Förstärkt mjölk, tillväxt och mikronäringsstatus hos mexikanska småbarn (MilkGrowth)

Studien genomfördes i Mexiko. Utredarna inkluderade barn i åldern 12 till 30 månader som gick på daghem. Dessa daghem är en del av ett nationellt statligt program vars huvudsyfte är att stödja arbetande mödrar och de som avser att arbeta och inte har tillgång till hälso- och sjukvård och riskerar att bli fattiga. I programmet ingår även ensamstående föräldrar som ansvarar för sin familj med barn mellan 12 och 36 månader.

Studien som beskrivs här är en randomiserad, parallell, dubbelblind, kontrollerad studie genom administrering av uppväxtmjölk (GM) och berikad mjölk (FM).

Randomisering och maskering:

Moses-Oakford-metoden användes för att slumpmässigt tilldela 189 barn till 1 av 2 grupper i denna dubbelblinda kontrollerade studie genom administrering av tillväxtmjölk (Enfa-Grow® GM) (GM) och berikad mjölk (FM). Det fanns 96 barn i den rödgråa gruppen och 93 i den blågröna gruppen, studien kommer att förblindas tills den statistiska analysen är klar. En grupp fick GM och den andra gruppen fick FM. Båda grupperna fick 480 ml/d (240 ml kl. 07.00 och 240 ml kl. 16.00). Båda kosttillskotten var omöjliga att särskilja, samma färg, (vitt mjölkpulver) lukt och smak förutom färgkodningen på burken. Färgkoden var okänd för forskare, fältarbetare, användare och analytiker. Mjölk erbjöds barnen 5 dagar/vecka under en period av 4 månader under överinseende av studiepersonalen som registrerade om tillskottet konsumerades samt mängden.

Exklusions kriterier:

Utredarna inkluderade inte barn som ammades vid tidpunkten för studien, varken barn som fick flera mikronäringsämnen. Om ett barn hade kapillärt hemoglobin <9,0 g/dl, vid baslinjen eller var kliniskt sjuk inkluderades inte.

Datainsamling Antropometriska mätningar Antropometriska mätningar vidtogs vid baslinjen, 8 och 16 veckor. Vikten mättes till närmaste 10g med en elektronisk våg (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL kapacitet 14 kg för spädbarn och 36 kg vuxna, Tokyo) och längd och höjd mättes till närmaste millimeter med en längdbräda ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). Huvudets omkrets togs med ett flexibelt icke-töjbart mjukgjort måttband till närmaste millimeter (modell, Hoechstmass-Rollfix 150cm). Fältarbetare utbildades och standardiserades med hjälp av standardtekniker enligt protokoll. Vikt, längd och huvudomkrets omvandlades till Z-poäng genom att använda 2006 års referensstandarder från Världshälsoorganisationen (WHO). Prevalensen av hämning, slöseri och undervikt beräknades med minus 2 z-poäng för varje indikator (längd- eller längd-för-ålder, vikt-för-längd eller längd- och vikt-för-ålder) vid specifika gränspunkter för ålder och sex. Övervikt/fetma definierades som vikt för längd/längd över plus 2 z-Score.

Hemoglobinkoncentrationen bestämdes i kapillärblodprov erhållna genom fingerstick och mättes i en bärbar fotometer -HemoCue-, vid baslinjen. Enligt urvalskriterier om ett barn hade <9,0g/dl remitterades barnet till närmaste vårdcentral. Efter fasta över natten togs venösa blodprov (10 ml) från antecubital ven vid baslinjen och 8 och 16 veckor därefter. Prover togs av en utbildad sjuksköterska som hade erfarenhet av att arbeta med barn och enligt protokoll som fastställts av Biosäkerhetskommissionen vid National Institute of Public Health (NIPH). Kapillär- och venblodprover togs på varje daghem. Kapillärblodprover togs endast vid baslinjen. Vissa mödrar drog sig ur studien på grund av blodprovstagningen. Prover centrifugerades med användning av en bärbar centrifug EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Tyskland) vid 280 X g; 20 minuter in situ och serum förvarades i färgkodade kryogena flaskor och konserverades i flytande kväve skyddat från ljus tills leverans till Biokemiska och Nutrition Laboratory vid NIPH.

