Avaliação da endomicroscopia a laser confocal baseada em sonda intraoperatória em cirurgia digestiva e endócrina: um estudo piloto (Pilot pCLE)

O exame histológico intraoperatório é uma ferramenta fundamental para a cirurgia oncológica (extensão da cirurgia, margens de ressecção, linfonodo sentinela) e necessário em outras circunstâncias, como refazer cirurgia ou cirurgia endócrina. O uso da técnica de seção congelada convencional resulta no prolongamento do tempo de operação de cerca de 40 minutos.

A endomicroscopia a laser confocal baseada em sonda (pCLE) é uma nova técnica de imagem que permite imagens em tempo real com resolução de microscópio. Especificamente, após a injeção intravenosa de um contraste fluorescente - neste estudo será utilizada a fluoresceína, o sistema pCLE fornece sequências de vídeo do tecido, usando um microscópio confocal integrado em uma miniprobe e um laser de baixa potência como fonte de iluminação (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Paris, França).

O pCLE é atualmente usado em endoscopia, principalmente para o acompanhamento do esôfago de Barrett, pólipos colorretais e estenoses dos ductos biliares e pancreáticos, mas também em urologia. O pCLE nunca foi testado em ambientes de cirurgia aberta ou videoassistida. Sondas esterilizáveis ​​existem e são certificadas para uso via endoscópio na França (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Paris, França). Uma sonda (CelioFlex UHDTM) está sendo desenvolvida para uso em cirurgia laparoscópica.

Este estudo piloto tem como objetivo avaliar pCLE em ambiente cirúrgico. Cada estrutura anatômica corresponde a uma arquitetura tecidual específica, hoje conhecida por exame histológico padrão. A histologia convencional implica alteração da arquitetura tecidual, com ablação do suprimento sanguíneo, coleta e tratamento técnico das amostras (fixação, corte, coloração). O pCLE permite contornar este processo e permite a obtenção de imagens da estrutura microscópica in vivo, sem danos celulares e sem interrupção da circulação sanguínea e linfática. As sequências de vídeo obtidas refletem a arquitetura microscópica, de uma forma que até hoje não foi mapeada nem explorada para órgãos profundos. O potencial desta técnica foi demonstrado em órgãos intra-abdominais apenas no modelo animal, com resultados muito animadores, pois a sensibilidade e especificidade do pCLE foram superiores ao exame histológico padrão.

O objetivo primário é a representação da renderização histológica de tecidos normais e patológicos através do pCLE. A viabilidade do diagnóstico em tempo real também será avaliada. Todas as condições cirúrgicas que geralmente necessitam de seção congelada serão investigadas. Serão incluídos um total de 30 pacientes, com diversas patologias da tireoide/paratireoide, estômago, esôfago, pâncreas, adrenal, cólon/intestino delgado, fígado.

A instalação e abertura cirúrgica serão realizadas de acordo com os protocolos padrão. Um agente de contraste, fluoresceína, será injetado por via intravenosa para permitir a visualização do tecido com o pCLE. Durante a cirurgia, o cirurgião realizará o exame pCLE, para obter e gravar sequências de vídeo de estruturas in situ. Seções congeladas serão obtidas nas mesmas amostras e orientarão ainda mais a tomada de decisão cirúrgica.

Os critérios diagnósticos serão definidos por uma equipe cirurgião-patologista e posteriormente validados por análise retrospectiva das sequências em comparação com lâminas histológicas convencionais. Os dados serão usados ​​para criar um banco de imagens de referência de imagens de biópsia óptica.

O estudo permitirá apontar as condições cirúrgicas em que o pCLE é mais eficaz e confiável, podendo eventualmente substituir a técnica de congelação.

Um segundo estudo, em configurações prospectivas comparativas, poderia ser focado apenas nas condições promissoras para avaliar a precisão do diagnóstico com base estatística.