Bewertung der intraoperativen sondenbasierten konfokalen Laserendomikroskopie in der Verdauungs- und endokrinen Chirurgie: eine Pilotstudie (Pilot pCLE)

Die intraoperative histologische Untersuchung ist ein grundlegendes Instrument für die Krebschirurgie (Ausmaß der Operation, Resektionsränder, Wächterlymphknoten) und auch unter anderen Umständen wie Wiederholungsoperationen oder endokrinen Operationen erforderlich. Die Verwendung der herkömmlichen Gefrierschnitttechnik führt zu einer Verlängerung der Operationszeit um etwa 40 Minuten.

Die sondenbasierte konfokale Laserendomikroskopie (pCLE) ist eine neue Bildgebungstechnik, die eine Bildgebung in Mikroskopauflösung in Echtzeit ermöglicht. Insbesondere nach intravenöser Injektion eines fluoreszierenden Kontrastmittels – in dieser Studie wird Fluorescein verwendet – liefert das pCLE-System Videosequenzen des Gewebes unter Verwendung eines in eine Minisonde integrierten konfokalen Mikroskops und eines Lasers mit geringer Leistung als Beleuchtungsquelle (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Paris, Frankreich).

Der pCLE wird derzeit in der Endoskopie, vor allem zur Nachsorge von Barrett-Ösophagus, kolorektalen Polypen und Strikturen der Gallen- und Pankreasgänge, aber auch in der Urologie eingesetzt. Der pCLE wurde noch nie in der offenen oder videoassistierten Chirurgie getestet. Es gibt sterilisierbare Sonden, die in Frankreich für die Verwendung über ein Endoskop zertifiziert sind (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Paris, Frankreich). Derzeit wird eine Sonde (CelioFlex UHDTM) für den Einsatz in der laparoskopischen Chirurgie entwickelt.

Diese Pilotstudie zielt darauf ab, pCLE im chirurgischen Umfeld zu bewerten. Jede anatomische Struktur entspricht einer spezifischen Gewebearchitektur, die heute durch standardmäßige histologische Untersuchungen bekannt ist. Die konventionelle Histologie beinhaltet eine Veränderung der Gewebearchitektur mit Aufhebung der Blutversorgung, Probenahme und technischer Behandlung der Proben (Fixierung, Schneiden, Färben). Das pCLE ermöglicht es, diesen Prozess zu umgehen und Bilder der mikroskopischen Struktur in vivo zu erhalten, ohne Zellschäden und ohne Unterbrechung der Blut- und Lymphzirkulation. Die erhaltenen Videosequenzen spiegeln die mikroskopische Architektur in einer Form wider, die bisher weder kartiert noch für tiefe Organe genutzt wird. Das Potenzial dieser Technik wurde bei intraabdominalen Organen nur im Tiermodell gezeigt, mit sehr ermutigenden Ergebnissen, da die Empfindlichkeit und Spezifität von pCLE der standardmäßigen histologischen Untersuchung überlegen waren.

Das Hauptziel ist die Darstellung der histologischen Darstellung normaler und pathologischer Gewebe durch pCLE. Auch die Machbarkeit einer Echtzeitdiagnose wird geprüft. Alle chirurgischen Bedingungen, die normalerweise einen Gefrierschnitt erfordern, werden untersucht. Insgesamt werden 30 Patienten mit verschiedenen Erkrankungen der Schilddrüse/Nebenschilddrüse, des Magens, der Speiseröhre, der Bauchspeicheldrüse, der Nebenniere, des Dickdarms/Dünndarms und der Leber eingeschlossen.

Die Installation und die chirurgische Öffnung werden gemäß Standardprotokollen durchgeführt. Ein Kontrastmittel, Fluorescein, wird intravenös injiziert, um eine Gewebevisualisierung mit dem pCLE zu ermöglichen. Während der Operation führt der Chirurg die pCLE-Untersuchung durch, um Videosequenzen von Strukturen vor Ort zu erhalten und aufzuzeichnen. Von den gleichen Proben werden Gefrierschnitte angefertigt, die als Orientierungshilfe für die chirurgische Entscheidungsfindung dienen.

Die diagnostischen Kriterien werden von einem Team aus Chirurgen und Pathologen definiert und durch eine retrospektive Analyse der Sequenzen im Vergleich zu herkömmlichen histologischen Schnitten weiter validiert. Die Daten werden verwendet, um eine Bilddatenbank mit optischen Referenzbiopsiebildern zu erstellen.

Die Studie wird es ermöglichen, die chirurgischen Bedingungen aufzuzeigen, bei denen pCLE am effektivsten und zuverlässigsten ist und möglicherweise die Gefrierschnitttechnik ersetzen könnte.

Eine zweite Studie in vergleichenden prospektiven Settings könnte sich außerdem nur auf die vielversprechenden Bedingungen konzentrieren, um die Diagnosegenauigkeit auf statistischer Basis zu bewerten.