Humán csonton belüli defektusok regenerálása rhFGF-2/HA-val

Vizsgálati populáció és kísérleti felépítés A vizsgálatot randomizált, prospektív, osztott szájú, kontrollált klinikai vizsgálatként tervezték. Az Orvosok Világszövetsége Helsinki Nyilatkozatának (VI. verzió, 2002) irányelveivel összhangban, a vizsgálat tervének jóváhagyása és a Szövetségi Fluminense Egyetem Orvoskutatási Etikai Bizottsága (CEP jóváhagyási protokoll) jóváhagyása után történt. -HUAM/CCM 21/03). Minden alanytól írásos beleegyezést szereztek. A vizsgálatba a Federal Fluminense Egyetem Fogorvostudományi Karának Parodontológiai Osztályára utaltak előrehaladott parodontitis parodontális kezelésére, szisztémásan egészséges, közepesen előrehaladott krónikus parodontitisben szenvedő betegeket.

A vizsgálatba való bevonási kritériumok a következők voltak: (a) krónikus parodontitisben szenvedő felnőtt alanyok, akiknél (b) a fog proximális részének alveoláris csontvesztése röntgenvizsgálati bizonyítékot mutatott, (c) 4 mm-nél mélyebb intrabonális defektus, (d) a szondázó zseb mélysége >6 mm a helyszínen, (e) a kórtörténet és a klinikai megítélés alapján nem figyelemreméltó általános egészségi állapot, (f) a vizsgálat megkezdése előtt legalább hat hónapig nem szedtek gyógyszert és nem szedtek antibiotikumot tizenkét hónapig. Nemdohányzónak tekintettük azokat az alanyokat, akik legalább egy évvel a vizsgálat megkezdése előtt leszoktak a dohányzásról, és amennyiben a többi kritérium teljesült, bekerültek a jelen mintába. A vizsgálatból kizárási kritériumok a következők voltak: (a) a parodontitis "korai kezdetű" vagy agresszív formáiban szenvedő alanyok, (b) jelenleg dohányzók, (c) jelentős szisztémás betegségek (pl. rák, AIDS, cukorbetegség), (d) klinikai furkációs hibákra utaló bizonyítékok, e) apikális radioleucencia jelenléte és f) a karbantartási programmal való korábbi együttműködés hiánya.

Minden betegből két defektust választottunk ki, és véletlenszerűen, közvetlenül minden műtéti időpont előtt számítógép által generált véletlenszerű sorrend-kiosztással a két alkalmazott kezelési mód egyikéhez rendeltük hozzá: (a) Kontroll: a gyökérfelületek és a csonthibák nyitott műszerezése szárnyon keresztül. módosított papilla-megőrző lebeny; (b) Vizsgálat: a gyökérfelületek és a csontdefektusok nyitott műszerezése lebeny-módosított papilla-megőrző lebeny segítségével és rhFGF-2/HA alkalmazása az intrabonális defektusban. A kezelés elosztását egy kiosztási táblázatban regisztrálták, amely a vizsgálat során a klinikai vizsgáló számára nem volt elérhető. Mind a kontroll, mind a vizsgálati helyet ugyanazon a műtéti időpontban kezelték, és a kezelés kiosztásáról nem adtak tájékoztatást a betegnek. Az összes műtéti beavatkozást egyetlen operátor végezte, aki csak a gyökértervezés és kondicionálás befejezése után, közvetlenül a növekedési faktor vizsgálati helyeken történő alkalmazása előtt szerzett tudomást a helykiosztásról. Szigorú sebészeti protokollt alkalmaztak, amely hangsúlyozta a kemény és lágy szövetek gondos kezelését, a gyökértisztítást, a seb stabilitását és a fertőzések kontrollját (Santana és mtsai 2009; Miranda et al 2013). A nem sebészeti fertőzések kontrollját az okfüggő parodontális terápia keretében végeztük, és szájhigiéniai utasításokból, hámlásból és gyökérgyalulásból, fogfényezésből és lepedék-ellenőrzésből állt, amelyet hat hónappal a regeneratív műtét előtt végeztek. A betegeket három és hat hónappal a nem sebészeti okokkal összefüggő parodontális kezelés befejezése után újraértékelték, és a későbbi értékelő időpontot követően bevonták őket.

