Bedömning av intraoperativ sondbaserad konfokal laserendomikroskopi i matsmältnings- och endokrinkirurgi: en pilotstudie (Pilot pCLE)

Intraoperativ histologisk undersökning är ett grundläggande verktyg för cancerkirurgi (omfattning av operation, resektionsmarginaler, sentinel lymfkörtel) och nödvändig under andra omständigheter som omoperation eller endokrin kirurgi. Användning av konventionell fryst snittteknik resulterar i en förlängning av driftstiden med cirka 40 minuter.

Sondbaserad konfokal laserendomikroskopi (pCLE) är en ny avbildningsteknik som möjliggör realtidsavbildning med mikroskopupplösning. Specifikt, efter intravenös injektion av ett fluorescerande kontrastmedel - i denna studie kommer fluorescein att användas, pCLE-systemet tillhandahåller videosekvenser av vävnaden, med hjälp av ett konfokalt mikroskop integrerat i en minisond och en lågeffektlaser som belysningskälla (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Paris, Frankrike).

pCLE används för närvarande inom endoskopi, främst för uppföljning av Barretts matstrupe, kolorektala polyper och förträngningar i gall- och pankreasgångarna, men även inom urologi. pCLE har aldrig testats i öppna eller videoassisterade operationsinställningar. Steriliserbara prober finns och är certifierade för användning via ett endoskop i Frankrike (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Paris, Frankrike). En sond (CelioFlex UHDTM) utvecklas för närvarande för användning i laparoskopisk kirurgi.

Denna pilotstudie syftar till att utvärdera pCLE i kirurgisk miljö. Varje anatomisk struktur motsvarar en specifik vävnadsarkitektur, som idag är känd genom standard histologisk undersökning. Konventionell histologi innebär förändring av vävnadsarkitekturen, med ablation av blodtillförseln, provtagning och teknisk behandling av proverna (fixering, skärning, färgning). pCLE gör det möjligt att kringgå denna process och gör det möjligt att erhålla bilder av den mikroskopiska strukturen in vivo, utan cellskador och utan avbrott i blod- och lymfcirkulationen. De erhållna videosekvenserna återspeglar den mikroskopiska arkitekturen, i en form som hittills varken har kartlagts eller utnyttjats för djupa organ. Potentialen för denna teknik visades i intraabdominala organ endast i djurmodellen, med mycket uppmuntrande resultat eftersom känsligheten och specificiteten för pCLE var överlägsen standard histologisk undersökning.

Det primära syftet är skildringen av histologisk återgivning av normala och patologiska vävnader genom pCLE. Genomförbarheten av realtidsdiagnostik kommer också att bedömas. Alla kirurgiska tillstånd som vanligtvis kräver fryst snitt kommer att undersökas. Totalt 30 patienter, med olika patologi i sköldkörteln/bisköldkörteln, magen, matstrupen, bukspottkörteln, binjuren, tjocktarmen/tunntarmen, levern kommer att inkluderas.

Installationen och kirurgisk öppning kommer att utföras enligt standardprotokoll. Ett kontrastmedel, fluorescein, kommer att injiceras intravenöst för att möjliggöra vävnadsvisualisering med pCLE. Under operationen kommer kirurgen att utföra pCLE-undersökningen för att erhålla och spela in videosekvenser av in situ-strukturer. Frysta sektioner kommer att erhållas på samma prover och kommer att vägleda det kirurgiska beslutsfattandet ytterligare.

Diagnostiska kriterier kommer att definieras av ett kirurg-patologteam och valideras ytterligare genom retrospektiv analys av sekvenserna i jämförelse med konventionella histologiska objektglas. Data kommer att användas för att skapa en bildbank av referensbilder för optiska biopsier.

Studien kommer att göra det möjligt att peka ut de kirurgiska tillstånd där pCLE är den mest effektiva och tillförlitliga och så småningom kan ersätta tekniken för fryst snitt.

En andra studie, i jämförande prospektiva miljöer, kunde vidare fokuseras endast på de lovande förhållandena för att utvärdera diagnosnoggrannheten på statistisk basis.