Regenerering av mänskliga intrabonydefekter med rhFGF-2/HA

Studiepopulation och experimentell design Studien utformades som en randomiserad, prospektiv, kontrollerad klinisk prövning med delad mun. Den genomfördes i enlighet med riktlinjerna i World Medical Associations deklaration i Helsingfors (version VI, 2002), efter godkännande av studiens design och medgivande av Medicinska fakulteten, Etiska kommittén för medicinsk forskning, Federal Fluminense University (Godkännandeprotokoll CEP -HUAM/CCM 21/03). Skriftligt informerat samtycke erhölls från alla försökspersoner. Systemiskt friska patienter med måttlig till avancerad kronisk parodontit hänvisades till avdelningen för parodontologi, odontologiska fakulteten, Federal Fluminense University för parodontal behandling av avancerad parodontit, rekryterades för och behandlades i studien.

Inklusionskriterier för studien var: (a) vuxna försökspersoner med kronisk parodontit som uppvisar (b) radiografiska bevis för alveolär benförlust vid den proximala aspekten av tanden, (c) intrabeny defekt djupare än 4 mm, (d) sonderingsficka djup >6 mm på platsen, (e) omärklig allmän hälsa enligt medicinsk historia och klinisk bedömning, (f) inga mediciner tagits på minst sex månader och inga antibiotika tagits under tolv månader före studiens början. Försökspersoner som har slutat röka i minst ett år innan studiens början betraktades som icke-rökare och, om de andra inkluderade kriterierna uppfylldes, inkluderades i det aktuella urvalet. Uteslutningskriterier för studien var: (a) försökspersoner med "tidigt debuterande" eller aggressiva former av parodontit, (b) nuvarande rökare, (c) förekomst av signifikanta systemiska sjukdomar (d.v.s. cancer, AIDS, diabetes), (d) kliniska bevis på furkationsdefekter, (e) förekomst av apikal radioleucens och (f) tidigare bristande samarbete med underhållsprogrammet.

Två defekter valdes ut från varje patient och tilldelades slumpmässigt, omedelbart före varje kirurgiskt besök, genom datorgenererad slumpmässig sekvensallokering till en av de två använda behandlingsmodaliteterna: (a) Kontroll: öppen instrumentering av rotytorna och bendefekter via flik modifierad papillkonserveringsflik; (b) Test: öppen instrumentering av rotytorna och bendefekter via flikmodifierad papillkonserveringsflik och applicering av en rhFGF-2/HA i den intrabony defekten. Behandlingstilldelningen registrerades i ett tilldelningstabellblad som inte var tillgängligt för den kliniska granskaren under hela studien. Både kontroll- och teststället behandlades vid samma kirurgiska möte och ingen information om behandlingsallokering gavs till patienten. Alla kirurgiska ingrepp utfördes av en enda operatör, som blev medveten om platstilldelningen först efter avslutad rotplanering och konditionering och omedelbart före appliceringen av tillväxtfaktorn på testplatserna. Ett strikt kirurgiskt protokoll som betonade noggrann hantering av hårda och mjuka vävnader, rotdebridering, sårstabilitet och infektionskontroll användes (Santana et al 2009; Miranda et al 2013). Icke-kirurgisk infektionskontroll utfördes i samband med orsaksrelaterad periodontal terapi och bestod av munhygieninstruktioner, fjällning och rothyvling, tandpolering och plackkontrollåtgärder som utfördes sex månader före regenerativ kirurgi. Patienterna utvärderades om tre och sex månader efter slutförandet av den icke-kirurgiska orsaksrelaterade parodontala behandlingen och registrerades efter det senare utvärderingsmötet.

Kliniska registreringar Kliniska parametrar utvärderades med hjälp av cemento-emalj junction (CEJ) eller, i tillämpliga fall, ett annat definierat landmärke, som en fast referenspunkt. Alla mätningar registrerades med en UNC #15 periodontal sond (PCP-UNC 15, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) av en blindad, tränad och kalibrerad undersökare (CMMS), omedveten om behandlingen som gavs vid baslinjen och ett år efter behandling. Måtten registrerades till närmaste mm. Full mouth plack score (FMPS) registrerades dikotomt som procentandelen av totala ytor (fyra platser per tand) (O'Leary et al. 1972). BOP bedömdes också dikotomt på samma ställen, och en hel mun blödningspoäng beräknades. Recession (REC) mättes som avståndet från CEJ till gingivalmarginalen (GM). Probing djup (PD) mättes som avståndet från GM till botten av gingival sulcus. PD och REC användes för att beräkna den vertikala kliniska anknytningsnivån (PAL). Under lokalbedövning utfördes transgingival sondering och avståndet mellan CEJ och botten av defekten (avstånd CEJ-BD) registrerades också. Kliniska mätningar erhållna vid baslinjen (omedelbart före operation) och vid tolv månader rapporteras. Efter debridering av operationsstället definierades botten av defekten (BD) som avståndet mellan cemento-emaljövergången och basen av defekten. Benkammens nivå (BC) mättes som avståndet mellan cementoemaljövergången och toppen av defekten och djupet inom bendefekten (INTRA) mättes som subtraktionen av BC från BD-mätningar (BD-BC). Dessutom mättes även djupet av de tre-, två- och enväggsdelkomponenterna av bendefekten. De primära och sekundära utfallsvariablerna i den föreliggande studien var förändring i PAL respektive benförstärkning (förändring i distans CEJ-BD).

