Cellule souche mésenchymateuse allogénique pour défaut osseux ou fracture non syndiqué (AMSC)

Méthodes de recherche Conception de l'étude Cette étude est une étude post-test expérimentale à un bras uniquement. Durée estimée de l'étude La durée estimée de la recherche serait de 24 mois, de mai 2014 à mai 2016. Exemple de procédure d'obtention Cette recherche est une étude pilote. Les échantillons sont obtenus consécutivement de toutes les populations sources qui répondent aux critères. Le nombre d'échantillons provenant de chaque source de cellules souches mésenchymateuses (graisse, moelle osseuse et cordon ombilical) est de trois. Chaque échantillon provenait de trois donneurs différents répondant aux critères d'inclusion. Pour l'implantation, les sujets sont au nombre de cinq de chaque intervention. Cependant, compte tenu de la source de financement et du temps limités, nous recruterons un sujet pour chaque type de MSC.

Sujet Critères Critères d'inclusion pour le donneur MSC

Donneur de moelle osseuse :

Homme/femme âgé de 19 à 30 ans sans aucune comorbidité (diabète sucré, cardiovasculaire et toute autre maladie auto-immune), le test VIH Le test de l'hépatite B et le test de l'hépatite C sont négatifs, pas de contamination fongique et bactérienne dans la moelle osseuse. Les sujets sont prêts à être aspirés dans la crête iliaque afin d'obtenir la moelle osseuse.

Donneur de graisse :

Le tissu adipeux provient d'une liposuccion ou d'une procédure de fixation interne à réduction ouverte. Les échantillons de graisse sont exempts de VIH, d'hépatite B, d'hépatite C et exempts de contamination fongique et bactérienne.

Donneur de cordon ombilical :

Le cordon ombilical est formé d'une seccio caecaria élective d'une mère à terme sans aucune complication et exempte de VIH, d'hépatite B, d'hépatite C et sans contamination fongique et bactérienne.

Critères d'inclusion des receveurs Patients atteints d'une insuffisance osseuse critique âgés de 6 à 55 ans qui souhaitent subir une intervention chirurgicale.

Critères d'exclusion du receveur Patients présentant une fracture pathologique d'origine maligne, immunodéprimés (VIH SIDA, Diabète sucré, Hépatite active), sous traitement immunosuppresseur (chimiothérapie ou stéroïdes).

Critères d'abandon Les patients sont exclus de cette étude s'ils ont déclaré le faire pendant la durée de cette recherche ou s'ils subissent toute autre menace qui n'est pas liée à cette étude. Le patient qui ne montre aucune amélioration clinique pendant trois mois consécutifs est classé comme n'ayant pas réussi à menacer. Tous ceux qui abandonnent et n'ont pas menacé le patient pourraient recevoir d'autres menaces.

Consentement éclairé Tous les sujets doivent remplir et signer les lettres de consentement éclairé.

Protocole de recherche Méthode de prélèvement de cellules souches mésenchymateuses Prélèvement de moelle osseuse Le patient est allongé en décubitus dorsal, anesthésié localement. L'asepsie et l'antisepsie sont réalisées au niveau de la crête iliaque. L'aiguille d'aspiration est insérée 450 à l'horizon dans la crête iliaque. Le moyeu est libéré et une seringue de 10 cc contenant de l'héparine est connectée à l'aiguille. Nous avons aspiré environ 50 cc de moelle osseuse de chaque sujet.

Prélèvement du cordon ombilical Juste après l'accouchement du bébé, le cordon ombilical est coupé et conservé dans un bol stérile contenant 0,9% de NaCl dans 40 jusqu'à ce que le prélèvement soit effectué.

Prélèvement adipeux Le tissu adipeux est dérivé d'une liposuccion ou d'une procédure de fixation interne à réduction ouverte. Il est conservé dans un bol stérile contenant du NaCL 0,9 % à 40 C. Le traitement de l'échantillon est effectué dans les 8 heures suivant le prélèvement.

Cryoconservation et réactivation. Tous les échantillons sont prélevés au laboratoire de culture du service intégré de technologie médicale des cellules souches Cipto mangunkusumo hospita.this laboratoire est certifié GMP (good manufacturing Product). Les échantillons ont été cultivés dans un milieu approprié jusqu'à ce qu'ils atteignent la confluence et récoltés. Les cellules subissent ensuite un test de caractérisation par cytomètre en flux et la viabilité et le nombre sont comptés. Certaines des cellules sont ensuite cryoconservées tandis que d'autres sont directement implantées chez le patient. Les cellules sont cryoconservées pendant trois mois puis réactivées. La viabilité et le nombre sont ensuite mesurés. Les cellules sont ensuite implantées chez un patient non syndiqué.

Stérilité des échantillons Les tests de stérilité sont effectués trois fois pour s'assurer qu'il n'y a pas de contamination fongique et bactérienne.

HA-CaSO4 et MSC Pour chaque centimètre de défaut, 10 millions de cellules et 50 pastilles de HA-CaSO4 sont nécessaires. Le MSC dilué est ensuite mélangé avec le HA-CaSO4 et incubé 5 minutes avant d'être implanté.

Intervention Une intervention chirurgicale est nécessaire pour assembler le dispositif de fixation dans l'os long. Pendant la chirurgie, des pastilles HA-CaSO4 sont insérées dans le défaut. Une fois les tissus mous refermés, le reste du sérum est injecté dans la zone du défaut.

Observation et suivi Le suivi clinique et radiologique se fait toutes les 4 semaines. L'observation se fait pendant 12 mois ou jusqu'à ce que l'os s'unisse. Chaque sujet sera suivi dans les troisième, sixième, douzième et vingt-quatrième ou jusqu'à ce que le dispositif de fixation soit retiré.

Critères du receveur pour une fracture non consolidée