Vurdering af intraoperativ probe-baseret konfokal laserendomomikroskopi i fordøjelses- og endokrinkirurgi: en pilotundersøgelse (Pilot pCLE)

Intraoperativ histologisk undersøgelse er et grundlæggende værktøj til kræftkirurgi (omfang af operation, resektionsmarginer, vagtpostlymfeknude) og nødvendig under andre omstændigheder som genoperation eller endokrin kirurgi. Anvendelse af konventionel frosne sektionsteknik resulterer i en forlængelse af driftstiden på ca. 40 minutter.

Probe-baseret Confocal Laser Endomicroscopy (pCLE) er en ny billedbehandlingsteknik, som muliggør billeddannelse i realtid med mikroskopopløsning. Specifikt, efter intravenøs injektion af et fluorescerende kontrastmiddel - i denne undersøgelse vil fluorescein blive brugt, pCLE-systemet giver videosekvenser af vævet ved hjælp af et konfokalt mikroskop integreret i en miniprobe og en laveffektlaser som belysningskilde (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Paris, Frankrig).

pCLE bruges i dag til endoskopi, hovedsageligt til opfølgning af Barretts spiserør, kolorektale polypper og forsnævringer i galde- og bugspytkirtelgangene, men også i urologi. pCLE er aldrig blevet testet i åbne eller videoassisteret operationsindstillinger. Steriliserbare prober findes og er certificeret til brug via et endoskop i Frankrig (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Paris, Frankrig). En sonde (CelioFlex UHDTM) er i øjeblikket ved at blive udviklet til brug i laparoskopisk kirurgi.

Denne pilotundersøgelse har til formål at evaluere pCLE i kirurgiske omgivelser. Hver anatomisk struktur svarer til en bestemt vævsarkitektur, som i dag er kendt gennem standard histologisk undersøgelse. Konventionel histologi indebærer ændring af vævsarkitekturen med ablation af blodforsyning, prøveudtagning og teknisk behandling af prøverne (fiksering, skæring, farvning). pCLE gør det muligt at omgå denne proces og giver mulighed for at opnå billeder af den mikroskopiske struktur in vivo, uden celleskade og uden afbrydelse af blod- og lymfekredsløbet. De opnåede videosekvenser afspejler den mikroskopiske arkitektur i en form, der til dato hverken er kortlagt eller udnyttet til dybe organer. Potentialet af denne teknik blev kun demonstreret i intraabdominale organer i dyremodellen, med meget opmuntrende resultater, da sensitiviteten og specificiteten af ​​pCLE var overlegen i forhold til standard histologisk undersøgelse.

Det primære formål er skildringen af ​​histologisk gengivelse af normalt og patologisk væv gennem pCLE. Gennemførligheden af ​​realtidsdiagnose vil også blive vurderet. Alle kirurgiske tilstande, der normalt nødvendiggør frosset snit, vil blive undersøgt. I alt 30 patienter med forskellig patologi i skjoldbruskkirtlen/biskjoldbruskkirtlen, mave, spiserør, bugspytkirtel, binyre, tyktarm/tyndtarm, lever vil blive inkluderet.

Installationen og den kirurgiske åbning vil blive udført i henhold til standardprotokoller. Et kontrastmiddel, fluorescein, vil blive injiceret intravenøst ​​for at tillade vævsvisualisering med pCLE. Under operationen vil kirurgen udføre pCLE-undersøgelsen for at opnå og optage videosekvenser af in situ strukturer. Frosne snit vil blive opnået på de samme prøver og vil yderligere vejlede den kirurgiske beslutningstagning.

Diagnostiske kriterier vil blive defineret af et kirurg-patologhold og yderligere valideret ved retrospektiv analyse af sekvenserne i sammenligning med konventionelle histologiske objektglas. Dataene vil blive brugt til at skabe en billedbank af referenceoptiske biopsibilleder.

Undersøgelsen vil gøre det muligt at påpege de kirurgiske forhold, hvor pCLE er den mest effektive og pålidelige og i sidste ende kan erstatte den frosne sektionsteknik.

En anden undersøgelse, i sammenlignende prospektive indstillinger, kunne yderligere kun fokuseres på de lovende forhold for at evaluere diagnosens nøjagtighed på et statistisk grundlag.