CYP 2C19 polymorfism och dalkoncentration av vorikonazol hos kinesiska vuxna patienter

Varje isolat av aspergillos kommer att återvinnas från kliniska prover (sputum, bronkoalveolär sköljvätska, lungbiopsivävnad) och identifiering av artnivå kommer också att utföras på Qilu sjukhus med hjälp av konventionella metoder (både makroskopiska och mikroskopiska egenskaper). Aspergillos-stammarna kommer att lagras i 10 % glycerolbuljong vid -80 °C. In vitro antimykotiska känslighetstest av aspergillos-stammar mot vorikonazol kommer att utföras i Center for Medical Mycology and Mycoses, First Hospital, Peking University, och prestandan kommer att vara enligt Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) standard M38-A2 mikrodilution metoder.

Serum galaktomannan (GM) test kommer att utföras två gånger per vecka under de första två veckorna. En dubbelsandwich ELISA GM-analys användes. En cut-off för optiskt densitetsindex (ODI) >0,5 togs som positivt.

Serumnivåer av vorikonazol kommer att mätas på dag 4, dag 7, dag 10 och dag 14 (alla dalvärden). I korthet utfördes kvantitativ analys av vorikonazol med hjälp av högpresterande vätskekromatografi kopplat med tandemmasspektrometri.

Genotypning av CYP2C19 kommer att utföras med hjälp av 3 ml perifert blod som provtas i EDTA-rör (etylendiamintetraättiksyra) vid dag 4. Genomiskt DNA extraherades från blodleukocyter med användning av ett DNA-extraktionskit. Genotypning bekräftades genom polymeraskedjereaktion (PCR)-restriktionsfragmentlängdpolymorfism (RFLP) analys. Individer kan delas in i tre grupper enligt genotypen CYP2C19. De som ärver två mutanta CYP2C19-alleler (*2 och/eller *3) har en minskad förmåga att metabolisera CYP2C19-substrat och definieras som dåliga metaboliserare (PM). Individer som är homozygota (*1/*1) för vildtyps-CYP2C19*1 eller 1 vildtypsallel och 1 CY¬P2C19*17 har effektiva enzymer för att metabolisera CYP2C19-substrat och definieras som extensiva metaboliserare (EM). Försökspersoner som är heterozygota (*1/*2, *1/*3) för vildtyp CYP2C19*1 definieras som intermediära metaboliserare (IMs)