Mikrofluidik og transkriptomik hos patienter efter transplantation af solide organer

De to specifikke formål med forskningsstudiet er som følger: 1) Proof of concept med to dele. For det første er studieplanen at bevise, at T-celler, der er meget almindeligt involveret i immunresponset: CD2-, CD3-, CD4- og CD8-populationer kan fanges. Disse celler vil blive fanget, lyseret og deres mRNA-genomik vil blive kortlagt. Den anden del af proof of concept vil involvere at udsætte CD2-, CD3-, CD4- og CD8-populationerne ex vivo for forskellige serumkoncentrationer af tacrolimus - den vigtigste immunsuppressive medicin ved solid organtransplantation. Eksponering af de tre celletyper for de forskellige tacrolimus-koncentrationer vil demonstrere, at der er test, der kan påvise mRNA-transkripter svarende til under, optimale og over immunsupprimerede tilstande. Den kvantificerede IL2-produktion af de tre celletyper under de forskellige immunsuppressive betingelser vil derefter blive målt. Med disse 2 dele af det første specifikke formål med undersøgelsen vil en teknik, der let og let kan isolere cellepopulationerne af interesse fra transplantationspatienterne og kan fange, hvordan disse cellepopulationer reagerer på immunsuppression ved forskellige koncentrationer, være blevet demonstreret. 2) Det andet specifikke formål med forskningsstudiet er at køre denne genomiske profilering på nyretransplanterede modtagere. Til denne del af undersøgelsen vil der være to kohorter. En kohorte identificeret som den "potentielle" gruppe og en kohorte mærket som "begivenhedsgruppen". For den potentielle kohorte vil der blive indhentet blod fra patienterne på bestemte tidspunkter. Specifikt vil der blive taget blodprøver i præ-transplantationsindstillingen, når patienterne kommer til hospitalet for deres transplantation, derefter på post-nyretransplantation dag 0, 1, 2, 3 og 7 (+/- 1 dag) og på dag 14, 21 og 28 (+/-3 dage). Blodprøver tages igen efter måned 2, 3, 6, 9 og 12 (+/- 1 uge). For den anden gruppe vil der blive taget blodprøver på tidspunktet for "hændelser", såsom afvisning, infektion osv., og anvende den samme serie af test på deres blod. For denne gruppe vil der blive taget blodprøver på tidspunktet 0 (+/-1 dag), derefter på en uge (+/-2 dage), og på en, to og tre måneder (+/-1 uge) efter tidspunktet 0. Der vil blive udtaget fem blodprøver pr. patient. For alle patienter vil der være en sammenligning af den standard indsamlede kliniske information om patienten - graftfunktion, afstødning, infektion, immunsuppressionsniveauer - med resultaterne af vores transkriptomi. Kulminationen på projektet vil involvere at afsløre, hvordan genomik af de specifikke typer af T-celler mere præcist kan afspejle en patients sande immunsuppressive tilstand ved at svare til høje, optimale og lave immunsuppressive kliniske fænotyper og dermed give transplantationsklinikere mulighed for mere intelligent og præcist at administrere immunsuppressive. medicin.

Denne undersøgelse vil involvere indhentning af blodprøver på nyretransplanterede patienter på det tidspunkt, hvor de ellers ville have indsamlet blod til standard klinisk behandling. Der vil blive indhentet samtykke til testning på deres blod, men patienterne vil ikke lide yderligere smerter eller besvær ved testen. I koordinering med det udstyr og de forsyninger, der i øjeblikket bruges af traume- og intensivafdelingens forskning, vil efterforskerne organisere indsamlingen og driften af ​​laboratorierne på en tidseffektiv og minimalt dyr måde