Allogén mezenchimális őssejt csonthiányhoz vagy nem szöveti töréshez (AMSC)

Kutatási módszerek Tanulmánytervezés Ez a tanulmány egy kísérleti, egykaros vizsgálat utáni teszt. Becsült tanulmányi idő A kutatás becsült időtartama 24 hónap, 2014 májusától 2016 májusáig. Mintavételi eljárás Ez a kutatás egy kísérleti tanulmány. A mintákat egymás után minden olyan forráspopulációból veszik, amely megfelel a kritériumoknak. Minden mesenchymális őssejtből (zsír, csontvelő és köldökzsinór) származó minták száma három. Minden minta három különböző donortól származott, amelyek megfeleltek a felvételi kritériumoknak. A beültetésnél az alanyok mindegyik beavatkozásból öten vannak. A korlátozott finanszírozási forrásra és időre tekintettel azonban minden MSC-típushoz egy tantárgyat veszünk fel.

Tárgykritériumok Az MSC donorra vonatkozó felvételi kritériumok

Csontvelő donor:

Férfi/nő 19-30 éves korig, társbetegségek nélkül (Diabetes mellitus, cardiovascularis és egyéb autoimmun betegség), HIV teszt A Hepatitis B teszt és a Hepatitis C teszt negatív, nincs gombás és bakteriális szennyeződés a csontvelőben. Az alanyok hajlandóak a csípőtaréjból leszívni, hogy megkapják a csontvelőt.

Zsír donor:

A zsírszövet zsírleszívással vagy nyílt redukciós belső rögzítési eljárással nyerhető. A zsírminták mentesek a HIV-től, a hepatitis B-től és a hepatitis C-től, valamint mentesek a gombás és bakteriális szennyeződésektől.

Köldökzsinór donor:

A köldökzsinór egy teljes idős anyától származó elektív seccio caecaria, minden komplikáció nélkül, HIV-től, hepatitis B-től, hepatitis C-től és gombás és bakteriális fertőzéstől mentes.

Recipiens felvételi kritériumok Kritikus csonthiányos, 6-55 éves betegek, akik hajlandóak műtéti beavatkozásra.

Recipiens kizárási kritériumok Rosszindulatú daganat okozta kóros töréssel rendelkező, immunhiányos (HIV AIDS, Diabetes mellitus, aktív hepatitis) immunszuppresszív terápiában (kemoterápia vagy szteroidok) szenvedő betegek.

Lemorzsolódási kritériumok A betegek kizárásra kerülnek ebből a vizsgálatból, ha ezt a kutatás ideje alatt kijelentette, vagy ha bármilyen más fenyegetésnek van kitéve, amely nem kapcsolódik ehhez a vizsgálathoz. Az a beteg, aki három egymást követő hónapban nem mutat klinikai javulást, nem fenyegetőnek minősül. Minden kieső és nem fenyegető beteg kaphat más fenyegetést.

Tájékozott hozzájárulás Minden alanynak ki kell töltenie és alá kell írnia a tájékoztatáson alapuló beleegyező levelet.

Kutatási Protokoll Mesenchymális őssejt vételi módszer Csontvelő felvétel A beteg fekvő helyzetben fekszik, helyi érzéstelenítéssel. Az aszeptikus és fertőtlenítő kezelést az illikus címer helyén végezzük. A szívótűt 450 fokban a horizonthoz szúrják be az illócikkben. A Hub felszabadul, és egy 10 cm3-es heparint tartalmazó fecskendőt csatlakoztatunk a tűhöz. Körülbelül 50 cc csontvelőt szívtunk le minden alanyból.

Köldökzsinór levétel Közvetlenül a baba megszületése után a köldökzsinórt elvágjuk, és 0,9% NaCl-t tartalmazó steril tálban tartjuk a mintavételig.

Zsír szedése A zsírszövet zsírleszívásból vagy nyílt redukciós belső rögzítési eljárásból származik. 0,9% NaCL-t tartalmazó steril edényben tároljuk 40 C-on. A minta feldolgozása a mintavételt követő 8 órán belül megtörténik.

Krioprezerváció és újraaktiválás. Az összes mintát az őssejt-orvosi technológia integrált szolgáltatásában működő kultúrlaboratóriumba viszik Cipto mangunkusumo hospita.this A laboratórium GMP (jó gyártási termék) tanúsítvánnyal rendelkezik. A mintákat a megfelelő tápközegben tenyésztve fogyasztották, amíg el nem érte az összefolyást, és begyűjtötték. A sejteket ezután áramlási citométerrel végzett jellemzési tesztnek vetjük alá, és megszámoljuk az életképességet és a számokat. A sejtek egy részét ezután mélyhűtötték, míg másokat közvetlenül beültetnek a páciensbe. A sejteket három hónapig mélyhűtve tárolják, majd újraaktiválják. Ezután megmérik az életképességet és a számokat. A sejteket ezután beültetik egy nem egyesült betegbe.

A minta sterilitása A sterilitási teszteket háromszor kell elvégezni, hogy megbizonyosodjon arról, hogy nincs gombás és bakteriális szennyeződés.

HA-CaSO4 és MSC A hiba minden centiméteréhez 10 millió sejt és 50 pellet HA-CaSO4 szükséges. A hígított MSC-t ezután összekeverjük a HA-CaSO4-gyel, és a beültetés előtt 5 percig inkubáljuk.

Beavatkozás Sebészeti beavatkozás szükséges a rögzítőeszköz hosszú csontba történő összeszereléséhez. A műtét során HA-CaSO4 pelletet helyeznek a defektusba. A lágyszövetek lezárása után a szérum többi részét a defektus területére fecskendezzük.

Megfigyelés és nyomon követés A klinikai és radiológiai ellenőrzés 4 hetente történik. A megfigyelést 12 hónapig vagy a csont egyesüléséig végezzük. Minden alanyt nyomon követnek a harmadik, hatodik, tizenkettedik és huszonnegyedik szakaszban, vagy amíg a rögzítőeszközt le nem veszik.

Recipiens kritériumai nem szakadási törés esetén