Valutazione dell'endomicroscopia laser confocale basata su sonda intraoperatoria nella chirurgia digestiva ed endocrina: uno studio pilota (Pilot pCLE)

L'esame istologico intraoperatorio è uno strumento fondamentale per la chirurgia oncologica (estensione dell'intervento, margini di resezione, linfonodo sentinella) e necessario in altre circostanze come il redo surgery o la chirurgia endocrina. Utilizzando la tecnica convenzionale della sezione congelata si ottiene un prolungamento del tempo operativo di circa 40 minuti.

L'endomicroscopia laser confocale basata su sonda (pCLE) è una nuova tecnica di imaging che consente l'imaging in tempo reale con risoluzione al microscopio. In particolare, dopo l'iniezione endovenosa di un agente di contrasto fluorescente - in questo studio verrà utilizzata la fluoresceina, il sistema pCLE fornisce sequenze video del tessuto, utilizzando un microscopio confocale integrato in una minisonda e un laser a bassa potenza come sorgente di illuminazione (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Parigi, Francia).

Il pCLE è attualmente utilizzato in endoscopia, principalmente per il follow-up dell'esofago di Barrett, dei polipi colorettali e delle stenosi dei dotti biliari e pancreatici, ma anche in urologia. Il pCLE non è mai stato testato in contesti di chirurgia aperta o video-assistita. Le sonde sterilizzabili esistono e sono certificate per l'uso tramite un endoscopio in Francia (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Parigi, Francia). Una sonda (CelioFlex UHDTM) è attualmente in fase di sviluppo per l'uso in ambito chirurgico laparoscopico.

Questo studio pilota mira a valutare pCLE in ambito chirurgico. Ad ogni struttura anatomica corrisponde una specifica architettura tissutale, oggi nota attraverso l'esame istologico standard. L'istologia convenzionale implica l'alterazione dell'architettura del tessuto, con ablazione dell'afflusso di sangue, campionamento e trattamento tecnico dei campioni (fissazione, taglio, colorazione). Il pCLE permette di bypassare questo processo e permette di ottenere immagini della struttura microscopica in vivo, senza danno cellulare e senza interruzione della circolazione sanguigna e linfatica. Le sequenze video ottenute riflettono l'architettura microscopica, in una forma che ad oggi non è né mappata né sfruttata per gli organi profondi. Le potenzialità di questa tecnica sono state dimostrate negli organi intraddominali solo nel modello animale, con risultati molto incoraggianti in quanto la sensibilità e la specificità della pCLE sono risultate superiori all'esame istologico standard.

L'obiettivo primario è la rappresentazione del rendering istologico di tessuti normali e patologici attraverso pCLE. Sarà inoltre valutata la fattibilità della diagnosi in tempo reale. Verranno esaminate tutte le condizioni chirurgiche che di solito richiedono sezioni congelate. Saranno inclusi un totale di 30 pazienti, con varie patologie della tiroide/paratiroidi, dello stomaco, dell'esofago, del pancreas, del surrene, del colon/intestino tenue, del fegato.

L'installazione e l'apertura chirurgica saranno eseguite secondo i protocolli standard. Un agente di contrasto, la fluoresceina, verrà iniettato per via endovenosa per consentire la visualizzazione del tessuto con il pCLE. Durante l'intervento, il chirurgo eseguirà l'esame pCLE, per ottenere e registrare sequenze video delle strutture in situ. Le sezioni congelate saranno ottenute sugli stessi campioni e guideranno ulteriormente il processo decisionale chirurgico.

I criteri diagnostici saranno definiti da un team chirurgo-patologo e ulteriormente convalidati dall'analisi retrospettiva delle sequenze rispetto ai vetrini istologici convenzionali. I dati verranno utilizzati per creare una banca di immagini di immagini di biopsia ottica di riferimento.

Lo studio consentirà di evidenziare le condizioni chirurgiche in cui pCLE è la più efficace ed affidabile e potrebbe eventualmente sostituire la tecnica del frozen section.

Un secondo studio, in contesti prospettici comparativi, potrebbe ulteriormente concentrarsi solo sulle condizioni promettenti al fine di valutare l'accuratezza della diagnosi su base statistica.