För att säkerställa reproducerbarheten och konsistensen av mätningar före och efter intervention, utfördes examinatorkalibrering innan studiens början. Fjorton platser, av sju patienter, med sonderingsdjup >6 mm utvärderades av undersökaren vid två separata tillfällen, med 48 timmars mellanrum.

Flikdesign Intrakrevikulära snitt gjordes och buckala och linguala mukoperiosteala flikar, inklusive minst en mesial tand och en annan distal tanden som behandlades, förhöjdes genom trubbig dissektion. Yttersta noggrannhet vidtogs för att bevara den marginella tandköttet och interdentalvävnaden för att uppnå bättre stängning av de behandlade ställena. Den defektassocierade interdentala papillen nåddes således med papillkonserveringsfliktekniker (Takey 1985, Cortellini et al. 1995, Cortellini et al. 1999) enligt indikationer. Ett vertikalt frigörande snitt utfördes vid den mesiala aspekten av fliken närhelst det var nödvändigt för att erhålla optimerad, spänningsfri tillgång till operationsområdet.

Debridering av rot- och bendefekt Bendefekten debriderades noggrant med kirurgiska kyretter och ultraljudsinstrument med särskild ansträngning för att avlägsna all inflammatorisk granulationsvävnad, men utan avsikt att perforera de kortikala benväggarna. Noggrann rothyvling utfördes med hand (Hu-Friedy, IL, USA), roterande (Intensiv, Grancia, Schweiz) och ultraljudsinstrument (Cavitron, Dentisply, USA), för att avlägsna subgingivalt plack och tandsten tills alla rotytor fick en hård glasartad yta. Under instrumenteringen var klaffarna något förhöjda, försiktigt skyddade med periosteala hissar och ofta bevattnade med saltlösning.

Rotkonditionering och rhFGF-2-applicering Efter instrumentering tvättades rotytorna med saltlösning för att avlägsna eventuella kvarvarande lossnade fragment från defekten och operationsfältet. Därefter applicerades en nyberedd tetracyklinhydrokloridpasta i saltlösning med försiktiga cirkulära rörelser på de instrumenterade och torkade rotytorna hos både test- och kontrollgrupper under tre minuter. Därefter sköljdes det defekta området noggrant med koksaltlösning. Slutligen, på experimentställena, applicerades 0,2 ml av en gel innehållande 4 mg/ml rhFGF-2 i natriumhyaluronat MW 1,3 x 106 på de torkade rotytorna och bendefekten. Flikarna placerades sedan om och spänningsfri primär flikstängning erhölls med användning av en invändig madrass och enstaka avbrutna suturer (5.0 Ethicon Sutures, Johnson & Johnson, NJ, USA eller Gore-tex Sutures, W.L Gore, AZ, USA).

Postoperativ behandling Patienterna ordinerades systemisk antibiotikabehandling bestående av 200 mg doxycyklin***** dagen före operationen, följt av 100 mg dagligen som fortsatte till den 20:e dagen efter operationen. Inget kirurgiskt förband användes. Patienterna instruerades att fortsätta sin vanliga hemhygienvård, förutom i det opererade området, som rengjordes med hjälp av skonsamma topiska appliceringar av 0,2 % klorhexidinglukonat (Perioxidin®, Lacer, Barcelona, ​​Spanien) i mättade bomullspinnar. Patienterna instruerades att inte borsta eller använda tandtråd på det kirurgiska området under 4 veckor, när mekanisk plackkontroll återupptogs. Suturerna togs bort två veckor efter operationen. Hypermobila tänder skars antingen före eller omedelbart efter det kirurgiska ingreppet.

Underhållsschema Patienter inkluderades i ett strikt postoperativt stödjande vårdprogram efter operation (Santana et al 2009). Alla patienter sågs varje vecka under de första tre månaderna och varannan vecka under de följande tre månaderna. Därefter sågs patienterna en gång i månaden under den sista sexmånadersperioden av studien. Efter 1 år återkallades patienterna och instruerades på nytt om korrekt munhygien. Webbplatserna skalade om när det indikerades.

Röntgenbedömning Röntgenbilder togs med en parallell, standardiserad teknik vid baslinjen (Eickholz et al. 2004). Röntgenbilder digitaliserades och analyserades med hjälp av programvaran NIH Image Analysis. De anatomiska landmärkena för studien inkluderade cementum-emalj junction (CEJ), alveolär crest (AC) och basen av defekten (BD) (Schei et al. 1959). Radiografiskt defektdjup mättes längs rotytan, parallellt med rotaxeln, som avståndet mellan CEJ och BD.

Statistiska analyser Kvantitativa data registrerades som medel- och standardavvikelser. Inga datapunkter saknades. Provstorleken bestämdes genom Power-analys, med antagande av en standardavvikelse av skillnaden på 0,5, vilket indikerade att med ett urval av 20 försökspersoner skulle studien ha >90 % kraft att upptäcka en 1 mm skillnad i de primära utfallsmåtten PAL-förstärkning och CEJ-BD-reduktion mellan de två grupperna. För att verifiera normaliteten av data användes kurtos- och skevhetskurvorna. Eftersom alla data ansågs vara normala för de analyserade parametrarna, användes Students parade t-test för jämförelser mellan grupper (baslinje mot 12 månader) och mellan grupper (test mot kontroll). Signifikansnivån satt till 5 % användes i alla statistiska jämförelser som utfördes i programvaran ProStat (Poly Software International, Pearl River, NY, USA).