Regenerering af humane intrabenedefekter med rhFGF-2/HA

Studiepopulation og eksperimentelt design Undersøgelsen var designet som et randomiseret, prospektivt, kontrolleret klinisk forsøg med spaltet mund. Det blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne i World Medical Association Declaration of Helsinki (version VI, 2002), efter godkendelse af undersøgelsesdesignet og samtykke fra Det Medicinske Fakultet, Etisk Komite for Medicinsk Forskning, Federal Fluminense University (Godkendelsesprotokol CEP -HUAM/CCM 21/03). Der blev indhentet skriftligt informeret samtykke fra alle forsøgspersoner. Systemisk raske patienter med moderat til fremskreden kronisk parodontitis henvist til Parodontologisk Afdeling, Det Odontologiske Fakultet, Federal Fluminense University for parodontal behandling af fremskreden parodontitis, blev rekrutteret til og behandlet i undersøgelsen.

Inklusionskriterier for undersøgelsen var: (a) voksne forsøgspersoner med kronisk parodontitis med (b) radiografisk bevis for alveolært knogletab ved det proksimale aspekt af tanden, (c) intrabony defekt dybere end 4 mm, (d) sonderende lommedybde >6 mm på stedet, (e) umærkeligt generelt helbred ifølge sygehistorie og klinisk vurdering, (f) ingen medicin taget i mindst seks måneder og ingen antibiotika taget i tolv måneder før begyndelsen af ​​undersøgelsen. Forsøgspersoner, der har holdt op med at ryge i mindst et år før begyndelsen af ​​undersøgelsen, blev betragtet som ikke-rygere, og hvis de øvrige inkluderede kriterier var opfyldt, blev de inkluderet i den aktuelle prøve. Eksklusionskriterier for undersøgelsen var: (a) forsøgspersoner med "tidligt opstået" eller aggressive former for paradentose, (b) nuværende rygere, (c) tilstedeværelse af signifikante systemiske sygdomme (dvs. cancer, AIDS, diabetes), (d) kliniske bevis for furkationsdefekter, (e) tilstedeværelse af apikal radioleucens og (f) tidligere manglende samarbejde med vedligeholdelsesprogrammet.

To defekter blev udvalgt fra hver patient og blev tilfældigt tildelt umiddelbart før hver kirurgisk aftale ved computergenereret tilfældig sekvensallokering til en af ​​de to anvendte behandlingsmodaliteter: (a) Kontrol: åben instrumentering af rodoverfladerne og knogledefekter via flap modificeret papilla konserveringsflap; (b) Test: åben instrumentering af rodoverfladerne og knogledefekter via flapmodificeret papillakonserveringsflap og påføring af en rhFGF-2/HA i den intrabony defekt. Behandlingstildeling blev registreret i et tildelingstabelark, der ikke var tilgængeligt for den kliniske eksaminator under hele undersøgelsen. Både kontrol- og teststedet blev behandlet ved samme kirurgiske aftale, og patienten fik ingen oplysninger om behandlingstildeling. Alle kirurgiske indgreb blev udført af en enkelt operatør, som først blev opmærksom på lokalitetsfordelingen efter afsluttet rodplanlægning og konditionering og umiddelbart før påføring af vækstfaktoren på teststederne. En streng kirurgisk protokol, der lægger vægt på omhyggelig håndtering af hårdt og blødt væv, roddebridering, sårstabilitet og infektionskontrol blev anvendt (Santana et al 2009; Miranda et al 2013). Ikke-kirurgisk infektionskontrol blev udført i forbindelse med årsagsrelateret parodontal terapi og bestod af mundhygiejneinstruktioner, afskalning og rodplaning, tandpolering og plakkontrolforanstaltninger udført seks måneder før regenerativ kirurgi. Patienterne blev revurderet tre og seks måneder efter afslutningen af ​​den ikke-kirurgiske årsagsrelaterede parodontale terapi og indrulleret efter den senere evalueringsaftale.

