Allogene mesenchymale Stammzelle für Knochendefekt oder Non-Union-Fraktur (AMSC)

Forschungsmethoden Studiendesign Diese Studie ist nur eine experimentelle einarmige Studie nach dem Test. Geschätzte Studienzeit Die geschätzte Forschungszeit beträgt 24 Monate, von Mai 2014 bis Mai 2016. Probengewinnungsverfahren Diese Studie ist eine Pilotstudie. Proben werden nacheinander von allen Quellpopulationen erhalten, die die Kriterien erfüllen. Die Anzahl der Proben aus jeder mesenchymalen Stammzellenquelle (Fett, Knochenmark und Nabelschnur) beträgt drei. Jede Probe stammte von drei verschiedenen Spendern, die die Einschlusskriterien erfüllten. Für die Implantation sind die Probanden fünf von jeder Intervention. In Anbetracht der begrenzten Finanzierungsquelle und Zeit werden wir jedoch für jede Art von MSC einen Probanden rekrutieren.

Subjektkriterien Einschlusskriterien für MSC-Spender

Knochenmarkspender:

Mann/Frau im Alter von 19-30 Jahren ohne Komorbiditäten (Diabetes mellitus, Herz-Kreislauf- und andere Autoimmunerkrankungen), HIV-Test, Hepatitis-B-Test und Hepatitis-C-Test sind negativ, keine Pilz- und Bakterienkontamination im Knochenmark. Die Probanden sind bereit, im Beckenkamm aspiriert zu werden, um das Knochenmark zu erhalten.

Fettspender:

Fettgewebe wird aus einer Fettabsaugung oder einer internen Fixierung mit offener Reduktion gewonnen. Fettproben sind frei von HIV, Hepatitis B, Hepatitis C und frei von Pilz- und Bakterienkontamination.

Nabelschnurspender:

Nabelschnur sind komplikationslos und frei von HIV, Hepatitis B, Hepatitis C und frei von Pilz- und Bakterienbefall.

Einschlusskriterien für Empfänger Patienten mit kritischem Knochendefekt im Alter von 6 bis 55 Jahren, die bereit sind, sich einem chirurgischen Eingriff zu unterziehen.

Empfänger-Ausschlusskriterien Patienten mit pathologischer Fraktur, verursacht durch Malignität, immungeschwächte (HIV, AIDS, Diabetes mellitus, aktive Hepatitis), in einer immunsuppressiven Therapie (Chemotherapie oder Steroide).

Abbruchkriterien Patienten werden von dieser Studie ausgeschlossen, wenn sie dies in der Zeit, in der diese Studie durchgeführt wird, erklärt haben oder sie / er einer anderen Bedrohung ausgesetzt sind, die nicht mit dieser Studie in Zusammenhang steht. Patienten, die in drei aufeinanderfolgenden Monaten keine klinische Besserung zeigen, werden als nicht gefährdet eingestuft. Alle Abbrecher und Patienten, die nicht bedroht wurden, könnten andere Bedrohungen bekommen.

Einverständniserklärung Alle Probanden müssen die Einverständniserklärungen ausfüllen und unterschreiben.

Forschungsprotokoll Methode zur Entnahme mesenchymaler Stammzellen Knochenmarkentnahme Der Patient liegt in Rückenlage, lokal anästhesiert. Aseptisch und antiseptisch werden an der Stelle des Beckenkamms durchgeführt. Die Aspirationsnadel wird 450° zum Horizont in den Beckenkamm eingeführt. Der Ansatz wird freigegeben und eine 10-ml-Spritze, die Heparin enthält, wird mit der Nadel verbunden. Wir entnahmen etwa 50 cc Knochenmark von jedem Probanden.

Nabelschnurentnahme Unmittelbar nach der Geburt des Babys wird die Nabelschnur durchtrennt und in einer sterilen Schale mit 0,9 % NaCl in 40 aufbewahrt, bis die Probe entnommen wird.

Fettabnahme Fettgewebe stammt aus einer Fettabsaugung oder einer internen Fixation mit offener Reduktion. Sie wird in einer sterilen Schale mit 0,9 % NaCl bei 40 °C aufbewahrt. Die Verarbeitung der Probe erfolgt innerhalb von 8 Stunden nach der Probenentnahme.

Kryokonservierung und Reaktivierung. Alle Proben werden in das Kulturlabor im integrierten Service der medizinischen Stammzellentechnologie Cipto mangunkusumo hospita.this gebracht Labor ist GMP (Good Manufacturing Product) zertifiziert. Die Proben wurden in geeignetem Medium bis zur Konfluenz kultiviert und geerntet. Die Zellen werden dann einem Charakterisierungstest mit einem Durchflusszytometer unterzogen und Lebensfähigkeit und Anzahl werden gezählt. Einige der Zellen werden dann kryokonserviert, während andere direkt in den Patienten implantiert werden. Die Zellen werden für drei Monate kryokonserviert und dann reaktiviert. Lebensfähigkeit und Anzahl werden dann gemessen. Die Zellen werden dann einem nicht geheilten Patienten implantiert.

Probensterilität Sterilitätstests werden dreimal durchgeführt, um sicherzustellen, dass keine Pilz- und Bakterienkontamination vorliegt.

HA-CaSO4 und MSC Für jeden Zentimeter Defekt werden 10 Millionen Zellen und 50 Pellets HA-CaSO4 benötigt. Das verdünnte MSC wird dann mit dem HA-CaSO4 gemischt und 5 Minuten vor der Implantation inkubiert.

Eingriff Ein chirurgischer Eingriff ist erforderlich, um die Fixierungsvorrichtung im Röhrenknochen zu montieren. Während der Operation werden Pellets HA-CaSO4 in den Defekt eingeführt. Nachdem das Weichgewebe geschlossen ist, wird der Rest des Serums in den Defektbereich injiziert.

Beobachtung und Nachsorge Klinische und radiologische Nachuntersuchungen werden alle 4 Wochen durchgeführt. Die Beobachtung erfolgt für 12 Monate oder bis sich der Knochen vereinigt. Jeder Proband wird im dritten, sechsten, zwölften und vierundzwanzigsten oder bis zum Abnehmen der Fixiervorrichtung nachuntersucht.

Empfängerkriterien für Pseudarthrosenbruch