Väl i laboratoriet förvarades proverna vid -70ºC tills de var redo att analyseras. Varje mikronäringsämne mättes enligt följande: Ferritin, zink och folat: Kommersiella kit användes för att bedöma serumkoncentrationerna av ferritin (Dade Behring Inc.) Serumkoncentrationerna av zink mättes genom induktivt kopplad plasma atomemissionsspektroskopi med användning av en Varian Vista Pro CCD-spektrometer. Serumfolatet frisattes från protein med användning av natriumhydroxid, ditiotreitol och kaliumcyanid och omvandlades till cyanokobalamin och stabila folater. Deras koncentrationer mättes med kompetitiva enzymatiska immunanalyser i en TOSOH automatiserad immunanalys. Vitamin D: serum 25-OH-D3 analyserades med CMIA med användning av en Abbott Architect-modul. Vitamin A: Serumretinol extraherades med 100 % ren etanol; Etanolen indunstades under ett kväveflöde och löstes i 100 ml 10 % etanol. Bestämningar utfördes med högpresterande vätskekromatografi (HPLC) i ett Waters-instrument (Waters Co., Milford, MA, USA), med användning av en 3,9 x 150 mm-kolonn Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.), med en mobil fas CH3OH, 100 % med en flödeshastighet av 1,5 ml/min, vid en våglängd av 325 nm. Serumlipider: lipidserumprofilen bestämdes av en gaskromatograf (5890 Series II, Hewlett-Packard, USA). Sjuklighetsdata samlades in dagligen på varje daghem. En checklista användes för att registrera symtom på diarré och akuta luftvägsinfektioner. Mödrar eller vårdare ombads att komma ihåg eventuella symtom angående mjölkkonsumtion.

Socioekonomisk status Information om deltagarens hushålls egenskaper, utbildningsnivå och föräldrarnas yrke erhölls genom intervju av modern.

Intervention Mjölkpulver bereddes och rekonstituerades varje vardag på varje daghem enligt WHO:s och Day Care riktlinjer. På morgonen ungefär klockan 07.00 förberedde utbildad personal mjölken enligt den färgkod som tilldelats varje barn. Flaskor användes för att underlätta mätning i milliliter. Varje flaska vägdes före och efter beredning av mjölk i en dietskala (OHOUSE, modell CS5000, kapacitet 5000gx2g). Tränade koppar användes också. Varje barn fick en individuell flaska eller kopp med sin egen mjölk (240 ml). När varje flaska eller kopp var förberedd gavs den till barnet. Efter att barnet hade druckit klart mjölken vägdes resterna och registrerades i konsumtionsformuläret. Mjölk bereddes igen (240 ml) enligt protokoll innan varje barn lämnade ungefär kl. 16:00. Överbliven mjölk vägdes, mättes och registrerades. Mödrar eller vårdgivare fick instruktioner om hur man förbereder pulvermjölk hemma enligt WHO:s riktlinjer. Detta gjordes på helger och för barn som drack mjölk innan de kom till daghemmet. Mödrar fick den mängd mjölk som krävdes för att förbereda 480 ml per dag under helgen. Mödrar registrerade mängden mjölk som lämnats av barnet i ett konsumtionsformulär och tränades i att uppskatta och registrera mjölkkonsumtion.

Definition av brist på mikronäringsämnen:

1. Folat: Barn med serumkoncentrationer av folat under < 4 ng/ml kategoriserades som bristfälliga.
2. Ferritin: Barn med serumkoncentrationer under <12 μg/L (LIS).
3. Zink: Barn med serumkoncentrationer under <65 μg/dL.
4. Vitamin A: Barn med serumkoncentrationer under < 20,02 ug/dL (<0,70 µmol/l).
5. Vitamin D: Barn med serumkoncentrationer under < 20nmol/L (<8ng/ml) ansågs ha allvarlig brist.

Statistisk analys Baslinje allmänna egenskaper jämfördes mellan studiegrupper med t-statistik för oberoende urval. För kategoriska egenskaper användes chi-kvadratstatistiken.

För varje kontinuerlig svarsvariabel -dvs. tillväxt eller mikronäringsämnen-, den differentiella effekten av tillskott uppskattades med en multipel regressionsmodell som inkluderade en indikatorvariabel för studiegruppen, en indikatorvariabel för uppföljningsperioden och motsvarande interaktion mellan dessa två termer. För binära utfall användes logistisk regressionsmodell. Baslinjeegenskaper som skilde sig signifikant mellan studiegrupperna inkluderades som kovariater. Alla standardfel justerades för databeroende på ämnesnivå. Antropometriska kontinuerliga svar analyserades under antagande av normalitet medan kontinuerliga mikronäringssvar antogs ha en lognormal fördelning. För den senare logtransformerades utfallsvariabeln före skattning av modellen och justerade geometriska medelvärden erhölls som efteruppskattning. Justerade sannolikheter erhölls efter att ha anpassat de logistiska modellerna och tillämpat inversen av logitfunktionen på den linjära förutsägelsen. Justerade geometriska medelvärden och sannolikheter erhölls genom prediktiva marginaler och deras standardfel genom Delta-metoden; förändringar över tid för dessa prediktiva marginaler erhölls som genomsnittliga marginaleffekter.

En socioekonomisk statusindikator erhölls som abstraherar den första huvudkomponenten från hushållets materiella egenskaper och tjänster. Den första huvudkomponenten förklarade 30 % av den totala variansen.