Allogen mesenkymal stamcelle for knogledefekt eller ikke-unionsfraktur (AMSC)

Forskningsmetoder Studiedesign Denne undersøgelse er kun en eksperimentel en-armsundersøgelse efter test. Estimeret undersøgelsestid Forskning estimeret tid ville være 24 måneder, fra maj 2014 til maj 2016. Procedure for indsamling af prøver Denne forskning er et pilotstudie. Prøver udtages fortløbende fra alle kildepopulationer, der opfylder kriterierne. Antallet af prøver fra hver mesenkymal stamcellekilde (fedt, knoglemarv og navlestreng) er tre. Hver prøve stammede fra tre forskellige donorer, der opfyldte inklusionskriterierne. Til implantationen er forsøgspersonerne fem fra hver intervention. Men med hensyn til den begrænsede finansieringskilde og tid, vil vi rekruttere et emne for hver type MSC.

Emnekriterier Inklusionskriterier for MSC-donor

Knoglemarvsdonor:

Mand/kvinde i alderen 19-30 år uden nogen form for comorbiditis (Diabetes mellitus, kardiovaskulær og enhver anden autoimmun sygdom), HIV-test Hepatitis B-test og Hepatitis C-test er negative, ingen svampe- og bakteriekontaminering i knoglemarven. Forsøgspersoner er villige til at blive aspireret i hoftekammen for at få knoglemarven.

Fedtdonor:

Fedtvæv er opnået fra fedtsugning eller åben reduktion intern fiksering procedure. Fedtprøver er fri for HIV, Hepatitis B, Hepatitis C og fri for svampe- og bakteriel kontaminering.

Navlestrengsdonor:

Navlestrengen er form elektiv seccio caecaria fra en fuldbåren mor uden nogen komplikationer og fri for HIV, hepatitis B, hepatitis C og ingen svampe- og bakteriel kontaminering.

Recipientinklusionskriterier Kritiske knogledefektpatienter i alderen 6-55 år, som er villige til at gennemgå kirurgisk indgreb.

Recipienteksklusionskriterier Patienter med patologisk fraktur forårsaget af malignitet, immunkompromitteret (HIV AIDS, Diabetes mellitus, aktiv Hepatitis), i immunsuppressiv behandling (kemoterapi eller steroider).

Frafaldskriterier Patienter er udelukket fra denne undersøgelse, hvis han/hun erklærede at gøre det i den tid, denne undersøgelse afholdes, eller hun/han gennemgår enhver anden trussel, som ikke er relateret til denne undersøgelse. Patient, der ikke viser nogen klinisk forbedring i tre på hinanden følgende måneder, kategoriseres som ikke truet. Alle falder fra og undlader at true patienten kan få anden trussel.

Informeret samtykke Alle forsøgspersoner skal udfylde og underskrive de informerede samtykkebreve.

Forskningsprotokol Mesenkymale stamcelletagningsmetode Knoglemarvstagning Patienten ligger ned i rygliggende stilling, bedøvet lokalt. Aseptisk og antiseptisk udføres i illiac crest placering. Aspirationsnålen indsættes 450° til horisonten i hoftekammen. Hub frigives, og en 10 cc sprøjte, der indeholder heparin, forbindes til kanylen. Vi aspirerede omkring 50 cc knoglemarv fra hvert forsøgsperson.

Navlestrengstagning Lige efter fødslen klippes navlestrengen over og opbevares i en steril skål indeholdende 0,9% NaCl i 40, indtil prøven er gået videre.

Fedtindtagelse Fedtvæv er afledt af fedtsugning eller åben reduktion intern fikseringsprocedure. Den opbevares i en steril skål indeholdende NaCL 0,9% i 40 C. Behandling af prøven sker inden for 8 timer efter prøveudtagning.

Kryokonservering og reaktivering. Alle prøverne tages til kulturlaboratoriet i integreret service af medicinsk stamcelleteknologi Cipto mangunkusumo hospita.this laboratoriet er GMP (good manufacturing Product) certificeret. Prøverne blev dyrket i passende medium, indtil de nåede sammenløb og høstede. Cellerne gennemgår derefter karakteriseringstest med flowcytometer, og levedygtighed og antal tælles. Nogle af cellerne kryokonserveres derefter, mens nogle implanteres direkte i patienten. Cellerne kryokonserveres i tre måneder og genaktiveres derefter. Levedygtighed og tal måles derefter. Cellerne implanteres derefter til en ikke-foreningspatient.

Prøvesterilitet Sterilitetstest udføres tre gange for at sikre, at der ikke er svampe- og bakteriekontaminering.

HA-CaSO4 og MSC For hver centimeter defekt er der brug for 10 millioner celler og 50 pellets HA-CaSO4. Den fortyndede MSC blandes derefter med HA-CaSO4 og inkuberes 5 minutter før implantation.

Intervention Kirurgisk indgreb er nødvendig for at samle fikseringsanordningen i den lange knogle. Under operationen indsættes pellet HA-CaSO4 i defekten. Efter at blødt væv er lukket, injiceres resten af ​​serumet i det defekte område.

Observation og opfølgning Klinisk og radiologisk opfølgning udføres hver 4. uge. Observation udføres i 12 måneder eller indtil knoglen forenes. Hvert emne vil blive fulgt op i tredje, sjette, tolvte og fireogtyvende eller indtil fikseringsanordningen tages af.

Recipientkriterier for ikke-unionsbrud