Versterkte melk, groei en status van micronutriënten bij Mexicaanse peuters (MilkGrowth)

Het onderzoek werd uitgevoerd in Mexico. De onderzoekers omvatten kinderen van 12 tot 30 maanden oud die naar kinderdagverblijven gingen. Deze kinderdagverblijven maken deel uit van een programma van de nationale overheid met als hoofddoel het ondersteunen van werkende moeders en degenen die van plan zijn te werken maar geen toegang hebben tot gezondheidszorg en het risico lopen in armoede te vervallen. Het programma omvat ook alleenstaande ouders die de leiding hebben over hun gezin met kinderen tussen de 12 en 36 maanden oud.

De hierin beschreven studie is een gerandomiseerde, parallelle, dubbelblinde, gecontroleerde studie door toediening van groeimelk (GM) en verrijkte melk (FM).

Randomisatie en maskering:

De Moses-Oakford-methode werd gebruikt om 189 kinderen willekeurig toe te wijzen aan 1 van de 2 groepen in deze dubbelblinde gecontroleerde studie door toediening van groeimelk (Enfa-Grow® GM) (GM) en verrijkte melk (FM). Er waren 96 kinderen in de rood-grijze groep en 93 in de blauw-groene groep. Het onderzoek zal geblindeerd zijn totdat de statistische analyse is voltooid. De ene groep kreeg GM en de andere groep kreeg FM. Beide groepen kregen 480 ml/dag (240 ml om 7.00 uur en 240 ml om 16.00 uur). Beide supplementen waren niet van elkaar te onderscheiden, dezelfde kleur, (witte melkpoeder) geur en smaak behalve de kleurcodering van het blikje. De kleurcode was onbekend voor onderzoekers, veldwerkers, gebruikers en analisten. De kinderen kregen 5 dagen per week melk aangeboden voor een periode van 4 maanden onder toezicht van het onderzoekspersoneel dat bijhield of en hoeveel het supplement werd geconsumeerd.

Uitsluitingscriteria:

De onderzoekers includeerden geen kinderen die borstvoeding kregen op het moment van de studie, noch kinderen die meerdere micronutriëntensupplementen kregen. Als een kind capillaire hemoglobine <9,0 g/dl had bij baseline of klinisch ziek was, werd dit niet meegenomen.

Gegevensverzameling Antropometrische metingen Antropometrische metingen werden uitgevoerd bij baseline, 8 en 16 weken. Gewicht werd gemeten tot op 10 g nauwkeurig met een elektronische weegschaal (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL capaciteit 14 kg voor zuigelingen en 36 kg volwassenen, Tokyo) en lengte en lengte werden gemeten tot op de dichtstbijzijnde millimeter met een lengtebord ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). De hoofdomtrek werd gemeten met een flexibel niet-rekbaar geplastificeerd meetlint tot op de millimeter nauwkeurig (model, Hoechstmass-Rollfix 150cm). Veldwerkers werden getraind en gestandaardiseerd met behulp van standaardtechnieken volgens protocollen. Gewicht, lengte en hoofdomtrek werden omgezet in Z-scores met behulp van de referentienormen van de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) uit 2006. De prevalentie van groeiachterstand, gewichtsverlies en ondergewicht werd berekend met min 2 z-scores voor elke indicator (lengte of lengte voor leeftijd, gewicht voor lengte of lengte en gewicht voor leeftijd) op specifieke afkappunten voor leeftijd en seks. Overgewicht/zwaarlijvigheid werd gedefinieerd als gewicht voor lengte/lengte boven plus 2 z-score.

De hemoglobineconcentratie werd bepaald in capillaire bloedmonsters verkregen door vingerprik en gemeten in een draagbare fotometer -HemoCue-, bij baseline. Als een kind <9,0 g/dl had, werd het volgens selectiecriteria doorverwezen naar het dichtstbijzijnde gezondheidscentrum. Na een nacht vasten werden veneuze bloedmonsters (10 ml) genomen uit de antecubitale ader bij aanvang en 8 en 16 weken daarna. Monsters werden verkregen door een getrainde verpleegster die ervaring had met het werken met kinderen en volgens protocolprocedures opgesteld door de Biosecurity Commission van het National Institute of Public Health (NIPH). Op elk kinderdagverblijf werden capillaire en veneuze bloedmonsters genomen. Capillaire bloedmonsters werden alleen bij baseline genomen. Sommige moeders trokken zich terug uit het onderzoek vanwege de bloedafname. Monsters werden gecentrifugeerd met behulp van een draagbare centrifuge EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Duitsland) bij 280 x g; 20 minuten in situ en serum werd opgeslagen in kleurgecodeerde cryogene flesjes en bewaard in vloeibare stikstof beschermd tegen licht tot levering aan het Biochemical and Nutrition Laboratory van de NIPH.

