Polymorphisme du CYP 2C19 et concentration minimale de voriconazole chez des patients adultes chinois

Chaque isolat d'aspergillose sera récupéré à partir d'échantillons cliniques (crachats, liquide de lavage bronchoalvéolaire, tissu de biopsie pulmonaire) et l'identification au niveau de l'espèce sera également effectuée à l'hôpital Qilu en utilisant des méthodes conventionnelles (caractéristiques macroscopiques et microscopiques). Les souches d'aspergillose seront conservées dans un bouillon de glycérol à 10 % à -80 °C. Le test de sensibilité antifongique in vitro des souches d'aspergillose au voriconazole sera effectué au Centre de mycologie médicale et des mycoses, Premier hôpital, Université de Pékin, et les performances seront conformes à la norme de microdilution M38-A2 du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) méthodes.

Le test sérique de galactomannane (GM) sera effectué deux fois par semaine pendant les deux premières semaines. Un test ELISA GM en double sandwich a été utilisé. Un seuil d'indice de densité optique (ODI)> 0, 5 a été considéré comme positif.

Les taux sériques de voriconazole seront mesurés le jour 4, le jour 7, le jour 10 et le jour 14 (tous les niveaux résiduels). En bref, l'analyse quantitative du voriconazole a été réalisée en utilisant la chromatographie liquide à haute performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem.

Le génotypage du CYP2C19 sera effectué à l'aide de 3 ml de sang périphérique prélevés dans des tubes EDTA (acide éthylènediaminetétraacétique) au jour 4. L'ADN génomique a été extrait des leucocytes sanguins à l'aide d'un kit d'extraction d'ADN. Le génotypage a été confirmé par l'analyse du polymorphisme de longueur des fragments de restriction (RFLP) par réaction en chaîne de la polymérase (PCR). Les individus peuvent être divisés en trois groupes selon le génotype CYP2C19. Ceux qui héritent de deux allèles CYP2C19 mutants (*2 et/ou *3) ont une capacité réduite à métaboliser les substrats du CYP2C19 et sont définis comme des métaboliseurs lents (PM). Les individus homozygotes (*1/*1) pour le CYP2C19*1 de type sauvage ou 1 allèle de type sauvage et 1 CY¬P2C19*17 possèdent des enzymes efficaces pour métaboliser les substrats du CYP2C19 et sont définis comme des métaboliseurs rapides (EM). Les sujets hétérozygotes (*1/*2, *1/*3) pour le CYP2C19*1 de type sauvage sont définis comme métaboliseurs intermédiaires (MI)