L'effetto degli acidi grassi polinsaturi n-3 nei pazienti con artrite psoriasica

Metodo Disegno dello studio: lo studio è stato concepito come uno studio multicentrico randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo. I pazienti sono stati assegnati in modo casuale in blocchi di cinque da una sequenza di blocchi generata dal computer. Per 24 settimane i pazienti sono stati assegnati all'assunzione giornaliera di 6 capsule contenenti 3 g di n-3 PUFA (50% EPA e 50% DHA) da capsule di olio di pesce o 3 g di olio d'oliva (circa l'80% di acido oleico e il 20% acido linoleico). Tutti i ricercatori, i pazienti e il personale di ricerca erano all'oscuro dei codici di integrazione. Ai pazienti è stato chiesto di mantenere la loro dieta abituale durante l'intero studio. Lo studio è stato condotto in conformità con la Dichiarazione di Helsinki e la buona pratica clinica (GCP).

Soggetti: I pazienti con PsA definiti dai criteri di classificazione per l'artrite psoriasica (CASPAR) (25) sono stati arruolati dai Dipartimenti di Reumatologia, Ospedale Universitario di Aalborg e Dipartimento di Reumatologia, Ospedale Vendsyssel, in Danimarca. I criteri di inclusione erano PsA in adulti di età superiore ai 18 anni con qualsiasi attività della malattia, mentre i criteri di esclusione erano aritmie cardiache documentate, trattamento con farmaci biologici o trattamento con corticosteroidi orali.

La compliance è stata valutata contando le capsule durante l'ultima visita. I pazienti sono stati definiti non conformi se sono state restituite >150 capsule e quelle non sono state incluse nell'analisi per protocollo.

Tutti i partecipanti hanno dato il loro consenso informato scritto e il comitato etico regionale della regione settentrionale della Danimarca ha approvato lo studio.

Valutazione clinica: i pazienti sono stati valutati al basale, dopo 12 settimane di integrazione e dopo 24 settimane. Al basale, sono stati ottenuti la durata della malattia, l'anamnesi, l'abitudine al fumo e la dieta. L'anamnesi di diabete mellito, ipertensione e dislipidemia è stata valutata ed è stata definita come presente se il paziente ha ricevuto terapia dietetica o medica per la condizione. È stato utilizzato un questionario alimentare per valutare il consumo di pesce dei pazienti a pranzo ea cena. È stato assegnato un punteggio per l'assunzione di pesce secondo quanto segue: mai mangiare pesce = 1; mangiare pesce una volta al mese =2; mangiare pesce due o tre volte al mese = 3; mangiare pesce una volta alla settimana = 4; mangiare pesce due o tre volte alla settimana = 5; e mangiare pesce almeno una volta al giorno = 6.

Ad ogni visita, in tutti i pazienti sono stati valutati i fattori di rischio cardiovascolare convenzionali come l'abitudine al fumo, la pressione sanguigna, l'indice di massa corporea (BMI) e il rapporto vita-fianchi (WHR). Inoltre, è stata eseguita una valutazione clinica, composta da 68 conta delle articolazioni dolenti, 66 conta delle articolazioni gonfie, punteggio di attività della malattia (DAS) e coinvolgimento dell'area cutanea psoriasica (PASI).

Campioni di sangue: i campioni di sangue sono stati prelevati non a digiuno al mattino per la valutazione della composizione in acidi grassi dei granulociti e la valutazione di laboratorio di routine. I granulociti sono stati isolati dal sangue intero, i lipidi sono stati estratti e gli acidi grassi esterificati come riportato in precedenza (26). La composizione degli acidi grassi nei granulociti è stata determinata mediante gascromatografia con un gascromatografo Chrompack CP-9002 (Varian, Middelberg, Paesi Bassi) ed espressa come percentuale in peso (wt. %) di acidi grassi totali.

HRV: sono state ottenute registrazioni HRV di cinque minuti con la tecnologia SphygmoCor (SphygmoCor, versione software 8.2; AtCor Medical, Sydney, NSW, Australia).

