Wzbogacone mleko, wzrost i status mikroelementów u meksykańskich małych dzieci (MilkGrowth)

Badanie przeprowadzono w Meksyku. Badacze obejmowali dzieci w wieku od 12 do 30 miesięcy, które uczęszczały do ​​ośrodków opieki dziennej. Przedszkola te są częścią ogólnokrajowego programu rządowego, którego głównym celem jest wspieranie pracujących matek oraz tych, które zamierzają pracować, a nie mają dostępu do służby zdrowia i są zagrożone ubóstwem. Program obejmuje również rodziców samotnie wychowujących dzieci w wieku od 12 do 36 miesięcy.

Opisane tu badanie jest randomizowaną, równoległą, podwójnie ślepą, kontrolowaną próbą przez podawanie rosnącego mleka (GM) i wzbogaconego mleka (FM).

Randomizacja i maskowanie:

Metodę Mosesa-Oakforda zastosowano do losowego przydzielenia 189 dzieci do 1 z 2 grup w tej podwójnie ślepej próbie kontrolowanej przez podawanie mleka wzrostowego (Enfa-Grow® GM) (GM) i mleka wzbogaconego (FM). W grupie czerwono-szarej było 96 dzieci, aw grupie niebiesko-zielonej 93 dzieci, badanie będzie zaślepione do czasu zakończenia analizy statystycznej. Jedna grupa otrzymała GM, a druga grupa FM. Obie grupy otrzymywały 480 ml/dzień (240 ml o 7:00 i 240 ml o 16:00). Oba suplementy były nie do odróżnienia, miały ten sam kolor, zapach (białe mleko w proszku) i smak, z wyjątkiem kodowania kolorami puszki. Kod koloru był nieznany badaczom, pracownikom terenowym, użytkownikom i analitykom. Mleko podawano dzieciom 5 dni w tygodniu przez okres 4 miesięcy pod nadzorem personelu badawczego, który odnotowywał, czy dodatek został spożyty, jak również ilość.

Kryteria wyłączenia:

Badacze nie uwzględnili dzieci, które były karmione piersią w czasie badania, ani dziecka otrzymującego wiele suplementów mikroskładników odżywczych. Jeśli dziecko miało hemoglobinę włośniczkową <9,0 g/dl na początku badania lub było chore klinicznie, nie zostało uwzględnione.

Zbieranie danych Pomiary antropometryczne Pomiary antropometryczne przeprowadzono na początku badania, w 8. i 16. tygodniu. Wagę mierzono z dokładnością do 10 g za pomocą wagi elektronicznej (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL pojemność 14 kg dla niemowląt i 36 kg dorosłych, Tokio), a długość i wzrost mierzono z dokładnością do milimetra za pomocą deski długości ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). Obwód głowy mierzono elastyczną, nierozciągliwą plastyfikowaną taśmą mierniczą z dokładnością do milimetra (model Hoechstmass-Rollfix 150 cm). Pracownicy terenowi zostali przeszkoleni i ustandaryzowani przy użyciu standardowych technik zgodnie z protokołami. Waga, długość i obwód głowy zostały przekształcone w wyniki Z przy użyciu standardów referencyjnych Światowej Organizacji Zdrowia (WHO) z 2006 roku. Rozpowszechnienie karłowatości, wyniszczenia i niedowagi obliczono przy użyciu minus 2 z-score dla każdego wskaźnika (długość lub wzrost do wieku, waga do długości lub wzrost i waga do wieku) w określonych punktach odcięcia dla wieku i seks. Nadwagę/otyłość zdefiniowano jako wagę dla długości/wzrostu powyżej plus 2 z-Score.

Stężenie hemoglobiny oznaczano w próbkach krwi włośniczkowej pobranych przez nakłucie palca i mierzono za pomocą przenośnego fotometru -HemoCue-, na początku badania. Zgodnie z kryteriami selekcji, jeśli dziecko miało <9,0 g/dl, kierowano je do najbliższego ośrodka zdrowia. Po całonocnym poście pobrano próbki krwi żylnej (10 ml) z żyły przedłokciowej na początku badania oraz po 8 i 16 tygodniach. Próbki pobierała przeszkolona pielęgniarka, która miała doświadczenie w pracy z dziećmi i zgodnie z procedurami protokołowymi ustalonymi przez Komisję Bezpieczeństwa Biologicznego przy Narodowym Instytucie Zdrowia Publicznego (NIZP). Próbki krwi włośniczkowej i żylnej pobierano w każdym ośrodku dziennym. Próbki krwi włośniczkowej pobierano tylko na początku badania. Niektóre matki wycofywały się z badania z powodu pobrania krwi. Próbki odwirowano stosując wirówkę przenośną EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Niemcy) przy 280 X g; 20 minut in situ i surowicę przechowywano w oznaczonych kolorami fiolkach kriogenicznych i przechowywano w ciekłym azocie chronionym przed światłem do czasu dostarczenia do Laboratorium Biochemii i Żywienia NIZP.