Klinikai feljegyzések A klinikai paramétereket a cement-zománc csomópont (CEJ) vagy adott esetben egy másik meghatározott mérföldkő, mint rögzített referenciapont segítségével értékelték. Az összes mérést UNC #15 periodontális szondával (PCP-UNC 15, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) rögzítette egy vak, képzett és kalibrált vizsgáló (CMMS), aki nem tudott a kezelés kezdetén és egy évvel azután. kezelés. A méréseket mm pontossággal rögzítettük. A teljes száj plakk pontszámát (FMPS) dichotóm módon rögzítettük a teljes felület százalékában (foganként négy hely) (O'Leary et al. 1972). A BOP-t dichotóm módon is értékelték ugyanazokon a helyeken, és kiszámították a teljes szájvérzés pontszámát. A recessziót (REC) a CEJ és a gingival margin (GM) távolságaként mérték. A szondázási mélységet (PD) a GM és a gingiva sulcus alja közötti távolságként mérték. A vertikális klinikai kötődési szint (PAL) kiszámításához PD-t és REC-et használtunk. Helyi érzéstelenítésben transzgingivális szondázást végeztünk, és feljegyeztük a CEJ és a defektus alja közötti távolságot (CEJ-BD távolság) is. A kiinduláskor (közvetlenül a műtét előtt) és a tizenkét hónapban kapott klinikai méréseket jelentik. A műtéti hely tisztítása után a defektus alját (BD) a cement-zománc csatlakozás és a defektus alapja közötti távolságként határoztuk meg. A csonttaréj szintjét (BC) a cementzománc csatlakozása és a defektus gerince közötti távolságként, a csonton belüli defektus mélységét (INTRA) pedig a BC-nek a BD-mérésekből (BD-BC) való kivonásaként mértük. Ezenkívül megmértük a csonthiány három, két és egyfalú részegységének mélységét is. A jelen vizsgálat elsődleges és másodlagos kimeneti változója a PAL változása és a csontgyarapodás (a CEJ-BD távolság változása) volt.

A beavatkozás előtti és utáni mérések reprodukálhatóságának és következetességének biztosítása érdekében a vizsgálat megkezdése előtt vizsgálói kalibrációt végeztünk. Hét betegnél tizennégy, 6 mm-nél nagyobb szondázási mélységű helyet értékelt a vizsgáló két külön alkalommal, 48 órás különbséggel.

Lebeny kialakítása Intracrevicularis bemetszéseket végeztünk, és tompa disszekcióval megemeltük a bukkális és nyelvi nyálkahártya-lebenyeket, beleértve legalább az egyik fogat mesiális és egy másik, a kezelt fog disztális részét. Rendkívüli gondot fordítottunk a marginális íny és a fogközi szövet megőrzésére, hogy a kezelt helyek jobban záródjanak. Így a defektussal összefüggő fogközi papillát a javallatok szerint papillakonzerváló lebeny technikákkal (Takey 1985, Cortellini et al. 1995, Cortellini és mtsai 1999) fértünk hozzá. Függőleges kioldó bemetszést végeztünk a lebeny meziális oldalán, amikor szükséges volt, hogy optimalizált, feszültségmentes hozzáférést kapjunk a műtéti területhez.

Gyökér- és csontdefektus-debridement A csontdefektust sebészeti küretekkel és ultrahangos műszerekkel aprólékosan tisztították, különös erőfeszítéssel, hogy eltávolítsák az összes gyulladásos granulációs szövetet, de a kortikális csontfalak perforációjának szándéka nélkül. Alapos gyökérgyalulást végeztünk kézi (Hu-Friedy, IL, USA), rotációs (Intensiv, Grancia, Svájc) és ultrahangos műszerekkel (Cavitron, Dentisply, USA), a szubgingivális lepedék és fogkő eltávolítására, amíg minden gyökérfelület kemény üveges nem lett. felület. A műszerezés során a szárnyakat enyhén megemelték, gondosan védték csonthártya-emelőkkel, és gyakran öntözték sóoldattal.

