modeli.

Wszystkie analizy przeprowadzono zarówno w ramach analizy zamiaru leczenia (żaden z pacjentów nie jest wykluczony, a pacjenci są analizowani zgodnie ze schematem randomizacji), jak i per-protocol (pacjenci, którzy ukończyli całe badanie kliniczne zgodnie z protokołem). Analizy kontrolowano pod kątem wieku, płci, palenia tytoniu, obecności i braku cukrzycy, nadciśnienia tętniczego i hipercholesterolemii, stosowania niesteroidowych leków przeciwzapalnych (NLPZ) oraz oceny aktywności choroby.

Różnice uznano za istotne z wartością p <0,05 (dwustronna).