Mikrofluidik und Transkriptomik bei Patienten nach Organtransplantation

Die beiden spezifischen Ziele der Forschungsstudie sind wie folgt: 1) Proof of Concept mit zwei Teilen. Ziel der Studie ist zunächst der Nachweis, dass T-Zellen erfasst werden können, die sehr häufig an der Immunantwort beteiligt sind: CD2-, CD3-, CD4- und CD8-Populationen. Diese Zellen werden eingefangen, lysiert und ihre mRNA-Genomik wird kartiert. Im zweiten Teil des Machbarkeitsnachweises werden die CD2-, CD3-, CD4- und CD8-Populationen ex vivo verschiedenen Serumkonzentrationen von Tacrolimus ausgesetzt – dem wichtigsten immunsuppressiven Medikament bei Organtransplantationen. Die Exposition der drei Zelltypen gegenüber den verschiedenen Tacrolimus-Konzentrationen wird zeigen, dass es Tests gibt, die mRNA-Transkripte nachweisen können, die den unter-, optimalen und über-immunsupprimierten Zuständen entsprechen. Anschließend wird die Quantifizierung der IL2-Produktion der drei Zelltypen unter den verschiedenen immunsuppressiven Bedingungen gemessen. Mit diesen beiden Teilen des ersten spezifischen Ziels der Studie wird eine Technik demonstriert, mit der die interessierenden Zellpopulationen von Transplantationspatienten einfach und problemlos isoliert und erfasst werden können, wie diese Zellpopulationen auf Immunsuppression in verschiedenen Konzentrationen reagieren. 2) Das zweite spezifische Ziel der Forschungsstudie ist die Durchführung dieses Genomprofils bei Empfängern von Nierentransplantaten. Für diesen Teil der Studie wird es zwei Kohorten geben. Eine als „potenzielle“ Gruppe identifizierte Kohorte und eine als „Ereignis“-Gruppe gekennzeichnete Kohorte. Für die zukünftige Kohorte wird den Patienten zu bestimmten Zeitpunkten Blut entnommen. Insbesondere werden Blutproben vor der Transplantation entnommen, wenn sich die Patienten für ihre Transplantation im Krankenhaus vorstellen, dann am Tag 0, 1, 2, 3 und 7 (+/- 1 Tag) nach der Nierentransplantation und am Tag 14, 21 und 28 (+/-3 Tage). In den Monaten 2, 3, 6, 9 und 12 (+/- 1 Woche) werden erneut Blutproben entnommen. Bei der zweiten Gruppe werden zum Zeitpunkt von „Ereignissen“ wie Abstoßung, Infektion usw. Blutproben entnommen und die gleichen Testreihen auf ihr Blut angewendet. Für diese Gruppe werden Blutabnahmen zum Zeitpunkt 0 (+/-1 Tag), dann eine Woche (+/-2 Tage) und einen, zwei und drei Monate (+/-1 Woche) nach dem Zeitpunkt durchgeführt 0. Pro Patient werden fünf Blutproben entnommen. Für alle Patienten erfolgt ein Vergleich der standardmäßig erfassten klinischen Informationen über den Patienten – Transplantatfunktion, Abstoßung, Infektion, Immunsuppressionsniveaus – mit den Ergebnissen unserer Transkriptomik. Der Höhepunkt des Projekts wird darin bestehen, aufzudecken, wie die Genomik der spezifischen T-Zelltypen den tatsächlichen immunsupprimierten Zustand eines Patienten genauer widerspiegeln kann, indem sie hohen, optimalen und niedrigen immunsuppressiven klinischen Phänotypen entspricht, und so Transplantationsärzten eine intelligentere und genauere Verabreichung von Immunsuppressiva ermöglichen kann Medikamente.

Diese Studie umfasst die Entnahme von Blutproben von Nierentransplantationspatienten zu dem Zeitpunkt, zu dem ihnen sonst Blut für die klinische Standardversorgung entnommen würde. Für die Blutuntersuchung wird die Einwilligung eingeholt, die Patienten erleiden jedoch keine zusätzlichen Schmerzen oder Unannehmlichkeiten durch die Untersuchung. In Abstimmung mit den Geräten und Materialien, die derzeit von der Forschung der Trauma- und Intensivpflegeabteilung verwendet werden, werden die Ermittler die Sammlung und den Betrieb der Labore zeiteffizient und mit minimalen Kosten organisieren