Regenerering av humane intrabenedefekter med rhFGF-2/HA

Studiepopulasjon og eksperimentell design Studien ble designet som en randomisert, prospektiv, kontrollert klinisk studie med delt munn. Den ble utført i samsvar med retningslinjene til World Medical Association Declaration of Helsinki (versjon VI, 2002), etter godkjenning av studiedesignet og samtykke fra Det medisinske fakultet, Etisk komité for medisinsk forskning, Federal Fluminense University (Godkjenningsprotokoll CEP -HUAM/CCM 21/03). Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle fag. Systemisk friske pasienter med moderat til avansert kronisk periodontitt henvist til avdeling for periodontologi, Det odontologiske fakultet, Federal Fluminense University for periodontal behandling av avansert periodontitt ble rekruttert for og behandlet i studien.

Inklusjonskriterier for studien var: (a) voksne personer med kronisk periodontitt som viser (b) røntgenologiske bevis på alveolært bentap ved det proksimale aspektet av tannen, (c) intrabony defekt dypere enn 4 mm, (d) sonderende lommedybde >6 mm på stedet, (e) umerkelig generell helse i henhold til medisinsk historie og klinisk vurdering, (f) ingen medisiner tatt i minst seks måneder og ingen antibiotika tatt i tolv måneder før begynnelsen av studien. Forsøkspersoner som har sluttet å røyke i minst ett år før starten av studien ble ansett som ikke-røykere, og hvis de andre inkluderte kriteriene var oppfylt, ble de inkludert i det nåværende utvalget. Eksklusjonskriterier for studien var: (a) personer med "tidlig debut" eller aggressive former for periodontitt, (b) nåværende røykere, (c) tilstedeværelse av betydelige systemiske sykdommer (dvs. kreft, AIDS, diabetes), (d) klinisk bevis på furkasjonsdefekter, (e) tilstedeværelse av apikal radioleusens og (f) tidligere manglende samarbeid med vedlikeholdsprogrammet.

To defekter ble valgt fra hver pasient, og ble tilfeldig tildelt, rett før hver kirurgisk avtale, ved datamaskingenerert tilfeldig sekvensallokering til en av de to behandlingsmodalitetene som ble brukt: (a) Kontroll: åpen instrumentering av rotoverflatene og beindefekter via klaff modifisert papilla bevaring klaff; (b) Test: åpen instrumentering av rotoverflatene og beindefekter via klaffmodifisert papillakonserveringsklaff og påføring av en rhFGF-2/HA i intrabenedefekten. Behandlingstildeling ble registrert i et tildelingstabellark som ikke var tilgjengelig for den kliniske undersøkeren gjennom hele studien. Både kontroll- og teststedet ble behandlet ved samme kirurgiske avtale og ingen informasjon om behandlingstildeling ble gitt til pasienten. Alle kirurgiske prosedyrer ble utført av en enkelt operatør, som ble oppmerksom på lokalitetstildelingen først etter fullført rotplanlegging og kondisjonering, og umiddelbart før påføring av vekstfaktoren på teststedene. En streng kirurgisk protokoll som legger vekt på forsiktig håndtering av hardt og mykt vev, rotdebridering, sårstabilitet og infeksjonskontroll ble brukt (Santana et al 2009; Miranda et al 2013). Ikke-kirurgisk infeksjonskontroll ble utført i sammenheng med årsaksrelatert periodontal terapi og besto av munnhygieneinstruksjoner, skalering og rotplaning, tannpolering og plakkkontroll utført seks måneder før regenerativ kirurgi. Pasientene ble re-evaluert tre og seks måneder etter fullføringen av den ikke-kirurgiske årsaksrelaterte periodontale terapien og ble registrert etter den senere evalueringsavtalen.

Kliniske registreringer Kliniske parametere ble vurdert ved å bruke semento-emaljekrysset (CEJ) eller, når det er aktuelt, et annet definert landemerke, som et fast referansepunkt. Alle målinger ble registrert ved bruk av en UNC #15 periodontal probe (PCP-UNC 15, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) av en blindet, trent og kalibrert undersøker (CMMS), uvitende om behandlingen gitt ved baseline og ett år etter behandling. Målene ble registrert til nærmeste mm. Full mouth plakk score (FMPS) ble registrert dikotomt som prosentandelen av totale overflater (fire steder per tann) (O'Leary et al. 1972). BOP ble også vurdert dikotomt på de samme stedene, og en full munnblødningsscore ble beregnet. Resesjon (REC) ble målt som avstanden fra CEJ til gingivalmarginen (GM). Probing dybde (PD) ble målt som avstanden fra GM til bunnen av gingival sulcus. PD og REC ble brukt til å beregne det vertikale kliniske tilknytningsnivået (PAL). Under lokalbedøvelse ble transgingival sondering utført og avstanden mellom CEJ og bunnen av defekten (avstand CEJ-BD) ble også registrert. Kliniske målinger oppnådd ved baseline (umiddelbart før operasjonen) og ved tolv måneder er rapportert. Etter debridering av operasjonsstedet ble bunnen av defekten (BD) definert som avstanden mellom semento-emaljeforbindelsen og bunnen av defekten. Benkammens nivå (BC) ble målt som avstanden mellom sementoemaljekrysset og toppen av defekten, og dybden av intra-benet defekt (INTRA) ble målt som subtraksjon av BC fra BD-målinger (BD-BC). Dessuten ble dybden av de tre, to og enveggede underkomponentene til beindefekten også målt. De primære og sekundære utfallsvariablene i denne studien var henholdsvis endring i PAL og benøkning (endring i avstand CEJ-BD).