Kliniske registreringer Kliniske parametre blev vurderet ved hjælp af cemento-emaljeforbindelsen (CEJ) eller, når det er relevant, et andet defineret vartegn, som et fast referencepunkt. Alle målinger blev registreret ved hjælp af en UNC #15 parodontal probe (PCP-UNC 15, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) af en blindet, trænet og kalibreret undersøger (CMMS), uvidende om den behandling, der blev givet ved baseline og et år efter behandling. Målene blev registreret til nærmeste mm. Full mouth plaque score (FMPS) blev registreret dikotomt som procentdelen af ​​totale overflader (fire steder pr. tand) (O'Leary et al. 1972). BOP blev også vurderet dikotomt på de samme steder, og en fuld mundblødningsscore blev beregnet. Recession (REC) blev målt som afstanden fra CEJ til gingivalmarginen (GM). Probing dybde (PD) blev målt som afstanden fra GM til bunden af ​​gingival sulcus. PD og REC blev brugt til at beregne det vertikale kliniske tilknytningsniveau (PAL). Under lokalbedøvelse blev transgingival sondering udført, og afstanden mellem CEJ og bunden af ​​defekten (afstand CEJ-BD) blev også registreret. Kliniske målinger opnået ved baseline (umiddelbart før operation) og efter 12 måneder er rapporteret. Efter debridering af operationsstedet blev bunden af ​​defekten (BD) defineret som afstanden mellem cemento-emaljeforbindelsen og bunden af ​​defekten. Knogletopniveau (BC) blev målt som afstanden mellem cementoemaljeforbindelsen og toppen af ​​defekten, og intra-knogledefektdybden (INTRA) blev målt som subtraktionen af ​​BC fra BD-målinger (BD-BC). Desuden blev dybden af ​​de tre-, to- og envæggede delkomponenter af knogledefekten også målt. De primære og sekundære udfaldsvariabler i nærværende undersøgelse var henholdsvis ændring i PAL og knogleforøgelse (ændring i distance CEJ-BD).

For at sikre reproducerbarheden og konsistensen af ​​præ- og post-interventionsmålinger blev eksaminatorkalibrering udført før undersøgelsens begyndelse. Fjorten steder, hos syv patienter, med sonderingsdybder >6 mm blev evalueret af undersøgeren ved to separate lejligheder med 48 timers mellemrum.

Flapdesign Der blev lavet intrakrevikulære snit, og bukkale og linguale mucoperiosteale flapper, inklusive mindst en mesial tand og en anden distal tand, der blev behandlet, blev hævet ved stump dissektion. Der blev udvist ekstrem omhu for at bevare den marginale gingiva og inter-dentalt væv for at opnå bedre lukning af de behandlede steder. Således blev den defektassocierede inter-dentale papilla tilgået med papillekonserveringsflapteknikker (Takey 1985, Cortellini et al. 1995, Cortellini et al. 1999) ifølge indikationer. Et lodret frigørende snit blev udført ved det mesiale aspekt af klappen, når det var nødvendigt for at opnå optimeret, spændingsfri adgang til det kirurgiske område.

Rod- og knogledefektdebridering Knogledefekten blev omhyggeligt debrideret med kirurgiske curetter og ultralydsinstrumenter med særlig indsats for at fjerne alt det inflammatoriske granulationsvæv, men uden hensigt om at perforere de kortikale knoglevægge. Grundig rodhøvling blev udført med hånd (Hu-Friedy, IL, USA), roterende (Intensiv, Grancia, Schweiz) og ultralydsinstrumenter (Cavitron, Dentisply, USA) for at fjerne subgingival plak og tandsten, indtil alle rodoverflader opnåede en hård glasagtig overflade. Under instrumenteringen var klapperne let hævet, omhyggeligt beskyttet med periosteale elevatorer og ofte overrislet med saltvand.