Gyökérkondicionálás és rhFGF-2 alkalmazás A műszerezés után a gyökérfelületeket sóoldattal mostuk, hogy eltávolítsuk a defektusból és a műtéti területről esetlegesen megmaradt levált fragmentumokat. Ezután frissen elkészített, sóoldatban készült tetraciklin-hidroklorid pasztát vittünk fel gyengéd körkörös mozdulatokkal mind a vizsgált, mind a kontrollcsoport műszerezett és szárított gyökérfelületére három percig. Ezt követően a hibás területet sóoldattal gondosan leöblítettük. Végül a kísérleti helyeken 0,2 ml gélt, amely 4 mg/ml rhFGF-2-t tartalmazott nátrium-hialuronátban (MW 1,3 x 106), a megszáradt gyökérfelületekre és csonthibákra vittünk fel. A szárnyakat ezután áthelyeztük, és belső matrac és egyszeri megszakított varratokkal (5.0 Ethicon Sutures, Johnson & Johnson, NJ, USA vagy Gore-tex Sutures, W.L Gore, AZ, USA) feszültségmentes elsődleges szárnyzárást biztosítottunk.

Műtét utáni kezelés A betegeknek szisztémás antibiotikum terápiát írtak fel, amely 200 mg doxiciklint***** tartalmazott a műtét előtti napon, majd napi 100 mg-ot a műtét utáni 20. napig. Sebészeti kötést nem használtak. A betegeket arra utasították, hogy folytassák a rendszeres otthoni higiénés ápolást, kivéve a műtött területet, amelyet 0,2%-os klórhexidin-glükonát (Perioxidin®, Lacer, Barcelona, ​​Spanyolország) gyengéd helyi alkalmazásával tisztítottak meg telített pamut törlőkendőben. A betegeket arra utasították, hogy 4 hétig ne mossanak fogkefét vagy fogselymet a műtéti területre, amikor a mechanikus plakk-szabályozást újra beindították. A varratokat két héttel a műtét után eltávolították. A hipermobil fogakat a műtét előtt vagy közvetlenül utána sínre húztuk.

Karbantartási ütemterv A betegeket a műtétet követően szigorú posztoperatív támogató gondozási programba vették fel (Santana et al 2009). Minden beteget hetente láttunk az első három hónapban, és kéthetente a következő három hónapban. Ezt követően a betegeket havonta egyszer látták a vizsgálat utolsó hat hónapjában. 1 év elteltével a betegeket visszahívták, és újból kioktatták a megfelelő szájhigiéniára. A webhelyeket átméretezték, amikor jelezték.

Radiográfiás értékelések A röntgenfelvételeket párhuzamos, szabványosított technikával készítették a kiinduláskor (Eickholz et al. 2004). A röntgenfelvételeket digitalizáltuk és NIH Image Analysis szoftverrel elemeztük. A vizsgálat anatómiai mérföldkövei közé tartozott a cement-zománc csomópont (CEJ), az alveolaris crest (AC) és a defektus alapja (BD) (Schei et al. 1959). A radiográfiás hibamélységet a gyökérfelület mentén, a gyökértengellyel párhuzamosan mértük a CEJ és a BD közötti távolságként.

Statisztikai elemzések A kvantitatív adatokat átlag és szórások formájában rögzítettük. Egyetlen adatpont sem hiányzott. A minta méretét Power analízissel határozták meg, a különbség 0,5-ös szórását feltételezve, ami azt jelzi, hogy 20 alanyból álló minta esetén a vizsgálat >90%-os ereje lenne az 1 mm-es különbség kimutatására a PAL-erősítés elsődleges kimenetelében. és a CEJ-BD csökkenése a két csoport között. Az adatok normálisságának igazolására a görbék és a ferdeségi görbéket használtuk. Mivel az elemzett paraméterek tekintetében minden adatot normálisnak tekintettünk, Student-féle páros t-tesztet alkalmaztunk a csoporton belüli (alapvonal versus 12 hónap) és csoportok közötti (teszt versus kontroll) összehasonlításához. A ProStat (Poly Software International, Pearl River, NY, USA) szoftverrel végzett összes statisztikai összehasonlításnál az 5%-ban beállított szignifikanciaszintet alkalmaztuk.