Beoordeling van intra-operatieve sonde-gebaseerde confocale laserendomicroscopie bij spijsverterings- en endocriene chirurgie: een pilootstudie (Pilot pCLE)

Intraoperatief histologisch onderzoek is een fundamenteel hulpmiddel bij kankerchirurgie (omvang van de operatie, resectiemarges, schildwachtklier) en noodzakelijk in andere omstandigheden, zoals heroperaties of endocriene chirurgie. Het gebruik van conventionele vriescoupe-techniek resulteert in een verlenging van de bedrijfstijd van ongeveer 40 minuten.

Op sondes gebaseerde confocale laserendomicroscopie (pCLE) is een nieuwe beeldvormingstechniek die real-time beeldvorming met microscoopresolutie mogelijk maakt. Specifiek, na intraveneuze injectie van een fluorescerend contrastmiddel - in deze studie zal fluoresceïne worden gebruikt, levert het pCLE-systeem videosequenties van het weefsel, met behulp van een confocale microscoop geïntegreerd in een minisonde en een laser met laag vermogen als de verlichtingsbron (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Parijs, Frankrijk).

De pCLE wordt momenteel gebruikt in endoscopie, voornamelijk voor de follow-up van Barrett-slokdarm, colorectale poliepen en vernauwingen van de gal- en pancreaskanalen, maar ook in de urologie. De pCLE is nooit getest in open of video-geassisteerde chirurgie. Er bestaan ​​steriliseerbare sondes die gecertificeerd zijn voor gebruik via een endoscoop in Frankrijk (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Parijs, Frankrijk). Een sonde (CelioFlex UHDTM) wordt momenteel ontwikkeld voor gebruik bij laparoscopische chirurgie.

Deze pilootstudie heeft tot doel pCLE te evalueren in een chirurgische setting. Elke anatomische structuur komt overeen met een specifieke weefselarchitectuur, die tegenwoordig bekend is via standaard histologisch onderzoek. Conventionele histologie impliceert wijziging van de weefselarchitectuur, met ablatie van de bloedtoevoer, bemonstering en technische behandeling van de monsters (fixatie, snijden, kleuren). De pCLE maakt het mogelijk om dit proces te omzeilen en maakt het mogelijk om in vivo beelden van de microscopische structuur te verkrijgen, zonder celbeschadiging en zonder onderbreking van de bloed- en lymfecirculatie. De verkregen videosequenties weerspiegelen de microscopische architectuur, in een vorm die tot op heden niet in kaart is gebracht en ook niet is geëxploiteerd voor diepe organen. Het potentieel van deze techniek werd alleen in het diermodel aangetoond in intra-abdominale organen, met zeer bemoedigende resultaten aangezien de gevoeligheid en specificiteit van pCLE superieur waren aan standaard histologisch onderzoek.

Het primaire doel is de afbeelding van histologische weergave van normale en pathologische weefsels door middel van pCLE. De haalbaarheid van real-time diagnose zal ook worden beoordeeld. Alle chirurgische aandoeningen die gewoonlijk een vriescoupe vereisen, zullen worden onderzocht. In totaal zullen 30 patiënten, met verschillende pathologieën van de schildklier / bijschildklier, maag, slokdarm, alvleesklier, bijnier, dikke darm / dunne darm, lever worden opgenomen.

De installatie en chirurgische opening worden uitgevoerd volgens standaardprotocollen. Een contrastmiddel, fluoresceïne, zal intraveneus worden geïnjecteerd om weefselvisualisatie met de pCLE mogelijk te maken. Tijdens de operatie voert de chirurg het pCLE-onderzoek uit om videosequenties van in situ structuren te verkrijgen en op te nemen. Bevroren secties zullen op dezelfde monsters worden verkregen en zullen de chirurgische besluitvorming verder begeleiden.

Diagnostische criteria zullen worden gedefinieerd door een team van chirurg en patholoog en verder worden gevalideerd door retrospectieve analyse van de sequenties in vergelijking met conventionele histologie-objectglaasjes. De gegevens zullen worden gebruikt om een ​​beeldbank van referentiebeelden van optische biopsie te creëren.

De studie zal het mogelijk maken om de chirurgische omstandigheden aan te wijzen waarin pCLE het meest effectief en betrouwbaar is en uiteindelijk de vriescoupe-techniek zou kunnen vervangen.

Een tweede studie, in vergelijkende prospectieve settings, zou verder alleen gericht kunnen zijn op de veelbelovende omstandigheden om de nauwkeurigheid van de diagnose op statistische basis te evalueren.