Allogeeninen mesenkymaalinen kantasolu luuvaurion tai ei-liittyvän murtuman varalta (AMSC)

Tutkimusmenetelmät Tutkimuksen suunnittelu Tämä tutkimus on vain kokeellinen yhden käden tutkimuksen jälkeinen testi. Arvioitu opiskeluaika Tutkimuksen arvioitu aika olisi 24 kuukautta toukokuusta 2014 toukokuuhun 2016. Näytteenottomenettely Tämä tutkimus on pilottitutkimus. Näytteet otetaan peräkkäin kaikista kriteerit täyttävistä lähdepopulaatioista. Jokaisesta mesenkymaalisesta kantasolusta (rasva, luuydin ja napanuora) otettujen näytteiden määrä on kolme. Jokainen näyte oli peräisin kolmelta eri luovuttajalta, jotka täyttivät sisällyttämiskriteerit. Implantaatiossa koehenkilöitä on viisi kustakin interventiosta. Rajoitetun rahoituslähteen ja ajan vuoksi rekrytoimme kuitenkin yhden aiheen jokaista MSC-tyyppiä kohti.

Subject Criteria Kriteerit MSC-luovuttajalle

Luuytimen luovuttaja:

19-30-vuotiaat mies/nainen, joilla ei ole liitännäissairauksia (diabetes mellitus, sydän- ja verisuonitauti ja mikä tahansa muu autoimmuunisairaus), HIV-testi Hepatiitti B -testi ja hepatiitti C -testi ovat negatiivisia, luuytimessä ei ole sieni- tai bakteerikontaminaatiota. Koehenkilöt ovat valmiita imeytymään suoliluun harjasta saadakseen luuytimen.

Rasvan luovuttaja:

Rasvakudosta saadaan rasvaimulla tai avoimella sisäisellä fiksaatiolla. Rasvanäytteet ovat vapaita HIV:stä, hepatiitti B:stä, hepatiitti C:stä eivätkä sieni- ja bakteerikontaminaatiosta.

Napanuoran luovuttaja:

Napanuora on elektiivinen seccio caecaria täysiaikaiselta äidiltä ilman komplikaatioita ja vapaa HIV:stä, hepatiitti B:stä, hepatiitti C:stä eikä sieni- ja bakteerikontaminaatiosta.

Vastaanottajien mukaanottokriteerit Kriittiset luuvauriopotilaat, jotka ovat iältään 6–55-vuotiaita ja jotka ovat valmiita leikkaukseen.

Vastaanottajan poissulkemiskriteerit Potilaat, joilla on pahanlaatuisen kasvaimen aiheuttama patologinen murtuma, immuunipuutos (HIV AIDS, diabetes mellitus, aktiivinen hepatiitti), jotka saavat immunosuppressiivisessa hoidossa (kemoterapia tai steroidit).

Pudotuskriteerit Potilaat suljetaan pois tästä tutkimuksesta, jos hän on ilmoittanut niin tekevän tutkimuksen suorittamisen aikana tai hän joutuu muun uhan kohteeksi, joka ei liity tähän tutkimukseen. Potilas, joka ei osoita kliinistä paranemista kolmen peräkkäisen kuukauden aikana, luokitellaan epäonnistuneeksi uhanalaiseksi. Kaikki keskeyttävät ja epäonnistuneet uhkailussa potilaat voivat saada toisen uhan.

Tietoinen suostumus Kaikkien tutkittavien on täytettävä ja allekirjoitettava tietoon perustuvat suostumuskirjeet.

Tutkimuspöytäkirja Mesenkymaalisten kantasolujen ottomenetelmä Luuytimen ottaminen Potilas makaa makuuasennossa paikallisesti nukutettuna. Aseptiset ja antiseptiset hoidot tehdään harjanteen alueella. Imuneula työnnetään 450 horisonttiin illiak-harjassa. Hub vapautetaan ja neulaan liitetään 10 cc:n hepariinia sisältävä ruisku. Imettiin noin 50 cc luuydintä jokaiselta koehenkilöltä.

Napanuoran otto Heti synnytyksen jälkeen napanuora leikataan ja säilytetään steriilissä kulhossa, joka sisältää 0,9 % NaCl in 40, kunnes näytteenotto jatkuu.

Rasvan ottaminen Rasvakudos on peräisin rasvaimusta tai avoimen pelkistyksen sisäisestä kiinnitystoimenpiteestä. Sitä säilytetään steriilissä kulhossa, joka sisältää 0,9 % NaCL:a 40 C:ssa. Näytteen käsittely suoritetaan 8 tunnin kuluessa näytteen ottamisesta.

Kryosäilytys ja uudelleenaktivointi. Kaikki näytteet viedään viljelylaboratorioon lääketieteellisen kantasoluteknologian integroidussa palvelussa Cipto mangunkusumo hospita.this Laboratorio on GMP (good production Product) -sertifioitu. Näytteet söivät viljeltynä tarkoituksenmukaisessa alustassa, kunnes ne saavuttivat yhtymäkohdan ja kerättiin. Sitten soluille tehdään karakterisointitesti virtaussytometrillä ja elinkelpoisuus ja lukumäärä lasketaan. Osa soluista kylmäsäilytetään, kun taas osa implantoidaan suoraan potilaaseen. Soluja kylmäsäilytetään kolme kuukautta ja sitten ne aktivoidaan uudelleen. Sitten mitataan elinkelpoisuus ja luvut. Solut implantoidaan sitten potilaalle, joka ei ole liittoutunut.

Näytteen steriiliys Steriiliystestit tehdään kolme kertaa sen varmistamiseksi, ettei sieni- tai bakteerikontaminaatiota ole.

HA-CaSO4 ja MSC Jokaista viasta senttimetriä kohden tarvitaan 10 miljoonaa solua ja 50 pellettiä HA-CaSO4:a. Laimennettu MSC sekoitetaan sitten HA-CaS04:n kanssa ja inkuboitiin 5 minuuttia ennen implantointia.

Interventio Kirurginen toimenpide tarvitaan kiinnityslaitteen kokoamiseksi pitkään luuhun. Leikkauksen aikana defektiin laitetaan pelletti HA-CaSO4. Pehmytkudosten sulkemisen jälkeen loput seerumista ruiskutetaan vaurioalueelle.

Havainnointi ja seuranta Kliininen ja radiologinen seuranta tehdään 4 viikon välein. Tarkkailu suoritetaan 12 kuukauden ajan tai kunnes luu yhdistyy. Jokaista tutkittavaa seurataan kolmannessa, kuudennessa, kahdestoista ja kahdeskymmenesneljännessä tai kunnes kiinnityslaite otetaan pois.

Vastaanottajakriteerit liittoutumattomaan murtumaan