For å sikre reproduserbarheten og konsistensen av målinger før og etter intervensjon, ble det utført sensorkalibrering før starten av studien. Fjorten steder, hos syv pasienter, med sonderingsdybder >6 mm ble evaluert av undersøkeren ved to separate anledninger, med 48 timers mellomrom.

Klaffdesign Intrakrevikulære snitt ble gjort og bukkale og linguale mucoperiosteale klaffer, inkludert minst en mesial tann og en annen distal tannen som ble behandlet, ble forhøyet ved stump disseksjon. Ekstrem forsiktighet ble tatt for å bevare den marginale gingiva og interdentalvev for å oppnå bedre lukking av de behandlede stedene. Således ble den defektassosierte inter-dentalpapillen tilgjengelig med papillakonserveringsklaffteknikker (Takey 1985, Cortellini et al. 1995, Cortellini et al. 1999) i henhold til indikasjoner. Et vertikalt frigjørende snitt ble utført ved det mesiale aspektet av klaffen når det var nødvendig for å oppnå optimalisert, spenningsløs tilgang til det kirurgiske området.

Rot- og bendefektdebridering Bendefekten ble omhyggelig debridert med kirurgiske kyretter og ultralydinstrumenter med spesiell innsats for å fjerne alt det inflammatoriske granulasjonsvevet, men uten intensjon om å perforere de kortikale benveggene. Grundig rothøvling ble utført med hånd (Hu-Friedy, IL, USA), roterende (Intensiv, Grancia, Sveits) og ultralydinstrumenter (Cavitron, Dentisply, USA), for å fjerne subgingival plakk og tannstein til alle rotoverflater fikk en hard glassaktig flate. Under instrumenteringen ble klaffene litt forhøyet, forsiktig beskyttet med periosteale heiser, og ofte vannet med saltvann.

Rotkondisjonering og rhFGF-2-påføring Etter instrumentering ble rotoverflatene vasket med saltvann for å fjerne eventuelle gjenværende løsnede fragmenter fra defekten og operasjonsfeltet. Deretter ble en nylaget tetracyklinhydrokloridpasta i saltvann påført med forsiktige sirkulære bevegelser på de instrumenterte og tørkede rotoverflatene til både test- og kontrollgruppene i tre minutter. Deretter ble det defekte området grundig skylt med saltvann. Til slutt, på de eksperimentelle stedene, ble 0,2 ml av en gel inneholdende 4 mg/ml rhFGF-2 i natriumhyaluronat MW 1,3 x 106 påført på de tørkede rotoverflatene og beindefekten. Klaffene ble deretter reposisjonert og spenningsfri primær klafflukking ble oppnådd ved bruk av innvendig madrass og enkeltavbrutt suturer (5.0 Ethicon Sutures, Johnson & Johnson, NJ, USA eller Gore-tex Sutures, W.L Gore, AZ, USA).

Postoperativ behandling Pasientene ble foreskrevet systemisk antibiotikabehandling bestående av 200 mg doksycyklin***** dagen før operasjonen, etterfulgt av 100 mg daglig fortsatte til den 20. dagen etter operasjonen. Ingen kirurgisk bandasje ble brukt. Pasientene ble instruert om å fortsette sin vanlige hjemmehygiene, unntatt i det opererte området, som ble rengjort ved hjelp av skånsomme topiske påføringer av 0,2 % klorheksidinglukonat (Perioxidin®, Lacer, Barcelona, ​​Spania) i mettede bomullspinner. Pasientene ble instruert om å ikke børste eller bruke tanntråd i det kirurgiske området i 4 uker, da mekanisk plakkkontroll ble gjenopptatt. Suturene ble fjernet to uker etter operasjonen. Hypermobile tenner ble splintet enten før eller umiddelbart etter det kirurgiske inngrepet.

Vedlikeholdsplan Pasienter ble registrert i et strengt postoperativt støttende behandlingsprogram etter kirurgi (Santana et al 2009). Alle pasienter ble sett ukentlig i løpet av de første tre månedene og annenhver uke i de neste tre månedene. Deretter ble pasientene sett én gang i måneden i den siste seks måneders perioden av studien. Etter 1 år ble pasientene tilbakekalt og instruert på nytt om riktig munnhygiene. Nettstedene ble skalert på nytt når angitt.

Radiografiske vurderinger Røntgenbilder ble tatt med en parallell, standardisert teknikk ved baseline (Eickholz et al. 2004). Røntgenbilder ble digitalisert og analysert ved hjelp av programvaren NIH Image Analysis. De anatomiske landemerkene for studien inkluderte sement-emaljekryss (CEJ), alveolar crest (AC) og base of the defect (BD) (Schei et al. 1959). Radiografisk defektdybde ble målt langs rotoverflaten, parallelt med rotaksen, som avstanden mellom CEJ og BD.

Statistiske analyser Kvantitative data ble registrert som gjennomsnitt og standardavvik. Ingen datapunkter manglet. Prøvestørrelsen ble bestemt ved kraftanalyse, forutsatt et standardavvik av forskjellen på 0,5, noe som indikerte at med et utvalg på 20 forsøkspersoner ville studien ha >90 % kraft til å oppdage en 1 mm forskjell i de primære utfallsmålene PAL-gevinst og CEJ-BD-reduksjon mellom de to gruppene. For å verifisere normaliteten til dataene ble kurtose- og skjevhetskurvene brukt. Fordi alle data ble ansett for å være normale for parametrene som ble analysert, ble Students parede t-test brukt for sammenligninger mellom grupper (baseline versus 12 måneder) og intergruppe (test versus kontroll). Signifikansnivået satt til 5 % ble brukt i alle statistiske sammenligninger utført i programvaren ProStat (Poly Software International, Pearl River, NY, USA).