CYP 2C19 -polymorfismi ja vorikonatsolin alhainen pitoisuus kiinalaisilla aikuispotilailla

Jokainen aspergilloosin isolaatti otetaan talteen kliinisistä näytteistä (yskös, bronkoalveolaarinen huuhteluneste, keuhkobiopsiakudos) ja lajitason tunnistus tehdään myös Qilun sairaalassa perinteisin menetelmin (sekä makroskooppiset että mikroskooppiset ominaisuudet). Aspergilloosikantoja säilytetään 10 % glyseroliliemessä -80 °C:ssa. Aspergilloosikantojen in vitro antifungaalinen herkkyystesti vorikonatsolille suoritetaan Medical Mycology and Mycoses -keskuksessa, First Hospital, Peking University, ja testi suoritetaan Clinical and Laboratory Standards Instituten (CLSI) standardin M38-A2 mikrolaimennuksella. menetelmiä.

Seerumin galaktomannaanitesti (GM) suoritetaan kahdesti viikossa kahden ensimmäisen viikon ajan. Käytettiin kaksikerroksista ELISA GM -määritystä. Optisen tiheysindeksin (ODI) raja > 0,5 pidettiin positiivisena.

Vorikonatsolin seerumipitoisuudet mitataan päivänä 4, päivänä 7, päivänä 10 ja päivänä 14 (kaikki alimmaiset tasot). Lyhyesti sanottuna vorikonatsolin kvantitatiivinen analyysi suoritettiin käyttämällä korkean suorituskyvyn nestekromatografiaa yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan.

CYP2C19:n genotyypitys suoritetaan käyttämällä 3 ml:aa perifeeristä verta, joka on otettu EDTA-putkiin (etyleenidiamiinitetraetikkahappo) päivänä 4. Genominen DNA uutettiin veren leukosyyteistä käyttämällä DNA-uuttopakkausta. Genotyypitys vahvistettiin polymeraasiketjureaktio (PCR) -restriktiofragmentin pituuspolymorfismin (RFLP) analyysillä. Yksilöt voidaan jakaa kolmeen ryhmään CYP2C19-genotyypin mukaan. Niillä, jotka perivät kaksi mutanttia CYP2C19-alleelia (*2 ja/tai *3), on heikentynyt kyky metaboloida CYP2C19-substraatteja, ja heidät määritellään hitaiksi metaboloijiksi (PM:t). Yksilöillä, jotka ovat homotsygoottisia (*1/*1) villityypin CYP2C19*1:lle tai 1 villityypin alleelille ja 1 CY¬P2C19*17:lle, on tehokkaat entsyymit CYP2C19-substraattien metaboloimiseksi, ja heidät määritellään nopeiksi metaboloijiksi (EM). Potilaat, jotka ovat heterotsygoottisia (*1/*2, *1/*3) villityypin CYP2C19*1:n suhteen, määritellään välivaiheen metaboloijiksi (IM:t)