Eenmaal in het laboratorium werden de monsters bewaard bij -70ºC totdat ze klaar waren om te worden geanalyseerd. Elke micronutriënt werd als volgt gemeten: Ferritine, zink en foliumzuur: Commerciële kits werden gebruikt om de serumconcentraties van ferritine te bepalen (Dade Behring Inc.) De serumconcentraties van zink werden gemeten door middel van inductief gekoppelde plasma-atoomemissiespectroscopie met behulp van een Varian Vista Pro CCD-spectrometer. Het serumfolaat werd met behulp van natriumhydroxide, dithiothreitol en kaliumcyanide uit eiwit vrijgemaakt en omgezet in cyanocobalamine en stabiele folaten. Hun concentraties werden gemeten door competitieve enzymatische immunoassays in een TOSOH geautomatiseerde immuunanalyse. Vitamine D: serum 25-OH-D3 werd geanalyseerd door CMIA met behulp van een Abbott Architect-module. Vitamine A: Serum retinol werd geëxtraheerd met 100% pure ethanol; de ethanol werd verdampt onder een stikstofstroom en opgelost in 100 ml 10% ethanol. Bepalingen werden uitgevoerd door high-performance liquid chromatography (HPLC) in een Waters-instrument (Waters Co., Milford, MA, VS), met behulp van een Nova-Pak C18 ODS-kolom van 3, 9 x 150 mm (Waters Co.), met een mobiele fase van CH3OH, 100% met een fluxsnelheid van 1,5 ml/min, bij een golflengte van 325 nm. Serumlipiden: het lipide-serumprofiel werd bepaald door een gaschromatograaf (5890 Series II, Hewlett-Packard, Verenigde Staten). Morbiditeitsgegevens werden dagelijks verzameld in elk kinderdagverblijf. Er werd een checklist gebruikt om symptomen van diarree en acute luchtweginfecties vast te leggen. Moeders of verzorgers werd gevraagd zich eventuele symptomen met betrekking tot melkconsumptie te herinneren.

Sociaaleconomische status Informatie over de kenmerken van het huishouden van de deelnemer, het opleidingsniveau en het beroep van de ouders werd verkregen door de moeder te interviewen.

Interventie Melkpoeder werd elke doordeweekse dag in elk kinderdagverblijf bereid en gereconstitueerd volgens de richtlijnen van de WHO en de dagopvang. 's Ochtends rond 07.00 uur bereidde getraind personeel de melk volgens de kleurcodering die aan elk kind was toegewezen. Flessen werden gebruikt om het meten in milliliters te vergemakkelijken. Elke fles werd voor en na het bereiden van melk gewogen in een dieetweegschaal (OHOUSE, model CS5000, capaciteit 5000gx2g). Er werden ook getrainde bekers gebruikt. Elk kind kreeg een eigen fles of beker met eigen melk (240 ml). Nadat elke fles of beker klaar was, werd deze aan het kind gegeven. Nadat het kind de melk had opgedronken, werden de restjes gewogen en genoteerd op het consumptieformulier. De melk werd volgens protocollen opnieuw bereid (240 ml) voordat elk kind omstreeks 16.00 uur vertrok. Overgebleven melk werd gewogen, gemeten en geregistreerd. Moeders of verzorgers werden geïnstrueerd hoe ze poedermelk thuis konden bereiden volgens de richtlijnen van de WHO. Dit gebeurde in het weekend en voor kinderen die melk dronken voordat ze naar het kinderdagverblijf kwamen. Moeders kregen de hoeveelheid melk die nodig was om in het weekend 480 ml per dag te bereiden. Moeders registreerden de hoeveelheid melk die het kind achterliet in een consumptieformulier en werden getraind om de melkconsumptie in te schatten en te registreren.

Definitie van tekorten aan micronutriënten:

1. Foliumzuur: Kinderen met serumconcentraties van folaat lager dan < 4ng/ml werden gecategoriseerd als deficiënt.
2. Ferritin: Kinderen met serumconcentraties lager dan <12 μg/L (LIS).
3. Zink: Kinderen met serumconcentraties onder <65 μg/dL.
4. Vitamine A: Kinderen met serumconcentraties lager dan < 20,02 ug/dL (<0,70 µmol/l).
5. Vitamine D: Kinderen met serumconcentraties lager dan < 20 nmol/L (<8 ng/ml) werden beschouwd als ernstig tekort.

Statistische analyse Algemene basiskenmerken werden vergeleken tussen studiegroepen met behulp van de t-statistiek voor onafhankelijke steekproeven. Voor categorische kenmerken werd de chikwadraat-statistiek gebruikt.

Voor elke continue responsvariabele -d.w.z. groei of micronutriënten, werd het differentiële effect van suppletie geschat met een meervoudig regressiemodel dat een indicatorvariabele van de onderzoeksgroep, een indicatorvariabele van de follow-upperiode en de overeenkomstige interactie van deze twee termen omvatte. Voor binaire uitkomsten werd een logistisch regressiemodel gebruikt. Basislijnkenmerken die significant verschilden tussen studiegroepen werden opgenomen als covariaten. Alle standaardfouten zijn gecorrigeerd voor gegevensafhankelijkheden op onderwerpniveau. Antropometrische continue responsen werden geanalyseerd uitgaande van normaliteit, terwijl continue micronutriënten werden verondersteld een lognormale verdeling te hebben. Voor de laatste werd de uitkomstvariabele log getransformeerd voordat het model werd geschat en werden aangepaste geometrische gemiddelden verkregen als postschatting. Aangepaste waarschijnlijkheden werden verkregen na aanpassing van de logistieke modellen en toepassing van de inverse van de logitfunctie op de lineaire voorspelling. Aangepaste geometrische gemiddelden en waarschijnlijkheden werden verkregen via voorspellende marges en hun standaardfouten via de Delta-methode; veranderingen in de tijd voor deze voorspellende marges werden verkregen als gemiddelde marginale effecten.

Een sociaaleconomische statusindicator werd verkregen door de eerste hoofdcomponent te abstraheren van de materiële kenmerken en diensten van het huishouden. De eerste hoofdcomponent verklaarde 30% van de totale variantie.