Intraoperatiivisen koetinpohjaisen konfokaalisen laserendomikroskopian arviointi ruoansulatuskanavan ja endokriinisessä kirurgiassa: pilottitutkimus (Pilot pCLE)

Intraoperatiivinen histologinen tutkimus on olennainen työkalu syöpäkirurgiassa (leikkauksen laajuus, resektiomarginaalit, vartioimusolmuke) ja välttämätön muissa olosuhteissa, kuten uusintaleikkauksessa tai endokriinisissä leikkauksissa. Perinteisen pakastetekniikan käyttö johtaa käyttöajan pidentymiseen noin 40 minuuttia.

Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy (pCLE) on uusi kuvantamistekniikka, joka mahdollistaa reaaliaikaisen mikroskoopin resoluution kuvantamisen. Tarkemmin sanottuna fluoresoivan varjoaineen suonensisäisen injektion jälkeen - tässä tutkimuksessa käytetään fluoreseiinia, pCLE-järjestelmä tarjoaa videosekvenssejä kudoksesta käyttämällä minianturiin integroitua konfokaalimikroskooppia ja pienitehoista laseria valolähteenä (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Pariisi, Ranska).

pCLE:tä käytetään tällä hetkellä endoskopiassa pääasiassa Barrettin ruokatorven, kolorektaalisten polyyppien sekä sappi- ja haimatiehyiden ahtaumien seurantaan, mutta myös urologiassa. pCLE:tä ei ole koskaan testattu avoimessa tai videoavusteisessa leikkauksessa. Steriloitavia antureita on olemassa ja ne on sertifioitu endoskoopin kautta käytettäväksi Ranskassa (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Pariisi, Ranska). Koetinta (CelioFlex UHDTM) kehitetään parhaillaan käytettäväksi laparoskooppisessa kirurgiassa.

Tämän pilottitutkimuksen tavoitteena on arvioida pCLE:tä kirurgisissa olosuhteissa. Jokainen anatominen rakenne vastaa tiettyä kudosarkkitehtuuria, joka nykyään tunnetaan tavallisella histologisella tutkimuksella. Perinteinen histologia merkitsee kudosarkkitehtuurin muuttamista, verenkierron ablaatiota, näytteenottoa ja näytteiden teknistä käsittelyä (kiinnitys, leikkaus, värjäys). pCLE mahdollistaa tämän prosessin ohituksen ja mahdollistaa kuvien saamisen mikroskooppisesta rakenteesta in vivo ilman soluvaurioita ja ilman veren- ja imusolmukkeiden kiertohäiriöitä. Saadut videojaksot heijastavat mikroskooppista arkkitehtuuria sellaisessa muodossa, jota ei ole tähän mennessä kartoitettu eikä hyödynnetty syvien elimien kannalta. Tämän tekniikan potentiaali osoitettiin intraabdominaalisissa elimissä vain eläinmallissa, ja tulokset olivat erittäin rohkaisevia, koska pCLE:n herkkyys ja spesifisyys olivat parempia kuin tavalliset histologiset tutkimukset.

Ensisijainen tavoite on kuvata normaalien ja patologisten kudosten histologista renderöintiä pCLE:n avulla. Myös reaaliaikaisen diagnoosin toteutettavuus arvioidaan. Kaikki kirurgiset tilat, jotka yleensä edellyttävät jäädytettyä leikkausta, tutkitaan. Mukana on yhteensä 30 potilasta, joilla on erilaisia ​​kilpirauhasen/lisäkilpirauhasen, mahalaukun, ruokatorven, haiman, lisämunuaisen, paksu-/ohutsuolen, maksan patologioita.

Asennus ja kirurginen avaaminen suoritetaan standardiprotokollien mukaisesti. Varjoaine, fluoreseiini, ruiskutetaan suonensisäisesti kudosten visualisoimiseksi pCLE:llä. Leikkauksen aikana kirurgi suorittaa pCLE-tutkimuksen saadakseen ja tallentaakseen videojaksoja in situ -rakenteista. Pakastetut leikkeet saadaan samoista näytteistä ja ne ohjaavat edelleen kirurgista päätöksentekoa.

Diagnostiset kriteerit määrittelee kirurgi-patologitiimi, ja ne validoidaan edelleen sekvenssien retrospektiivisellä analyysillä verrattuna tavanomaisiin histologisiin objektilasiin. Tietoja käytetään optisten biopsiakuvien kuvapankin luomiseen.

Tutkimus antaa mahdollisuuden osoittaa ne kirurgiset olosuhteet, joissa pCLE on tehokkain ja luotettavin ja voisi lopulta korvata jäädytetyn leikkaustekniikan.

Toinen tutkimus vertailevissa prospektiivisissä olosuhteissa voitaisiin edelleen keskittyä vain lupaaviin olosuhteisiin diagnoosin tarkkuuden arvioimiseksi tilastollisesti.