Lait enrichi, croissance et statut en micronutriments chez les tout-petits mexicains (MilkGrowth)

L'étude a été menée au Mexique. Les enquêteurs comprenaient des enfants de 12 à 30 mois qui fréquentaient des garderies. Ces garderies font partie d'un programme gouvernemental national dont l'objectif principal est de soutenir les mères qui travaillent et celles qui ont l'intention de travailler et qui n'ont pas accès à un service de santé et sont exposées au risque de pauvreté. Le programme inclut également les parents isolés en charge de leur famille avec des enfants âgés de 12 à 36 mois.

L'étude décrite ici est un essai randomisé, parallèle, en double aveugle, contrôlé par administration de lait de croissance (GM) et de lait enrichi (FM).

Randomisation et masquage :

La méthode Moses-Oakford a été utilisée pour assigner au hasard 189 enfants à 1 des 2 groupes de cet essai contrôlé en double aveugle par l'administration de lait de croissance (Enfa-Grow® GM) (GM) et de lait enrichi (FM). Il y avait 96 enfants dans le groupe rouge-gris et 93 dans le groupe bleu-vert, l'étude sera en aveugle jusqu'à ce que l'analyse statistique soit terminée. Un groupe a reçu GM et l'autre groupe reçoit FM. Les deux groupes ont reçu 480 ml/j (240 ml à 7h00 et 240 ml à 16h00). Les deux suppléments étaient indiscernables, de même couleur, odeur (poudre de lait blanc) et saveur, à l'exception du code couleur de la boîte. Le code couleur était inconnu pour les chercheurs, les agents de terrain, les utilisateurs et les analystes. Du lait a été offert aux enfants 5 jours/semaine pendant une période de 4 mois sous la supervision du personnel de l'étude qui a enregistré si le supplément a été consommé ainsi que la quantité.

Critère d'exclusion:

Les enquêteurs n'ont pas inclus les enfants qui étaient allaités au moment de l'étude, ni les enfants recevant des suppléments en micronutriments multiples. Si un enfant avait une hémoglobine capillaire <9,0 g/dl, au départ ou était cliniquement malade n'a pas été inclus.

Collecte des données Mesures anthropométriques Des mesures anthropométriques ont été prises au départ, à 8 et 16 semaines. Le poids a été mesuré à 10 g près avec une balance électronique (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL capacité 14 kg pour les nourrissons et 36 kg adultes, Tokyo) et la longueur et la taille ont été mesurées au millimètre près avec une planche de longueur ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). Le périmètre crânien a été mesuré au millimètre près avec un mètre ruban plastifié souple non extensible (modèle Hoechstmass-Rollfix 150cm). Les agents de terrain ont été formés et standardisés en utilisant des techniques standard selon des protocoles. Le poids, la longueur et le périmètre crânien ont été transformés en scores Z en utilisant les normes de référence de l'Organisation mondiale de la santé (OMS) de 2006. La prévalence du retard de croissance, de l'émaciation et de l'insuffisance pondérale a été calculée en utilisant moins 2 scores z pour chaque indicateur (taille ou taille pour l'âge, poids pour la taille ou taille et poids pour l'âge) à des seuils spécifiques pour l'âge et sexe. Le surpoids/l'obésité ont été définis comme le poids pour la longueur/la taille au-dessus plus 2 z-Score.

La concentration d'hémoglobine a été déterminée dans des échantillons de sang capillaire obtenus par piqûre au doigt et mesurée dans un photomètre portable -HemoCue-, au départ. Selon les critères de sélection, si un enfant avait <9,0 g/dl, l'enfant était référé au centre de santé le plus proche. Après une nuit de jeûne, des échantillons de sang veineux (10 ml) ont été prélevés dans la veine antécubitale au départ et à 8 et 16 semaines par la suite. Les échantillons ont été obtenus par une infirmière qualifiée qui avait de l'expérience avec des enfants et selon les procédures de protocole établies par la Commission de biosécurité de l'Institut national de la santé publique (NIPH). Des échantillons de sang capillaire et veineux ont été prélevés dans chaque centre de jour. Des échantillons de sang capillaire ont été prélevés uniquement au départ. Certaines mères se retiraient de l'étude à cause du prélèvement sanguin. Les échantillons ont été centrifugés à l'aide d'une centrifugeuse portable EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Allemagne) à 280 x g ; 20 min in situ et le sérum a été stocké dans des flacons cryogéniques à code couleur et conservé dans de l'azote liquide à l'abri de la lumière jusqu'à sa livraison au laboratoire de biochimie et de nutrition du NIPH.

