Az intraoperatív szondán alapuló konfokális lézeres endomikroszkópia értékelése emésztő- és endokrin sebészetben: kísérleti tanulmány (Pilot pCLE)

Az intraoperatív szövettani vizsgálat a ráksebészeti beavatkozások alapvető eszköze (műtét mértéke, reszekciós határok, őrnyirokcsomó), és más körülmények között is szükséges, mint például a redo műtét vagy az endokrin műtét. A hagyományos fagyasztott metszettechnika alkalmazása körülbelül 40 perccel meghosszabbítja az üzemidőt.

A szondán alapuló konfokális lézeres endomikroszkópia (pCLE) egy új képalkotó technika, amely valós idejű, mikroszkópos felbontású képalkotást tesz lehetővé. Pontosabban, egy fluoreszcens kontrasztanyag intravénás befecskendezése után – ebben a vizsgálatban fluoreszceint használunk – a pCLE rendszer videó szekvenciákat biztosít a szövetről, egy miniszondába integrált konfokális mikroszkóp és egy kis teljesítményű lézer fényforrásként (Cellvizio®, Mauna Kea Technologies, Párizs, Franciaország).

A pCLE-t jelenleg endoszkópiában alkalmazzák, főként a Barrett-nyelőcső, a vastagbélpolipok, valamint az epe- és hasnyálmirigy utak szűkületeinek követésére, de az urológiában is. A pCLE-t soha nem tesztelték nyílt vagy video-asszisztált sebészeti beállításokban. Sterilizálható szondák léteznek, és endoszkóppal történő használatra tanúsítottak Franciaországban (UHD CystoFlexTM, AQ-FLEX 19TM Mauna Kea Technologies, Párizs, Franciaország). Egy szondát (CelioFlex UHDTM) jelenleg fejlesztenek laparoszkópos sebészeti környezetben.

Ennek a kísérleti tanulmánynak a célja a pCLE műtéti körülmények közötti értékelése. Minden anatómiai struktúra egy adott szöveti felépítésnek felel meg, amely ma már szokásos szövettani vizsgálattal ismert. A hagyományos szövettan a szöveti architektúra megváltoztatását jelenti, a vérellátás megszüntetésével, mintavétellel és a minták technikai kezelésével (rögzítés, vágás, festés). A pCLE lehetővé teszi ennek a folyamatnak a megkerülését, és lehetővé teszi a mikroszkopikus szerkezet képeinek készítését in vivo, sejtkárosodás és a vér- és nyirokkeringés megszakítása nélkül. A kapott videoszekvenciák a mikroszkopikus architektúrát tükrözik, olyan formában, amely a mai napig sem feltérképezve, sem mély szervek számára nem használt. Ennek a technikának a lehetőségeit intraabdominális szervekben csak állatmodellben mutatták ki, nagyon biztató eredményekkel, mivel a pCLE szenzitivitása és specificitása jobb volt, mint a standard szövettani vizsgálat.

Az elsődleges cél a normál és patológiás szövetek szövettani renderelésének ábrázolása a pCLE-n keresztül. Felmérik a valós idejű diagnózis megvalósíthatóságát is. Minden olyan műtéti állapotot megvizsgálnak, amely általában fagyasztott metszetet tesz szükségessé. Összesen 30 pajzsmirigy/mellékpajzsmirigy, gyomor, nyelőcső, hasnyálmirigy, mellékvese, vastagbél/vékonybél, máj különböző patológiás betegei vesznek részt.

A telepítés és a műtéti nyitás a szabványos protokollok szerint történik. A kontrasztanyagot, a fluoreszceint intravénásan injektálják, hogy lehetővé tegyék a szövetek pCLE-vel való megjelenítését. A műtét során a sebész elvégzi a pCLE vizsgálatot az in situ struktúrák videofelvételeinek beszerzéséhez és rögzítéséhez. A fagyasztott metszeteket ugyanazokon a mintákon nyerik, és ezek tovább vezetik a sebészeti döntéshozatalt.

A diagnosztikai kritériumokat egy sebész-patológus csapat határozza meg, és a szekvenciák retrospektív elemzésével tovább validálja a hagyományos szövettani tárgylemezekkel összehasonlítva. Az adatokat az optikai biopsziás referenciaképekből álló képbank létrehozására használják fel.

A tanulmány lehetővé teszi, hogy rámutasson azokra a műtéti körülményekre, amelyekben a pCLE a leghatékonyabb és legmegbízhatóbb, és végül felválthatja a fagyasztott metszet technikáját.

Egy másik, összehasonlító prospektív vizsgálatot tovább lehetne összpontosítani csak az ígéretes körülményekre a diagnózis pontosságának statisztikai alapon történő értékelése érdekében.