Célula-tronco mesenquimal alogênica para defeito ósseo ou fratura sem união (AMSC)

Métodos de pesquisa Desenho do estudo Este estudo é um pós-teste de estudo experimental de um braço apenas. Tempo estimado de estudo O tempo estimado de pesquisa seria de 24 meses, de maio de 2014 a maio de 2016. Procedimento de Obtenção de Amostras Esta pesquisa é um estudo piloto. As amostras são obtidas consecutivamente de toda a população de origem que atende aos critérios. O número de amostras de cada fonte de células-tronco mesenquimais (adiposas, medula óssea e cordão umbilical) é três. Cada amostra derivou de três doadores diferentes que atenderam aos critérios de inclusão. Para a implantação, os sujeitos são cinco de cada intervenção. No entanto, considerando a fonte de financiamento e o tempo limitados, recrutaremos um sujeito para cada tipo de MSC.

Critérios de assunto Critérios de inclusão para doador MSC

Doador de medula óssea:

Homem/mulher de 19 a 30 anos sem comorbidades (diabetes mellitus, doenças cardiovasculares e qualquer outra doença autoimune), teste de HIV, teste de hepatite B e teste de hepatite C negativos, sem contaminação fúngica e bacteriana na medula óssea. Os indivíduos estão dispostos a serem aspirados na crista ilíaca para obter a medula óssea.

Doador adiposo:

O tecido adiposo é obtido a partir de lipoaspiração ou procedimento de fixação interna de redução aberta. As amostras de tecido adiposo estão livres de HIV, Hepatite B, Hepatite C e livres de contaminação fúngica e bacteriana.

Doador de cordão umbilical:

O cordão umbilical é de seccio cecaria eletiva de uma mãe a termo sem complicações e livre de HIV, hepatite B, hepatite C e sem contaminação fúngica e bacteriana.

Critérios de inclusão do receptor Pacientes com defeitos ósseos críticos com idades entre 6 e 55 anos que desejam se submeter a intervenção cirúrgica.

Critérios de exclusão de receptores Pacientes com fratura patológica causada por malignidade, imunocomprometidos (HIV AIDS, Diabetes mellitus, Hepatite ativa), em terapia imunossupressora (quimioterapia ou esteroides).

Critérios de abandono Os pacientes são excluídos deste estudo se assim o declararem no momento da realização desta pesquisa ou se sofrerem qualquer outra ameaça que não esteja relacionada a este estudo. O paciente que não apresenta melhora clínica em três meses consecutivos é classificado como falha na ameaça. Todos desistem e falham em ameaçar o paciente pode receber outra ameaça.

Consentimento Informado Todos os indivíduos devem preencher e assinar as cartas de consentimento informado.

Protocolo de pesquisa Método de coleta de células-tronco mesenquimais Coleta de medula óssea O paciente está deitado em posição supina, anestesiado localmente. Assepsia e antissepsia são feitas no local da crista ilíaca. A agulha de aspiração é inserida a 450º do horizonte na crista ilíaca. O hub é liberado e uma seringa de 10 cc que contém heparina é conectada à agulha. Aspiramos cerca de 50 cc de medula óssea de cada indivíduo.

Colheita do cordão umbilical Logo após o parto, os cordões umbilicais são cortados e guardados em um recipiente estéril contendo NaCl 0,9% em 40 até a retirada da amostra.

Adiposo tendo tecido adiposo são derivados de lipoaspiração ou procedimento de fixação interna de redução aberta. É mantido em uma tigela estéril contendo NaCL 0,9% a 40 C. O processamento da amostra é feito dentro de 8 horas após a coleta da amostra.

Criopreservação e reativação. Todas as amostras são levadas ao laboratório de cultura no serviço integrado de tecnologia médica de células-tronco Cipto mangunkusumo hospita.this laboratório é certificado GMP (bom produto de fabricação). As amostras foram cultivadas em meio apropriado até atingir a confluência e colhidas. As células então passam por teste de caracterização por citômetro de fluxo e a viabilidade e os números são contados. Algumas das células são então criopreservadas, enquanto outras são implantadas diretamente no paciente. As células são criopreservadas por três meses e depois reativadas. A viabilidade e os números são então medidos. As células são então implantadas em pacientes não unidos.

Esterilidade da amostra Os testes de esterilidade são feitos três vezes para garantir que não haja contaminação fúngica e bacteriana.

HA-CaSO4 e MSC Para cada centímetro de defeito, são necessários 10 milhões de células e 50 pellets de HA-CaSO4. As MSC diluídas são então misturadas com HA-CaSO4 e incubadas 5 minutos antes de serem implantadas.

Intervenção É necessária intervenção cirúrgica para montar o dispositivo de fixação no osso longo. Durante a cirurgia, pastilhas de HA-CaSO4 são inseridas no defeito. Depois que os tecidos moles são fechados, o restante do soro é injetado na área do defeito.

Observação e acompanhamento O acompanhamento clínico e radiológico é feito a cada 4 semanas. A observação é feita por 12 meses ou até que o osso se una. Todos os sujeitos serão acompanhados no terceiro, sexto, décimo segundo e vigésimo quarto ou até a retirada do dispositivo de fixação.

Critérios do destinatário para fratura não consolidada