Allogene mesenchymale stamcel voor botdefect of non-unionfractuur (AMSC)

Onderzoeksmethoden Onderzoeksopzet Dit onderzoek is alleen een experimenteel eenarmig onderzoek na de test. Geschatte studietijd Onderzoek geschatte tijd zou 24 maanden zijn, van mei 2014 tot mei 2016. Procedure voor het verkrijgen van monsters Dit onderzoek is een pilotstudie. Van alle bronpopulaties die voldoen aan de criteria worden achtereenvolgens steekproeven genomen. Het aantal monsters van elke bron van mesenchymale stamcellen (vet, beenmerg en navelstreng) is drie. Elk monster was afkomstig van drie verschillende donoren die voldeden aan de opnamecriteria. Voor de implantatie zijn de proefpersonen vijf van elke interventie. Maar gezien de beperkte financieringsbron en tijd, zullen we voor elk type MSC één proefpersoon rekruteren.

Onderwerp Criteria Inclusiecriteria voor MSC-donor

Beenmergdonor:

Man/vrouw van 19-30 jaar zonder comorbiditeit (Diabetes mellitus, cardiovasculaire en elke andere auto-immuunziekte), HIV-test Hepatitis B-test en Hepatitis C-test zijn negatief, geen schimmel- en bacteriële besmetting in het beenmerg. Proefpersonen zijn bereid om in de bekkenkam te worden geaspireerd om het beenmerg te krijgen.

Vetdonor:

Vetweefsel wordt gewonnen door liposuctie of interne fixatieprocedure met open reductie. Vetmonsters zijn vrij van HIV, Hepatitis B, Hepatitis C en vrij van schimmel- en bacteriële besmetting.

Navelstrengdonor:

Navelstreng zijn vorm electieve seccio caecaria van een voldragen moeder zonder enige complicaties en vrij van HIV, hepatitis B, hepatitis C en geen schimmel- en bacteriële besmetting.

Inclusiecriteria voor de ontvanger Kritieke patiënten met botdefecten in de leeftijd van 6-55 jaar die bereid zijn een chirurgische ingreep te ondergaan.

Uitsluitingscriteria ontvanger Patiënten met een pathologische fractuur veroorzaakt door maligniteit, immuungecompromitteerd (HIV, AIDS, Diabetes mellitus, actieve hepatitis), in een immunosuppressieve therapie (chemotherapie of steroïden).

Criteria voor uitval Patiënten worden uitgesloten van dit onderzoek als hij/zij heeft aangegeven dit te doen in de tijd dat dit onderzoek wordt gehouden of als hij/zij een andere behandeling ondergaat die geen verband houdt met dit onderzoek. Patiënt die gedurende drie opeenvolgende maanden geen klinische verbetering vertoont, wordt gecategoriseerd als niet bedreigd. Allen die uitvielen en de patiënt niet bedreigden, konden een andere behandeling krijgen.

Geïnformeerde toestemming Alle proefpersonen moeten de geïnformeerde toestemmingsbrieven invullen en ondertekenen.

Onderzoeksprotocol Methode mesenchymale stamcelafname Beenmergafname Patiënt ligt in rugligging, plaatselijk verdoofd. Aseptisch en antiseptisch worden gedaan op de illiac crest-locatie. Aspiratienaald wordt 450 tot horizon ingebracht in illiac crest. Hub wordt losgelaten en een 10 cc injectiespuit met heparine wordt op de naald aangesloten. We aspireerden ongeveer 50 cc beenmerg van elke proefpersoon.

Navelstrengafname Direct na de bevalling wordt de navelstreng doorgeknipt en in een steriele kom met 0,9% NaCl in 40 bewaard totdat het staal wordt afgenomen.

Het nemen van vet Vetweefsel is afkomstig van liposuctie of interne fixatieprocedure met open reductie. Het wordt bewaard in een steriele kom met NaCl 0,9% in 40 C. De verwerking van het monster vindt plaats binnen 8 uur nadat het monster is genomen.

Cryopreservatie en reactivering. Alle monsters worden naar het kweeklaboratorium gebracht in de geïntegreerde dienst van medische stamceltechnologie Cipto mangunkusumo hospita.this laboratorium is GMP (good manufacturing Product) gecertificeerd. De monsters werden gekweekt in geschikt medium totdat ze samenvloeiden en werden geoogst. De cellen ondergaan vervolgens een karakteriseringstest door een flowcytometer en levensvatbaarheid en aantallen worden geteld. Sommige cellen worden vervolgens gecryopreserveerd, terwijl sommige direct in de patiënt worden geïmplanteerd. De cellen worden gedurende drie maanden gecryopreserveerd en daarna weer geactiveerd. Levensvatbaarheid en aantallen worden dan gemeten. De cellen worden vervolgens geïmplanteerd bij een niet-genezende patiënt.

Monstersteriliteit Er worden driemaal steriliteitstesten uitgevoerd om er zeker van te zijn dat er geen schimmel- en bacteriële besmetting is.

HA-CaSO4 en MSC Voor elke centimeter defect zijn 10 miljoen cellen en 50 pellets HA-CaSO4 nodig. De verdunde MSC mengt zich vervolgens met het HA-CaSO4 en wordt 5 minuten geïncubeerd voordat het wordt geïmplanteerd.

Ingreep Chirurgische ingreep is nodig om het fixatie-instrument in het pijpbeen te monteren. Tijdens de operatie worden pellets HA-CaSO4 in het defect ingebracht. Nadat het zachte weefsel is gesloten, wordt de rest van het serum in het defectgebied geïnjecteerd.

Observatie en opvolging Klinische en radiologische opvolging gebeurt om de 4 weken. Observatie wordt gedaan gedurende 12 maanden of totdat het bot zich verenigt. Elk onderwerp wordt gevolgd in de derde, zesde, twaalfde en vierentwintigste of totdat het fixatie-apparaat wordt verwijderd.

Ontvangercriteria voor non-unionfractuur