Polimorfismo CYP 2C19 y concentración mínima de voriconazol en pacientes adultos chinos

Cada aislamiento de aspergilosis se recuperará de muestras clínicas (esputo, líquido de lavado broncoalveolar, tejido de biopsia pulmonar) y la identificación del nivel de especie también se realizará en el Hospital Qilu utilizando métodos convencionales (características tanto macroscópicas como microscópicas). Las cepas de aspergilosis se almacenarán en caldo de glicerol al 10 % a -80 °C. La prueba de susceptibilidad antifúngica in vitro de las cepas de aspergilosis al voriconazol se realizará en el Centro de Micología Médica y Micosis, Primer Hospital, Universidad de Pekín, y el rendimiento será de acuerdo con el estándar de microdilución M38-A2 del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). métodos.

La prueba de galactomanano (GM) sérico se realizará dos veces por semana durante las dos primeras semanas. Se utilizó un ensayo ELISA GM de doble sándwich. Se tomó como positivo un punto de corte del índice de densidad óptica (ODI) > 0,5.

Los niveles séricos de voriconazol se medirán los días 4, 7, 10 y 14 (todos los niveles mínimos). En resumen, el análisis cuantitativo de voriconazol se realizó mediante cromatografía líquida de alta resolución junto con espectrometría de masas en tándem.

El genotipado de CYP2C19 se realizará utilizando 3 ml de sangre periférica muestreada en tubos con EDTA (ácido etilendiaminotetraacético) el día 4. El ADN genómico se extrajo de los leucocitos sanguíneos con el uso de un kit de extracción de ADN. El genotipado se confirmó mediante el análisis del polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los individuos se pueden dividir en tres grupos según el genotipo CYP2C19. Aquellos que heredan dos alelos mutantes de CYP2C19 (*2 y/o *3) tienen una capacidad reducida para metabolizar sustratos de CYP2C19 y se definen como metabolizadores lentos (PM). Los individuos que son homocigotos (*1/*1) para CYP2C19*1 de tipo salvaje o 1 alelo de tipo salvaje y 1 CY¬P2C19*17 tienen enzimas eficientes para metabolizar los sustratos de CYP2C19 y se definen como metabolizadores rápidos (EM). Los sujetos que son heterocigotos (*1/*2, *1/*3) para CYP2C19*1 de tipo salvaje se definen como metabolizadores intermedios (IM)