Une fois au laboratoire, les échantillons ont été conservés à -70 °C jusqu'à ce qu'ils soient prêts à être analysés. Chaque micronutriment a été mesuré comme suit : Ferritine, zinc et folate : Des kits commerciaux ont été utilisés pour évaluer les concentrations sériques de ferritine (Dade Behring Inc.) Les concentrations sériques de zinc ont été mesurées par spectroscopie d'émission atomique à plasma à couplage inductif à l'aide d'un spectromètre Varian Vista Pro CCD. Le folate sérique a été libéré des protéines à l'aide d'hydroxyde de sodium, de dithiothréitol et de cyanure de potassium, et transformé en cyanocobalamine et en folates stables. Leurs concentrations ont été mesurées par des dosages immunologiques enzymatiques compétitifs dans une analyse immunitaire automatisée TOSOH. Vitamine D : la 25-OH-D3 sérique a été analysée par CMIA à l'aide d'un module Abbott Architect. Vitamine A : Le rétinol sérique a été extrait avec de l'éthanol pur à 100 % ; l'éthanol a été évaporé sous flux d'azote et dissous dans 100 ml d'éthanol à 10 %. Les déterminations ont été effectuées par chromatographie liquide à haute performance (HPLC) dans un instrument Waters (Waters Co., Milford, MA, USA), en utilisant une colonne de 3,9 x 150 mm Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.), avec une phase mobile de CH3OH, 100 % avec une vitesse de flux de 1,5 ml/min, à une longueur d'onde de 325 nm. Lipides sériques : le profil lipidique sérique a été déterminé par un chromatographe en phase gazeuse (5890 série II, Hewlett-Packard, États-Unis). Les données de morbidité ont été recueillies quotidiennement dans chaque garderie. Une liste de contrôle a été utilisée pour enregistrer les symptômes de diarrhée et d'infections respiratoires aiguës. Les mères ou les soignants ont été invités à se souvenir de tout symptôme concernant la consommation de lait.

Statut socio-économique Les informations sur les caractéristiques du ménage du participant, le niveau d'éducation et la profession des parents ont été obtenues en interrogeant la mère.

Intervention Le lait en poudre a été préparé et reconstitué tous les jours de la semaine dans chaque garderie conformément aux directives de l'OMS et de la garderie. Le matin vers 7h00, du personnel formé préparait le lait selon le code couleur attribué à chaque enfant. Des bouteilles ont été utilisées pour faciliter la mesure en millilitres. Chaque bouteille a été pesée avant et après préparation du lait dans une balance de mesure diététique (OHOUSE, modèle CS5000, capacité 5000gx2g). Des gobelets formés ont également été utilisés. Chaque enfant a reçu un biberon ou un gobelet individuel avec son propre lait (240 ml). Une fois que chaque biberon ou gobelet était préparé, il était donné à l'enfant. Une fois que l'enfant a fini de boire le lait, les restes ont été pesés et enregistrés dans le formulaire de consommation. Le lait a été préparé à nouveau (240 ml) selon les protocoles avant le départ de chaque enfant vers 16h00. Le lait restant a été pesé, mesuré et enregistré. Les mères ou les soignants ont reçu des instructions sur la façon de préparer du lait en poudre à la maison conformément aux directives de l'OMS. Cela se faisait les fins de semaine et pour les enfants qui buvaient du lait avant d'arriver à la garderie. Les mères ont reçu la quantité de lait nécessaire pour préparer 480 ml par jour pendant le week-end. Les mères ont enregistré la quantité de lait laissée par l'enfant dans un formulaire de consommation et ont été formées pour estimer et enregistrer la consommation de lait.

Définition des carences en micronutriments :

1. Folate : Les enfants avec des concentrations sériques de folate inférieures à < 4 ng/mL ont été classés comme déficients.
2. Ferritine : Enfants avec des concentrations sériques inférieures à <12 μg/L (LIS).
3. Zinc : Enfants avec des concentrations sériques inférieures à < 65 μg/dL.
4. Vitamine A : Enfants avec des concentrations sériques inférieures à < 20,02 ug/dL (<0,70 µmol/l).
5. Vitamine D : Les enfants dont les concentrations sériques étaient inférieures à < 20 nmol/L (< 8 ng/ml) étaient considérés comme présentant une carence sévère.

Analyse statistique Les caractéristiques générales de base ont été comparées entre les groupes d'étude en utilisant la statistique t pour les échantillons indépendants. Pour les caractéristiques catégorielles, la statistique du chi carré a été utilisée.

Pour chaque variable de réponse continue -c'est-à-dire croissance ou micronutriments-, l'effet différentiel de la supplémentation a été estimé avec un modèle de régression multiple qui comprenait une variable indicatrice du groupe d'étude, une variable indicatrice de la période de suivi et l'interaction correspondante de ces deux termes. Pour les résultats binaires, un modèle de régression logistique a été utilisé. Les caractéristiques de base qui différaient significativement entre les groupes d'étude ont été incluses comme covariables. Toutes les erreurs types ont été ajustées pour tenir compte des dépendances des données au niveau du sujet. Les réponses continues anthropométriques ont été analysées en supposant la normalité, tandis que les réponses continues en micronutriments ont été supposées avoir une distribution log-normale. Pour ce dernier, la variable de résultat a été transformée en log avant l'estimation du modèle et les moyennes géométriques ajustées ont été obtenues après l'estimation. Les probabilités ajustées ont été obtenues après ajustement des modèles logistiques et application de l'inverse de la fonction logit à la prédiction linéaire. Les moyennes géométriques ajustées et les probabilités ont été obtenues par les marges prédictives et leurs erreurs standard par la méthode Delta ; les variations dans le temps de ces marges prédictives ont été obtenues en tant qu'effets marginaux moyens.

Un indicateur de statut socio-économique a été obtenu en faisant abstraction de la première composante principale des caractéristiques matérielles et des services du ménage. La première composante principale explique 30 % de la variance totale.