Mikrofluidik och transkriptomik hos patienter efter transplantation av solida organ

De två specifika syftena med forskningsstudien är följande: 1) Proof of concept med två delar. För det första är studieplanen att bevisa att T-celler som är mycket vanligt involverade i immunsvaret: CD2-, CD3-, CD4- och CD8-populationer kan fångas. Dessa celler kommer att fångas in, lyseras och deras mRNA-genomik kommer att kartläggas. Den andra delen av proof of concept kommer att innebära att CD2-, CD3-, CD4- och CD8-populationerna ex vivo exponeras för olika serumkoncentrationer av takrolimus - den viktigaste grundstenen i immunsuppressiv medicin vid transplantation av solida organ. Exponering av de tre celltyperna för de olika takrolimuskoncentrationerna kommer att visa att det finns tester som kan detektera mRNA-transkript som motsvarar under, optimala och överimmunsupprimerade tillstånd. Den kvantifierade IL2-produktionen av de tre celltyperna under de olika immunsuppressiva förhållandena kommer sedan att mätas. Med dessa två delar av det första specifika syftet med studien kommer en teknik som lätt och enkelt kan isolera cellpopulationerna av intresse från transplantationspatienterna och kan fånga hur dessa cellpopulationer svarar på immunsuppression vid olika koncentrationer att ha visats. 2) Det andra specifika syftet med forskningsstudien är att köra denna genomiska profilering på njurtransplanterade mottagare. För denna del av studien kommer det att finnas två kohorter. En kohort identifierad som den "blivande" gruppen och en kohort märkt som "händelsegruppen". För den blivande kohorten kommer blod att erhållas från patienterna vid specifika tidpunkter. Specifikt kommer blodprov att tas i pre-transplantationsmiljön när patienterna kommer till sjukhuset för sin transplantation, sedan på dag 0, 1, 2, 3 och 7 efter njurtransplantation (+/- 1 dag) och på dagen 14, 21 och 28 (+/-3 dagar). Blodprov kommer att tas igen efter månaderna 2, 3, 6, 9 och 12 (+/- 1 vecka). För den andra gruppen kommer blodprov att tas vid tidpunkten för "händelser", såsom avstötning, infektion, etc., och tillämpa samma serie av tester på deras blod. För denna grupp kommer blodtagningar att göras vid tidpunkten 0 (+/-1 dag), sedan vid en vecka (+/-2 dagar), och vid en, två och tre månader (+/-1 vecka) efter tidpunkten 0. Det kommer att tas fem blodprover per patient. För alla patienter kommer det att göras en jämförelse av den standardinsamlade kliniska informationen om patienten - transplantatfunktion, avstötning, infektion, immunsuppressionsnivåer - med resultaten av vår transkriptomi. Kulmen på projektet kommer att innebära att avslöja hur genomik av de specifika typerna av T-celler mer exakt kan återspegla en patients verkliga immunsuppressiva tillstånd genom att motsvara höga, optimala och låga immunsuppressiva kliniska fenotyper, och därmed tillåta transplantationskliniker att mer intelligent och exakt administrera immunsuppressiva medel. mediciner.

Denna studie kommer att involvera att ta blodprover på njurtransplanterade patienter vid den tidpunkt då de annars skulle få blod insamlat för vanlig klinisk vård. Samtycke kommer att erhållas för att testa deras blod, men patienterna kommer inte att drabbas av ytterligare smärta eller besvär av testet. I samordning med den utrustning och förnödenheter som för närvarande används av trauma- och intensivvårdsavdelningens forskning, kommer utredarna att organisera insamlingen och driften av labben på ett tidseffektivt och minimalt dyrt sätt