Posouzení intraoperační konfokální laserové endomikroskopie založené na sondě v trávicí a endokrinní chirurgii: pilotní studie (Pilot pCLE)

Intraoperační histologické vyšetření je základním nástrojem pro nádorovou chirurgii (rozsah operace, resekční okraje, sentinelové lymfatické uzliny) a nezbytné za jiných okolností, jako je redooperace nebo endokrinní chirurgie. Použití konvenční techniky zmrazených řezů má za následek prodloužení provozní doby asi o 40 minut.

Konfokální laserová endomikroskopie (pCLE) založená na sondě je nová zobrazovací technika, která umožňuje zobrazování v reálném čase v mikroskopickém rozlišení. Konkrétně po intravenózní injekci fluorescenční kontrastní látky – v této studii bude použit fluorescein, systém pCLE poskytuje videosekvence tkáně pomocí konfokálního mikroskopu integrovaného v minisondě a nízkovýkonného laseru jako zdroje osvětlení (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Paříž, Francie).

V současnosti se pCLE využívá v endoskopii, zejména při sledování Barrettova jícnu, kolorektálních polypů a striktur žlučových a pankreatických vývodů, ale také v urologii. pCLE nebyl nikdy testován v podmínkách otevřené chirurgie nebo video-asistované chirurgie. Sterilizovatelné sondy existují a jsou certifikovány pro použití prostřednictvím endoskopu ve Francii (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Paříž, Francie). V současné době se vyvíjí sonda (CelioFlex UHDTM) pro použití v prostředí laparoskopické chirurgie.

Tato pilotní studie si klade za cíl vyhodnotit pCLE v chirurgickém prostředí. Každá anatomická struktura odpovídá specifické architektuře tkáně, která je dnes známa standardním histologickým vyšetřením. Konvenční histologie zahrnuje změnu tkáňové architektury s ablací krevního zásobení, odběrem vzorků a technickou úpravou vzorků (fixace, řezání, barvení). pCLE umožňuje tento proces obejít a umožňuje získat snímky mikroskopické struktury in vivo, bez poškození buněk a bez přerušení krevního a lymfatického oběhu. Získané videosekvence odrážejí mikroskopickou architekturu v podobě, která je dodnes nemapovaná ani využívaná pro hluboké orgány. Potenciál této techniky byl prokázán v intraabdominálních orgánech pouze na zvířecím modelu s velmi povzbudivými výsledky, protože senzitivita a specificita pCLE byla lepší než standardní histologické vyšetření.

Primárním cílem je zobrazení histologického zobrazení normálních a patologických tkání prostřednictvím pCLE. Posouzena bude také proveditelnost diagnostiky v reálném čase. Budou vyšetřeny všechny chirurgické stavy, které obvykle vyžadují zmrazený řez. Celkem bude zařazeno 30 pacientů s různou patologií štítné žlázy / příštítných tělísek, žaludku, jícnu, slinivky břišní, nadledvin, tlustého střeva / tenkého střeva, jater.

Instalace a chirurgické otevření bude provedeno podle standardních protokolů. Kontrastní látka, fluorescein, bude injikována intravenózně, aby se umožnila vizualizace tkáně pomocí pCLE. Během operace chirurg provede vyšetření pCLE, aby získal a nahrál video sekvence struktur in situ. Zmrazené řezy budou získány na stejných vzorcích a budou dále vodítkem pro chirurgické rozhodování.

Diagnostická kritéria budou definována týmem chirurg-patolog a dále validována retrospektivní analýzou sekvencí ve srovnání s konvenčními histologickými preparáty. Data budou použita k vytvoření obrazové banky referenčních obrazů z optické biopsie.

Studie umožní poukázat na chirurgické stavy, ve kterých je pCLE nejúčinnější a nejspolehlivější a mohla by případně nahradit techniku ​​zmrazených řezů.

Druhá studie, v komparativním prospektivním nastavení, by se mohla dále zaměřit pouze na slibné podmínky, aby bylo možné vyhodnotit přesnost diagnózy na statistickém základě.