Vurdering av intraoperativ probebasert konfokal laserendomomikroskopi i fordøyelses- og endokrinkirurgi: en pilotstudie (Pilot pCLE)

Intraoperativ histologisk undersøkelse er et grunnleggende verktøy for kreftkirurgi (omfang av kirurgi, reseksjonsmarginer, vaktpostlymfeknute) og nødvendig under andre omstendigheter som omoperasjon eller endokrin kirurgi. Bruk av konvensjonell frosne seksjonsteknikk resulterer i en forlengelse av driftstiden på ca. 40 minutter.

Probebasert konfokal laserendomikroskopi (pCLE) er en ny avbildningsteknikk som muliggjør sanntidsavbildning med mikroskopoppløsning. Spesifikt, etter intravenøs injeksjon av et fluorescerende kontrastmiddel - i denne studien vil fluorescein bli brukt, pCLE-systemet gir videosekvenser av vevet, ved å bruke et konfokalt mikroskop integrert i en miniprobe og en laveffektlaser som belysningskilde (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Paris, Frankrike).

pCLE brukes i dag i endoskopi, hovedsakelig til oppfølging av Barretts øsofagus, kolorektale polypper og strikturer i galle- og bukspyttkjertelgangene, men også i urologi. pCLE har aldri blitt testet i åpne eller videoassisterte operasjonsinnstillinger. Steriliserbare prober finnes og er sertifisert for bruk via et endoskop i Frankrike (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Paris, Frankrike). En sonde (CelioFlex UHDTM) utvikles for tiden for bruk i laparoskopisk kirurgi.

Denne pilotstudien tar sikte på å evaluere pCLE i kirurgiske omgivelser. Hver anatomisk struktur tilsvarer en spesifikk vevsarkitektur, som i dag er kjent gjennom standard histologisk undersøkelse. Konvensjonell histologi innebærer endring av vevsarkitekturen, med ablasjon av blodtilførsel, prøvetaking og teknisk behandling av prøvene (fiksering, kutting, farging). pCLE gjør det mulig å omgå denne prosessen og gjør det mulig å få bilder av den mikroskopiske strukturen in vivo, uten celleskade og uten avbrudd i blod- og lymfesirkulasjonen. De oppnådde videosekvensene gjenspeiler den mikroskopiske arkitekturen, i en form som til dags dato verken er kartlagt eller utnyttet for dype organer. Potensialet til denne teknikken ble demonstrert i intraabdominale organer bare i dyremodellen, med svært oppmuntrende resultater da sensitiviteten og spesifisiteten til pCLE var overlegen standard histologisk undersøkelse.

Hovedmålet er skildringen av histologisk gjengivelse av normalt og patologisk vev gjennom pCLE. Mulighet for sanntidsdiagnose vil også bli vurdert. Alle kirurgiske tilstander som vanligvis krever frossen snitt vil bli undersøkt. Totalt 30 pasienter, med ulike patologier i skjoldbruskkjertelen/biskjoldbruskkjertelen, magesekken, spiserøret, bukspyttkjertelen, binyrene, tykktarmen/tynntarmen, leveren vil bli inkludert.

Installasjonen og kirurgisk åpning vil bli utført i henhold til standard protokoller. Et kontrastmiddel, fluorescein, vil bli injisert intravenøst ​​for å tillate vevsvisualisering med pCLE. Under operasjonen vil kirurgen utføre pCLE-undersøkelsen for å innhente og ta opp videosekvenser av in situ strukturer. Frosne seksjoner vil bli innhentet på de samme prøvene og vil videre veilede den kirurgiske beslutningen.

Diagnostiske kriterier vil bli definert av et kirurg-patologteam og videre validert ved retrospektiv analyse av sekvensene sammenlignet med konvensjonelle histologiske lysbilder. Dataene vil bli brukt til å lage en bildebank med referansebilder til optiske biopsier.

Studien vil gjøre det mulig å peke ut de kirurgiske tilstandene der pCLE er den mest effektive og pålitelige og kan til slutt erstatte frossensnittteknikken.

En andre studie, i komparative prospektive innstillinger, kunne videre fokuseres bare på de lovende forholdene for å evaluere nøyaktigheten av diagnosen på statistisk grunnlag.