Microfluïdica en transcriptomica bij patiënten na een orgaantransplantatie

De twee specifieke doelstellingen van het onderzoek zijn de volgende: 1) Proof of concept met twee delen. Ten eerste is het studieplan om te bewijzen dat T-cellen die heel vaak betrokken zijn bij de immuunrespons: CD2-, CD3-, CD4- en CD8-populaties kunnen worden gevangen. Deze cellen zullen worden gevangen, gelyseerd en hun mRNA-genomica zal in kaart worden gebracht. Het tweede deel van het proof of concept omvat het ex vivo blootstellen van de CD2-, CD3-, CD4- en CD8-populaties aan verschillende serumconcentraties van tacrolimus - de belangrijkste hoeksteen van immunosuppressieve medicatie bij orgaantransplantatie. Blootstelling van de drie celtypen aan de verschillende tacrolimusconcentraties zal aantonen dat er testen zijn die mRNA-transcripten kunnen detecteren die overeenkomen met onder, optimale en over immunosuppressie toestanden. Vervolgens zal de kwantificering van de IL2-productie van de drie celtypen onder de verschillende immunosuppressieve omstandigheden worden gemeten. Met deze 2 delen van het eerste specifieke doel van de studie, is een techniek gedemonstreerd die gemakkelijk en gemakkelijk de celpopulaties van belang kan isoleren van de transplantatiepatiënten en kan vastleggen hoe deze celpopulaties reageren op immunosuppressie bij verschillende concentraties. 2) Het tweede specifieke doel van het onderzoek is het uitvoeren van deze genomische profilering op ontvangers van een niertransplantatie. Voor dit deel van het onderzoek zullen er twee cohorten zijn. Een cohort geïdentificeerd als de "toekomstige" groep en een cohort gelabeld als de "gebeurtenis"-groep. Voor het toekomstige cohort zal op specifieke tijdstippen bloed van de patiënten worden afgenomen. Concreet zullen bloedmonsters worden genomen in de pre-transplantatiesetting wanneer de patiënten zich voor hun transplantatie in het ziekenhuis melden, vervolgens op dag 0, 1, 2, 3 en 7 (+/- 1 dag) na de niertransplantatie en op dag 14, 21 en 28 (+/-3 dagen). Na 2, 3, 6, 9 en 12 maanden (+/- 1 week) worden opnieuw bloedmonsters afgenomen. Voor de tweede groep zullen bloedmonsters worden genomen op het moment van "gebeurtenissen", zoals afstoting, infectie, enz., en dezelfde reeks tests op hun bloed toepassen. Voor deze groep wordt bloed afgenomen op tijdstip 0(+/-1 dag), vervolgens op één week (+/-2 dagen), en op één, twee en drie maanden (+/-1 week) na tijd 0. Per patiënt worden vijf bloedmonsters afgenomen. Voor alle patiënten zal er een vergelijking zijn van de standaard verzamelde klinische informatie over de patiënt - transplantaatfunctie, afstoting, infectie, immunosuppressieniveaus - met de resultaten van onze transcriptomics. Het hoogtepunt van het project zal zijn om te onthullen hoe de genomica van de specifieke typen T-cellen nauwkeuriger de werkelijke immunosuppressieve toestand van een patiënt kan weerspiegelen door te corresponderen met hoge, optimale en lage immunosuppressieve klinische fenotypes, en zo transplantatieartsen in staat te stellen op intelligentere en nauwkeurigere wijze immunosuppressieve middelen toe te dienen. medicijnen.

Deze studie omvat het verkrijgen van bloedmonsters van de niertransplantatiepatiënten op het moment dat ze anders bloed zouden laten afnemen voor standaard klinische zorg. Er zal toestemming worden verkregen voor het testen op hun bloed, maar de patiënten zullen geen extra pijn of ongemak ondervinden van het testen. In coördinatie met de apparatuur en benodigdheden die momenteel worden gebruikt door het onderzoek van de trauma- en intensive care-afdeling, zullen de onderzoekers de inzameling en werking van de laboratoria op een tijdbesparende en minimaal dure manier organiseren