用于骨缺损或骨不连骨折的同种异体间充质干细胞 (AMSC)

研究方法 研究设计 本研究仅为实验性单臂研究后测试。 预计学习时间 Research 预计时间为 24 个月，从 2014 年 5 月到 2016 年 5 月。 样本获取程序 本研究是一项试点研究。 从符合标准的所有源人群中连续获取样本。 每个间充质干细胞（脂肪、骨髓和脐带）来源的样本数量为三个。 每个样本都来自三个符合纳入标准的不同捐助者。 对于植入，每个干预的主题是五个。 但鉴于资金来源和时间有限，我们将针对每种MSC招募一个课题。

受试者标准 MSC 供体的纳入标准

骨髓捐献者：

19-30岁男性/女性，无任何合并症（糖尿病、心血管和任何其他自身免疫性疾病）、HIV检测、乙型肝炎检测和丙型肝炎检测均为阴性，骨髓中无真菌和细菌污染。 受试者愿意在髂嵴处被抽吸以获取骨髓。

脂肪供体 :

脂肪组织是通过吸脂术或切开复位内固定手术获得的。 脂肪样品不含 HIV、乙型肝炎、丙型肝炎，也不含真菌和细菌污染。

脐带捐献者：

脐带是来自足月产妇的选择性剖腹产，没有任何并发​​症，没有艾滋病毒、乙型肝炎、丙型肝炎，也没有真菌和细菌污染。

受试者纳入标准 6-55 岁愿意接受手术干预的危重骨缺损患者。

接受者排除标准 因恶性肿瘤、免疫功能低下（HIV AIDS、糖尿病、活动性肝炎）、免疫抑制治疗（化疗或类固醇）导致病理性骨折的患者。

退出标准 如果患者在进行本研究期间声明这样做，或者她/他遭受与本研究无关的任何其他威胁，则患者将被排除在本研究之外。 连续三个月未显示任何临床改善的患者被归类为未能威胁。 所有退出且未能威胁患者可能会受到其他威胁。

知情同意 所有受试者必须填写并签署知情同意书。

研究方案 间充质干细胞提取方法 骨髓提取 患者仰卧，局部麻醉。 无菌和防腐是在髂嵴位置进行的。 抽吸针插入髂嵴水平线 450°。 释放集线器，将含有肝素的 10 cc 注射器连接到针头上。 我们从每个受试者身上吸取了大约 50 cc 的骨髓。

脐带采集 婴儿出生后立即将脐带剪下并保存在含有 0.9% NaCl 的无菌碗中 40 直到取样进行。

取脂肪 脂肪组织来源于抽脂或切开复位内固定手术。 它被保存在一个无菌碗中，该碗在 40 C 中含有 0.9% 的 NaCL。样品的处理在取样后 8 小时内完成。

低温保存和重新激活。 所有样本都被带到干细胞医疗技术综合服务的培养实验室 Cipto mangunkusumo hospita.this 实验室通过GMP（良好生产产品）认证。 样品在适当的培养基中培养直至达到汇合并收获。 然后通过流式细胞仪对细胞进行特征化测试，并对细胞活力和数量进行计数。 然后将一些细胞冷冻保存，而另一些则直接植入患者体内。 这些细胞被冷冻保存三个月，然后重新激活。 然后测量生存力和数量。 然后将细胞植入未结合的患者体内。

标本无菌 无菌测试进行三次，以确保没有真菌和细菌污染。

HA-CaSO4 和 MSC 对于每厘米的缺陷，需要 1000 万个细胞和 50 个 HA-CaSO4 颗粒。 稀释的 MSC 然后与 HA-CaSO4 混合并在植入前孵育 5 分钟。

干预 需要手术干预才能在长骨中组装固定装置。 在手术过程中，颗粒 HA-CaSO4 被插入缺损处。 软组织闭合后，将剩余的血清注入缺损区域。

观察和随访 每 4 周进行一次临床和放射学随访。 观察进行 12 个月或直到骨结合。 每个受试者将在第三、第六、第十二和二十四次或直到固定装置被取下。

不愈合骨折的接受者标准