Microfluídica y transcriptómica en pacientes postrasplante de órganos sólidos

Los dos objetivos específicos del estudio de investigación son los siguientes: 1) Prueba de concepto con dos partes. En primer lugar, el plan del estudio es demostrar que las células T que están muy comúnmente involucradas en la respuesta inmune: las poblaciones CD2, CD3, CD4 y CD8 pueden ser capturadas. Estas células serán capturadas, lisadas y su genómica de ARNm será mapeada. La segunda parte de la prueba de concepto consistirá en exponer las poblaciones de CD2, CD3, CD4 y CD8 ex vivo a diversas concentraciones séricas de tacrolimus, el principal medicamento inmunosupresor fundamental en el trasplante de órganos sólidos. La exposición de los tres tipos de células a las diversas concentraciones de tacrolimus demostrará que hay pruebas que pueden detectar transcripciones de ARNm correspondientes a estados de subinmunodepresión, óptimos y sobreinmunes. A continuación, se medirá la producción cuantificada de IL2 de los tres tipos de células en las diversas condiciones inmunosupresoras. Con estas 2 partes del primer objetivo específico del estudio, se habrá demostrado una técnica que puede aislar rápida y fácilmente las poblaciones celulares de interés de los pacientes trasplantados y puede capturar cómo estas poblaciones celulares responden a la inmunosupresión en varias concentraciones. 2) El segundo objetivo específico del estudio de investigación es realizar este perfil genómico en receptores de trasplante renal. Para esta parte del estudio, habrá dos cohortes. Una cohorte identificada como el grupo "prospectivo" y una cohorte etiquetada como el grupo "evento". Para la cohorte prospectiva, se obtendrá sangre de los pacientes en momentos específicos. Específicamente, las muestras de sangre se obtendrán en el entorno previo al trasplante cuando los pacientes se presenten en el hospital para su trasplante, luego en los días 0, 1, 2, 3 y 7 posteriores al trasplante de riñón (+/- 1 día) y en el día 14, 21 y 28 (+/-3 días). Se volverán a obtener muestras de sangre en los meses 2, 3, 6, 9 y 12 (+/- 1 semana). Para el segundo grupo, se obtendrán muestras de sangre en el momento de "eventos", como rechazo, infección, etc., y se les aplicará la misma serie de pruebas a su sangre. Para este grupo, las extracciones de sangre se realizarán en el momento 0 (+/-1 día), luego a la semana (+/-2 días) y al mes, dos y tres meses (+/-1 semana) después del tiempo 0. Habrá cinco muestras de sangre recolectadas por paciente. Para todos los pacientes, habrá una comparación de la información clínica recopilada estándar sobre el paciente (función del injerto, rechazo, infección, niveles de inmunosupresión) con los resultados de nuestra transcriptómica. La culminación del proyecto consistirá en revelar cómo la genómica de los tipos específicos de células T puede reflejar con mayor precisión el verdadero estado inmunosuprimido de un paciente al corresponder a fenotipos clínicos inmunosupresores altos, óptimos y bajos, y así permitir que los médicos de trasplante administren inmunosupresores de manera más inteligente y precisa. medicamentos

Este estudio implicará la obtención de muestras de sangre de los pacientes con trasplante de riñón en el momento en que, de lo contrario, se les recolectaría sangre para la atención clínica estándar. Se obtendrá el consentimiento para la prueba en su sangre, pero los pacientes no sufrirán ningún dolor o inconveniente adicional de la prueba. En coordinación con el equipo y los suministros que actualmente utiliza la investigación del departamento de traumatología y cuidados intensivos, los investigadores organizarán la recopilación y el funcionamiento de los laboratorios de manera eficiente y con un costo mínimo.