Микрофлюидика и транскриптомика у пациентов после трансплантации солидных органов

Две конкретные цели исследования заключаются в следующем: 1) Доказательство концепции с двумя частями. Во-первых, план исследования состоит в том, чтобы доказать, что Т-клетки, которые очень часто участвуют в иммунном ответе: популяции CD2, CD3, CD4 и CD8, могут быть захвачены. Эти клетки будут захвачены, лизированы, и их геномика мРНК будет картирована. Вторая часть проверки концепции будет включать воздействие на популяции CD2, CD3, CD4 и CD8 ex vivo различных концентраций такролимуса в сыворотке — основного иммуносупрессивного препарата при трансплантации паренхиматозных органов. Воздействие на три типа клеток различных концентраций такролимуса продемонстрирует, что существуют тесты, которые могут обнаруживать транскрипты мРНК, соответствующие состояниям пониженной, оптимальной и чрезмерной иммуносупрессии. Затем будет измерена количественная продукция IL2 трех типов клеток в различных иммунодепрессивных условиях. С помощью этих двух частей первой конкретной цели исследования будет продемонстрирован метод, который может легко и просто изолировать интересующие клеточные популяции от пациентов с трансплантацией и может определить, как эти клеточные популяции реагируют на иммуносупрессию в различных концентрациях. 2) Второй конкретной целью исследования является проведение этого геномного профилирования реципиентов почечного трансплантата. Для этой части исследования будет две когорты. Когорта, обозначенная как «перспективная» группа, и когорта, обозначенная как группа «событие». Для предполагаемой когорты кровь будет получена от пациентов в определенные моменты времени. В частности, образцы крови будут получены до трансплантации, когда пациенты поступят в больницу для трансплантации, затем в день после трансплантации почки 0, 1, 2, 3 и 7 (+/- 1 день) и в день 14, 21 и 28 (+/-3 дня). Образцы крови будут снова получены через 2, 3, 6, 9 и 12 месяцев (+/- 1 неделя). Для второй группы образцы крови будут получены в момент «событий», таких как отторжение, заражение и т. д., и к их крови будет применена та же серия анализов. Для этой группы забор крови будет проводиться во время 0 (+/- 1 день), затем через одну неделю (+/- 2 дня) и через один, два и три месяца (+/- 1 неделя). 0. У каждого пациента будет взято пять образцов крови. Для всех пациентов будет проведено сравнение стандартной собранной клинической информации о пациенте - функция трансплантата, отторжение, инфицирование, уровни иммуносупрессии - с результатами нашей транскриптомики. Кульминацией проекта станет выявление того, как геномика конкретных типов Т-клеток может более точно отражать истинное состояние иммуносупрессии пациента, соответствуя клиническим фенотипам с высокой, оптимальной и низкой иммуносупрессией, и, таким образом, позволит врачам-трансплантологам более разумно и точно вводить иммунодепрессанты. лекарства.

Это исследование будет включать в себя получение образцов крови у пациентов с трансплантацией почки в то время, когда у них в противном случае собирали бы кровь для стандартной клинической помощи. Согласие будет получено для тестирования их крови, но пациенты не будут страдать от дополнительной боли или неудобств при тестировании. В координации с оборудованием и расходными материалами, которые в настоящее время используются в исследованиях отделения травматологии и интенсивной терапии, исследователи организуют сбор и работу лабораторий эффективным по времени и с минимальными затратами способом.