Оценка интраоперационной конфокальной лазерной эндомикроскопии с использованием зонда в хирургии пищеварительной и эндокринной систем: пилотное исследование (Pilot pCLE)

Интраоперационное гистологическое исследование является основным инструментом хирургии рака (объем операции, края резекции, сигнальный лимфатический узел) и необходимо в других обстоятельствах, таких как повторная хирургия или эндокринная хирургия. Использование традиционной техники замороженных срезов приводит к увеличению времени операции примерно на 40 минут.

Конфокальная лазерная эндомикроскопия на основе зонда (pCLE) — это новый метод визуализации, позволяющий получать изображения в режиме реального времени с микроскопическим разрешением. В частности, после внутривенной инъекции флуоресцентного контрастного вещества - в этом исследовании будет использоваться флуоресцеин, система pCLE обеспечивает видеопоследовательности ткани с использованием конфокального микроскопа, встроенного в минизонд, и маломощного лазера в качестве источника освещения (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Париж, Франция).

В настоящее время pCLE используется в эндоскопии, в основном для наблюдения за пищеводом Барретта, колоректальными полипами и стриктурами желчных протоков и протоков поджелудочной железы, а также в урологии. pCLE никогда не тестировался в условиях открытой или видеоассистированной хирургии. Существуют стерилизуемые зонды, которые сертифицированы для использования с эндоскопом во Франции (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Париж, Франция). Зонд (CelioFlex UHDTM) в настоящее время разрабатывается для использования в условиях лапароскопической хирургии.

Это пилотное исследование направлено на оценку pCLE в хирургических условиях. Каждая анатомическая структура соответствует определенной архитектуре ткани, которая сегодня известна благодаря стандартному гистологическому исследованию. Традиционная гистология подразумевает изменение архитектуры ткани с нарушением кровоснабжения, забор и техническую обработку образцов (фиксация, вырезание, окрашивание). pCLE позволяет обойти этот процесс и позволяет получать изображения микроскопической структуры in vivo, без повреждения клеток и без нарушения кровообращения и лимфатической циркуляции. Полученные видеоряды отражают микроскопическую архитектуру в форме, которая на сегодняшний день не картирована и не используется для глубоких органов. Потенциал этого метода был продемонстрирован в интраабдоминальных органах только на животной модели с очень обнадеживающими результатами, поскольку чувствительность и специфичность pCLE превосходила стандартное гистологическое исследование.

Основной целью является изображение гистологического рендеринга нормальных и патологических тканей с помощью pCLE. Также будет оцениваться возможность диагностики в режиме реального времени. Будут исследованы все хирургические состояния, обычно требующие замороженных срезов. Всего будет включено 30 пациентов с различной патологией щитовидной/паращитовидной железы, желудка, пищевода, поджелудочной железы, надпочечников, толстой/тонкой кишки, печени.

Установка и хирургическое открытие будут выполняться в соответствии со стандартными протоколами. Контрастное вещество, флуоресцеин, будет введено внутривенно, чтобы обеспечить визуализацию тканей с помощью pCLE. Во время операции хирург проведет исследование pCLE, чтобы получить и записать видеопоследовательности структур in situ. На тех же образцах будут получены замороженные срезы, которые в дальнейшем помогут принять решение о хирургическом вмешательстве.

Диагностические критерии будут определены командой хирурга и патологоанатома и дополнительно подтверждены ретроспективным анализом последовательностей по сравнению с обычными гистологическими препаратами. Данные будут использованы для создания банка эталонных изображений оптической биопсии.

Исследование позволит указать хирургические состояния, при которых пКЛЭ является наиболее эффективной и надежной и в конечном итоге может заменить методику замороженных срезов.

Второе исследование, в сравнительных проспективных условиях, может быть дополнительно сосредоточено только на многообещающих состояниях, чтобы оценить точность диагноза на статистической основе.