L'HRV è stato registrato in ogni paziente secondo le attuali raccomandazioni (27). Le misure sono state ottenute nelle ore mattutine dopo aver riposato per 15 min in una stanza con una temperatura costante di 20°C. I pazienti sono stati istruiti a non fumare ed evitare alcol e bevande contenenti caffeina entro 12 ore prima dell'indagine. Un tecnico qualificato, cieco al tipo di integratore, ha eseguito queste analisi. I pazienti sono stati posti in posizione supina (a riposo) per 10 minuti, respirando spontaneamente senza parlare. L'HRV è stato analizzato nel dominio del tempo e sono state utilizzate le seguenti variabili:

• RR: media di tutti i normali intervalli RR durante la registrazione di 5 min
• SDNN: deviazione standard di tutti i normali intervalli RR nella registrazione di 5 min
• SDNNindex: media della deviazione standard di tutti gli intervalli RR normali.
• pNN50: percentuale di successive differenze di intervallo RR > 50 ms
• RMSSD: radice quadrata della media della somma dei quadrati delle differenze tra intervalli adiacenti

PWV: PWV e analisi dell'onda del polso sono state eseguite in modo non invasivo con il sistema Sphygmocor (AtCor Medical, Sydney, NSW, Australia), come descritto in precedenza (28) e secondo le raccomandazioni internazionali (29). Tutte le misurazioni sono state effettuate in duplicato da un singolo operatore addestrato e nell'analisi è stata utilizzata la media dei due valori.

Il PVW carotideo-radiale e carotideo-femorale è stato misurato mediante tonometria arteriosa. Tutte le misurazioni sono state eseguite sulle estremità del lato destro. La distanza superficiale è stata misurata con un metro a nastro come una linea retta dalla tacca soprasternale alla posizione carotidea (polso prossimale) e sottratta la distanza dalla tacca soprasternale alla posizione radiale o femorale (polso distale) (30,31). Il tempo di transito dell'onda di pressione è stato determinato come il tempo tra l'onda R dell'ECG e il polso prossimale sottratto dal tempo tra l'onda R dell'ECG e il polso distale. Il PWV è stato successivamente calcolato dividendo la distanza dalla superficie per il tempo di transito dell'onda di pressione.

La PA centrale è stata stimata utilizzando il dispositivo SphygmoCor®. Dopo 10 minuti di riposo in posizione supina, la PA brachiale è stata misurata tre volte a intervalli di 2 minuti sul braccio sinistro con il dispositivo automatico Microlife® e l'ultima misurazione è stata presa come rappresentativa della PA dell'arteria brachiale. Successivamente, sono state campionate le forme d'onda della pressione dell'arteria radiale del braccio destro. Utilizzando la funzione di trasferimento generalizzata convalidata, la PA centrale è stata stimata utilizzando la PA sistolica e diastolica brachiale (32,33). L'indice di aumento aortico (AIx) è stato standardizzato a una frequenza cardiaca di 75 battiti al minuto per ridurre al minimo l'effetto della frequenza cardiaca. Solo misurazioni con T1 (il tempo alla salita iniziale dell'onda di pressione) >80 e <150 ms e indice di aumento (AI, la differenza tra il primo e il secondo picco della forma d'onda arteriosa come percentuale della pressione del polso) <50% e l'indice dell'operatore (un numero arbitrario compreso tra 1 e 100 che descrive la qualità dell'onda del polso derivata) >80 sono stati accettati secondo le raccomandazioni (sito AtCor Medical®).

Analisi statistica Tutte le analisi statistiche sono state eseguite utilizzando la versione STATA13 (StataCorp LP, TX, US). Abbiamo ipotizzato che l'intervento con n-3 PUFA aumenterebbe il parametro HRV RR di 0,5 di una deviazione standard (DS).

Per raggiungere questo risultato a p <0,05 e 1-β = 0,80 avevamo bisogno di una dimensione del campione con 63 soggetti in ciascun gruppo.

La differenza nei risultati continui tra il basale e 24 settimane dopo la randomizzazione è stata confrontata tra i due gruppi di trattamento in un'analisi della varianza unilaterale (ANOVA). L'uguaglianza delle varianze tra i gruppi di trattamento è stata valutata utilizzando il test di Bartlett. A causa del potenziale di confusione dopo l'assegnazione casuale del trattamento, è stata eseguita un'analisi della covarianza (ANCOVA). Prima di questa analisi è stato eseguito un controllo della collinearità tra le covariate e il modello è stato modificato di conseguenza. In questo modello l'uguaglianza delle varianze è stata valutata utilizzando il test di Levene.

Il numero totale di parametri nei modelli è stato limitato a un decimo del numero di partecipanti allo studio o al numero di ciascuna categoria quando si specificano i modelli.

Tutte le analisi sono state eseguite sia per intent to treat (nessuno dei pazienti è escluso e i pazienti sono analizzati secondo lo schema di randomizzazione) sia per protocollo (pazienti che completano l'intero studio clinico secondo il protocollo). Le analisi sono state controllate per età, sesso, abitudine al fumo, presenza e assenza di diabete mellito, ipertensione e ipercolesterolemia, uso di farmaci antinfiammatori non steroidei (FANS) e punteggi di attività della malattia.

Le differenze sono state considerate significative con un valore p <0,05 (a due code).