Po dostarczeniu do laboratorium próbki przechowywano w temperaturze -70°C do czasu analizy. Każdy mikroskładnik odżywczy mierzono w następujący sposób: Ferrytyna, cynk i kwas foliowy: Do oceny stężenia ferrytyny w surowicy użyto komercyjnych zestawów (Dade Behring Inc.) Stężenia cynku w surowicy mierzono metodą atomowej spektroskopii emisyjnej ze wzbudzeniem w plazmie indukcyjnie sprzężonej przy użyciu spektrometru Varian Vista Pro CCD. Folian w surowicy został uwolniony z białka przy użyciu wodorotlenku sodu, ditiotreitolu i cyjanku potasu i przekształcony w cyjanokobalaminę i stabilne foliany. Ich stężenia mierzono za pomocą konkurencyjnych enzymatycznych testów immunologicznych w zautomatyzowanej analizie immunologicznej TOSOH. Witamina D: 25-OH-D3 w surowicy analizowano metodą CMIA przy użyciu modułu Abbott Architect. Witamina A: Retinol w surowicy ekstrahowano 100% czystym etanolem; etanol odparowano w strumieniu azotu i rozpuszczono w 100 ml 10% etanolu. Oznaczenia wykonano metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) w aparacie Waters (Waters Co., Milford, MA, USA), stosując kolumnę 3,9 x 150 mm Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.), z fazą ruchomą CH3OH, 100%, z prędkością strumienia 1,5 ml/min, przy długości fali 325 nm. Lipidy w surowicy: profil lipidowy w surowicy określono za pomocą chromatografu gazowego (5890 Series II, Hewlett-Packard, Stany Zjednoczone). Dane dotyczące zachorowalności zbierano codziennie w każdym ośrodku opieki dziennej. Do odnotowania objawów biegunki i ostrych infekcji dróg oddechowych wykorzystano listę kontrolną. Matki lub opiekunów poproszono o przypomnienie sobie wszelkich objawów związanych ze spożyciem mleka.

Status społeczno-ekonomiczny Informacje o charakterystyce gospodarstwa domowego respondenta, poziomie wykształcenia i zawodzie rodziców uzyskano na podstawie wywiadu z matką.

Interwencja Mleko w proszku było przygotowywane i odtwarzane każdego dnia tygodnia w każdym ośrodku opieki dziennej zgodnie z wytycznymi WHO i opieki dziennej. Rano około godziny 7 rano przeszkolony personel przygotowywał mleko zgodnie z kodowaniem kolorystycznym przypisanym każdemu dziecku. Aby ułatwić odmierzanie w mililitrach, zastosowano butelki. Każdą butelkę zważono przed i po przygotowaniu mleka w dietetycznej wadze pomiarowej (OHOUSE, model CS5000, pojemność 5000gx2g). Stosowano również kubki treningowe. Każde dziecko otrzymało indywidualną butelkę lub kubek z własnym mlekiem (240ml). Po przygotowaniu każdej butelki lub kubka podawano je dziecku. Po wypiciu przez dziecko mleka jego resztki ważono i odnotowywano w karcie spożycia. Mleko przygotowano ponownie (240 ml) zgodnie z protokołami przed wyjściem każdego dziecka około godziny 16:00. Resztki mleka były ważone, mierzone i rejestrowane. Matki lub opiekunki zostały poinstruowane, jak przygotowywać mleko w proszku w domu zgodnie z wytycznymi WHO. Robiono to w weekendy i dla dzieci, które piły mleko przed przybyciem do żłobka. Matkom podawano ilość mleka potrzebną do przygotowania 480 ml dziennie w weekend. Matki rejestrowały ilość mleka pozostawionego przez dziecko w formularzu spożycia oraz zostały przeszkolone w szacowaniu i rejestrowaniu spożycia mleka.

Definicja niedoborów mikroelementów:

1. Kwas foliowy: Dzieci ze stężeniem kwasu foliowego w surowicy poniżej < 4 ng/ml zostały sklasyfikowane jako z niedoborem.
2. Ferrytyna: Dzieci ze stężeniem w surowicy poniżej <12 μg/L (LIS).
3. Cynk: Dzieci ze stężeniem w surowicy poniżej <65 μg/dL.
4. Witamina A: Dzieci ze stężeniem w surowicy poniżej < 20,02 ug/dl (<0,70 µmol/l).
5. Witamina D: dzieci ze stężeniem w surowicy poniżej < 20 nmol/l (<8 ng/ml) uznano za cierpiące na ciężki niedobór.

Analiza statystyczna Wyjściowa charakterystyka ogólna została porównana pomiędzy badanymi grupami przy użyciu statystyki t dla niezależnych prób. Dla charakterystyk kategorycznych zastosowano statystykę chi-kwadrat.

Dla każdej ciągłej zmiennej odpowiedzi -tj. wzrost lub mikroskładniki odżywcze, zróżnicowany efekt suplementacji oszacowano za pomocą modelu regresji wielokrotnej, który obejmował zmienną wskaźnikową grupy badanej, zmienną wskaźnikową okresu obserwacji i odpowiednią interakcję tych dwóch warunków. Dla wyników binarnych zastosowano model regresji logistycznej. Charakterystyki wyjściowe, które znacząco różniły się między badanymi grupami, zostały uwzględnione jako współzmienne. Wszystkie błędy standardowe zostały skorygowane o zależności danych na poziomie przedmiotowym. Antropometryczne ciągłe reakcje analizowano przy założeniu normalności, podczas gdy ciągłe odpowiedzi mikroskładników odżywczych miały rozkład logarytmiczno-normalny. W przypadku tego ostatniego zmienna wynikowa została przekształcona logarytmicznie przed estymacją modelu, a skorygowane średnie geometryczne uzyskano po estymacji. Skorygowane prawdopodobieństwa uzyskano po dopasowaniu modeli logistycznych i zastosowaniu odwrotności funkcji logitowej do predykcji liniowej. Skorygowane średnie geometryczne i prawdopodobieństwa uzyskano za pomocą marginesów predykcyjnych i ich błędów standardowych za pomocą metody Delta; zmiany w czasie dla tych przewidywanych marginesów uzyskano jako średnie efekty krańcowe.

Uzyskano wskaźnik statusu społeczno-ekonomicznego, wyodrębniając pierwszy główny składnik z cech materialnych i usług gospodarstwa domowego. Pierwsza główna składowa wyjaśniła 30% całkowitej wariancji.