Allogen mesenkymal stamcelle for beindefekt eller ikke-unionsbrudd (AMSC)

Forskningsmetoder Studiedesign Denne studien er kun en eksperimentell enarmsstudie etter test. Estimert studietid Forskning estimert tid vil være 24 måneder, fra mai 2014 til mai 2016. Sample Gaining Prosedyre Denne forskningen er en pilotstudie. Prøver innhentes fortløpende fra alle kildepopulasjoner som oppfyller kriteriene. Antall prøver fra hver mesenkymal stamcellekilde (fett, benmarg og navlestreng) er tre. Hver prøve kom fra tre forskjellige givere som oppfylte inklusjonskriteriene. For implantasjonen er forsøkspersonene fem fra hver intervensjon. Men angående den begrensede finansieringskilden og tiden, vil vi rekruttere ett fag for hver type MSC.

Emnekriterier Inkluderingskriterier for MSC-donor

Benmargsdonor:

Mann/kvinne i alderen 19-30 år uten noen komorbiditt (Diabetes mellitus, kardiovaskulær og annen autoimmun sykdom), HIV-test Hepatitt B-test og Hepatitt C-test er negative, ingen sopp- og bakterieforurensning i benmargen. Forsøkspersonene er villige til å bli aspirert i hoftekammen for å få benmargen.

Fettdonor:

Fettvev er oppnådd fra fettsuging eller åpen reduksjon intern fiksering prosedyre. Prøver av fett er fri for HIV, Hepatitt B, Hepatitt C og fri for sopp- og bakterieforurensning.

Navlestrengsdonor:

Navlestrengen er fra elektiv seccio caecaria fra en fullbåren mor uten noen komplikasjoner og fri for HIV, hepatitt B, hepatitt C og ingen sopp- og bakterieforurensning.

Inklusjonskriterier for mottaker Kritiske beindefektpasienter i alderen 6-55 år som er villige til kirurgisk inngrep.

Resipienteksklusjonskriterier Pasienter med patologisk fraktur forårsaket av malignitet, immunkompromittert (HIV AIDS, Diabetes mellitus, aktiv Hepatitt), i en immunsuppressiv behandling (kjemoterapi eller steroider).

Frafallskriterier Pasienter er utelukket fra denne studien hvis han/hun har oppgitt å gjøre det i løpet av tiden denne forskningen pågår, eller hun/han gjennomgår andre trusler som ikke er relatert til denne studien. Pasienter som ikke viser noen klinisk bedring i tre påfølgende måneder, kategoriseres som ikke truet. Alle frafall og unnlot å true pasienten kunne få annen trussel.

Informert samtykke Alle forsøkspersoner må fylle ut og signere på de informerte samtykkebrevene.

Forskningsprotokoll Mesenkymale stamcelletakingsmetode Benmargstaking Pasienten ligger i ryggleie, bedøvet lokalt. Aseptisk og antiseptisk utføres i illiac crest-stedet. Aspirasjonsnål settes inn 450 til horisonten i illiac crest. Huben frigjøres og en 10 cc sprøyte som inneholder heparin kobles til nålen. Vi aspirerte omtrent 50 cc benmarg fra hvert forsøksperson.

Uttak av navlestreng Rett etter fødselen kuttes navlestrengen og oppbevares i en steril bolle som inneholder 0,9 % NaCl i 40 til prøven fortsetter.

Inntak av fett Fettvev er avledet fra fettsuging eller åpen reduksjon intern fiksering. Den oppbevares i en steril bolle som inneholder NaCL 0,9 % i 40 C. Behandling av prøven gjøres innen 8 timer etter prøvetaking.

Kryokonservering og reaktivering. Alle prøvene blir tatt til kulturlaboratoriet i integrert tjeneste av stamcellemedisinsk teknologi Cipto mangunkusumo hospita.this laboratoriet er GMP (good manufacturing Product) sertifisert. Prøvene ble dyrket i egnet medium til det nådde sammenløp og høstet. Cellene gjennomgår deretter karakteriseringstest med flowcytometer og levedyktighet og tall telles. Noen av cellene kryokonserveres deretter mens noen implanteres direkte i pasienten. Cellene kryokonserveres i tre måneder og reaktiveres deretter. Levedyktighet og tall blir deretter målt. Cellene blir deretter implantert til en ikke-foreningspasient.

Prøvesterilitet Sterilitetstester utføres tre ganger for å sikre at det ikke er sopp- og bakteriekontaminering.

HA-CaSO4 og MSC For hver centimeter med defekt trengs 10 millioner celler og 50 pellets HA-CaSO4. Den fortynnede MSC blandes deretter med HA-CaSO4 og inkuberes 5 minutter før implantering.

Intervensjon Kirurgisk inngrep er nødvendig for å montere fikseringsanordningen i det lange beinet. Under operasjonen settes pellet HA-CaSO4 inn i defekten. Etter at bløtvev er lukket, injiseres resten av serumet inn i defektområdet.

Observasjon og oppfølging Klinisk og radiologisk oppfølging gjøres hver 4. uke. Observasjon gjøres i 12 måneder eller til benet forenes. Hvert emne vil bli fulgt opp i tredje, sjette, tolvte og tjuefjerde eller til fikseringsanordningen er tatt av.

Mottakerkriterier for ikke fagforeningsbrudd