Allogen mesenkymal stamcell för bendefekt eller icke-unionsfraktur (AMSC)

Forskningsmetoder Studiedesign Denna studie är endast en experimentell enarmsstudie efter test. Uppskattad studietid Forskning beräknad tid skulle vara 24 månader, från maj 2014 till maj 2016. Provtagningsförfarande Denna forskning är en pilotstudie. Prover erhålls i följd från alla källpopulationer som uppfyller kriterierna. Antalet prover från varje mesenkymal stamcellskälla (fett, benmärg och navelsträng) är tre. Varje prov härrörde från tre olika donatorer som uppfyllde inklusionskriterierna. För implantationen är försökspersonerna fem från varje intervention. Men när det gäller den begränsade finansieringskällan och tiden kommer vi att rekrytera ett ämne för varje typ av MSC.

Ämneskriterier Inklusionskriterier för MSC-givare

Benmärgsdonator:

Man/kvinna i åldern 19-30 år utan några samsjukligheter (Diabetes mellitus, kardiovaskulär och annan autoimmun sjukdom), HIV-test Hepatit B-test och Hepatit C-test är negativt, ingen svamp- och bakteriekontamination i benmärgen. Försökspersoner är villiga att aspireras i höftbenskammen för att få benmärgen.

Fettgivare:

Fettvävnad erhålls från fettsugning eller öppen reduktion inre fixeringsprocedur. Prover av fett är fria från HIV, Hepatit B, Hepatit C och fria från svamp- och bakteriekontamination.

Navelsträngsdonator:

Navelsträngen är form av elektiv seccio caecaria från en fullgången mamma utan några komplikationer och fri från HIV, hepatit B, hepatit C och ingen svamp- och bakteriekontamination.

Recipientens inklusionskriterier Patienter med kritisk bendefekt i åldern 6-55 år som är villiga att genomgå kirurgisk ingrepp.

Recipientexklusionskriterier Patienter med patologisk fraktur orsakad av malignitet, nedsatt immunförsvar (HIV AIDS, Diabetes mellitus, aktiv Hepatit), i immunsuppressiv behandling (kemoterapi eller steroider).

Avhoppskriterier Patienter utesluts från denna studie om han/hon sa att de skulle göra det under den tid som denna forskning pågår eller om hon/han genomgår något annat hot som inte är relaterat till denna studie. Patient som inte uppvisar någon klinisk förbättring under tre månader i följd kategoriseras som misslyckad hot. Alla hoppar av och misslyckades med att hota patienten kunde få andra hot.

Informerat samtycke Alla försökspersoner måste fylla i och underteckna de informerade samtyckesbreven.

Forskningsprotokoll Mesenkymala stamcellstagningsmetod Benmärgstagning Patienten ligger ner i ryggläge, sövd lokalt. Aseptisk och antiseptisk görs på höftbenskammen. Aspirationsnålen sätts in 450 till horisonten i höftbenskammen. Huben frigörs och en 10 cc spruta som innehåller heparin kopplas till nålen. Vi aspirerade cirka 50 cc benmärg från varje försöksperson.

Navelsträngstagning Direkt efter förlossningen klipps navelsträngen av och förvaras i en steril skål innehållande 0,9 % NaCl i 40 tills provet fortsätter.

Fettintag Fettvävnad härrör från fettsugning eller inre fixeringsförfarande med öppen reduktion. Det förvaras i en steril skål innehållande NaCL 0,9 % i 40 C. Bearbetning av provet görs inom 8 timmar efter provtagningen.

Kryokonservering och återaktivering. Alla prover tas till odlingslaboratorium i integrerad tjänst av medicinsk stamcellsteknik Cipto mangunkusumo hospita.this laboratoriet är GMP-certifierat (good manufacturing Product). Proverna åt odlade i lämpligt medium tills det nådde sammanflödet och skördades. Cellerna genomgår sedan karaktäriseringstest med flödescytometer och livsduglighet och antal räknas. Några av cellerna kryokonserveras sedan medan några implanteras direkt i patienten. Cellerna kryokonserveras i tre månader och återaktiveras sedan. Viabilitet och antal mäts sedan. Cellerna implanteras sedan till icke-unionspatient.

Provsterilitet Sterilitetstester görs tre gånger för att säkerställa att det inte finns någon svamp- och bakteriekontamination.

HA-CaSO4 och MSC För varje centimeter av defekt behövs 10 miljoner celler och 50 pellets HA-CaSO4. Den utspädda MSC blandas sedan med HA-CaSO4 och inkuberas 5 minuter före implantering.

Intervention Kirurgisk intervention behövs för att montera fixeringsanordningen i det långa benet. Under operationen sätts pellets HA-CaSO4 in i defekten. Efter att mjukvävnad har stängts injiceras resten av serumet i det defekta området.

Observation och uppföljning Klinisk och radiologisk uppföljning görs var 4:e vecka. Observation görs i 12 månader eller tills benet förenas. Varje försöksperson kommer att följas upp i trean, sjätte, tolfte och tjugofjärde eller tills fixeringsanordningen tas av.

Mottagarkriterier för icke fackföreningsbrott