Rodkonditionering og rhFGF-2-påføring Efter instrumentering blev rodoverfladerne vasket med saltvandsopløsning for at fjerne eventuelle resterende løsnede fragmenter fra defekten og kirurgisk felt. Derefter blev en frisk fremstillet tetracyclinhydrochloridpasta i saltvand påført med blide cirkulære bevægelser på de instrumenterede og tørrede rodoverflader af både test- og kontrolgrupper i tre minutter. Derefter blev det defekte område omhyggeligt skyllet med saltvand. Til sidst på de eksperimentelle steder blev 0,2 ml af en gel indeholdende 4 mg/ml rhFGF-2 i natriumhyaluronat MW 1,3 x 106 påført på de tørrede rodoverflader og knogledefekten. Flapperne blev derefter genplaceret, og spændingsfri primær klaplukning blev opnået ved brug af indvendig madras og enkelte afbrudte suturer (5.0 Ethicon Sutures, Johnson & Johnson, NJ, USA eller Gore-tex Sutures, W.L Gore, AZ, USA).

Post-operativ behandling Patienterne fik ordineret systemisk antibiotikabehandling bestående af 200 mg doxycyclin***** dagen før operationen, efterfulgt af 100 mg dagligt fortsat indtil den 20. dag efter operationen. Der blev ikke brugt kirurgisk forbinding. Patienterne blev instrueret i at fortsætte deres almindelige hygiejnepleje i hjemmet, undtagen i det opererede område, som blev rengjort ved hjælp af blide topiske påføringer af 0,2 % klorhexidingluconat (Perioxidin®, Lacer, Barcelona, ​​Spanien) i mættede vatpinde. Patienterne blev instrueret i ikke at børste eller bruge tandtråd i det kirurgiske område i 4 uger, når den mekaniske plakkontrol blev genoptaget. Suturene blev fjernet to uger efter operationen. Hypermobile tænder blev skåret enten før eller umiddelbart efter det kirurgiske indgreb.

Vedligeholdelsesplan Patienter blev indskrevet i et stringent postoperativt støttende behandlingsprogram efter operation (Santana et al. 2009). Alle patienter blev set ugentligt i de første tre måneder og hver anden uge i de næste tre måneder. Derefter blev patienterne set én gang om måneden i undersøgelsens sidste seks måneders periode. Efter 1 år blev patienterne tilbagekaldt og geninstrueret i korrekt mundhygiejne. Websteder blev omskaleret, når det blev angivet.

Radiografiske vurderinger Røntgenbilleder blev taget med en parallel, standardiseret teknik ved baseline (Eickholz et al. 2004). Røntgenbilleder blev digitaliseret og analyseret ved hjælp af NIH Image Analysis software. De anatomiske pejlemærker for undersøgelsen omfattede cement-emalje junction (CEJ), alveolær crest (AC) og base af defekten (BD) (Schei et al. 1959). Radiografisk defektdybde blev målt langs rodoverfladen, parallelt med rodaksen, som afstanden mellem CEJ og BD.

Statistiske analyser Kvantitative data blev registreret som middel- og standardafvigelser. Der manglede ingen datapunkter. Prøvestørrelsen blev bestemt ved Power-analyse under antagelse af en standardafvigelse af forskellen på 0,5, hvilket indikerede, at med en prøve på 20 forsøgspersoner ville undersøgelsen have >90 % kraft til at detektere en 1 mm forskel i de primære udfaldsmål PAL-forstærkning og CEJ-BD reduktion mellem de to grupper. For at verificere normaliteten af ​​dataene blev kurtosis- og skævhedskurverne brugt. Fordi alle data blev anset for at være normale for de analyserede parametre, blev Students parrede t-test brugt til sammenligninger mellem grupper (baseline versus 12 måneder) og intergruppe (test versus kontrol). Signifikansniveauet sat til 5 % blev brugt i alle statistiske sammenligninger udført i softwaren ProStat (Poly Software International, Pearl River, NY, USA).