Angereicherte Milch, Wachstum und Mikronährstoffstatus bei mexikanischen Kleinkindern (MilkGrowth)

Die Studie wurde in Mexiko durchgeführt. Die Ermittler schlossen Kinder im Alter von 12 bis 30 Monaten ein, die Kindertagesstätten besuchten. Diese Kindertagesstätten sind Teil eines nationalen Regierungsprogramms, dessen Hauptziel darin besteht, berufstätige Mütter und diejenigen zu unterstützen, die eine Erwerbstätigkeit beabsichtigen und keinen Zugang zu Gesundheitsdiensten haben und armutsgefährdet sind. Das Programm umfasst auch Alleinerziehende, die ihre Familie mit Kindern zwischen 12 und 36 Monaten versorgen.

Die hier beschriebene Studie ist eine randomisierte, parallele, doppelblinde, kontrollierte Studie durch die Verabreichung von Aufwachsmilch (GM) und angereicherter Milch (FM).

Randomisierung und Maskierung:

Die Moses-Oakford-Methode wurde verwendet, um 189 Kinder zufällig 1 von 2 Gruppen in dieser kontrollierten Doppelblindstudie durch die Verabreichung von Wachstumsmilch (Enfa-Grow® GM) (GM) und angereicherter Milch (FM) zuzuweisen. Es waren 96 Kinder in der rot-grauen Gruppe und 93 in der blau-grünen Gruppe, die Studie wird verblindet, bis die statistische Analyse abgeschlossen ist. Eine Gruppe erhielt GM und die andere Gruppe FM. Beide Gruppen erhielten 480 ml/Tag (240 ml um 7:00 Uhr und 240 ml um 16:00 Uhr). Beide Nahrungsergänzungsmittel waren nicht unterscheidbar, hatten dieselbe Farbe, (weißes Milchpulver) Geruch und Geschmack, mit Ausnahme der Farbcodierung der Dose. Der Farbcode war Forschern, Außendienstmitarbeitern, Benutzern und Analysten unbekannt. Milch wurde den Kindern 5 Tage/Woche für einen Zeitraum von 4 Monaten unter Aufsicht des Studienpersonals angeboten, das aufzeichnete, ob die Nahrungsergänzung konsumiert wurde, sowie die Menge.

Ausschlusskriterien:

Die Forscher schlossen keine Kinder ein, die zum Zeitpunkt der Studie gestillt wurden, und keines der Kinder, das mehrere Mikronährstoff-Ergänzungen erhielt. Wenn ein Kind zu Studienbeginn ein kapilläres Hämoglobin < 9,0 g/dl aufwies oder klinisch krank war, wurde es nicht eingeschlossen.

Datenerhebung Anthropometrische Messungen Anthropometrische Messungen wurden zu Studienbeginn, nach 8 und 16 Wochen durchgeführt. Das Gewicht wurde mit einer elektronischen Waage (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL-Kapazität 14 kg für Säuglinge und 36 kg Erwachsene, Tokio) auf 10 g genau gemessen, und Länge und Höhe wurden mit einem Längenbrett ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). Der Kopfumfang wurde mit einem flexiblen, nicht dehnbaren, plastifizierten Maßband auf den nächsten Millimeter (Modell Hoechstmass-Rollfix 150 cm) gemessen. Außendienstmitarbeiter wurden unter Verwendung von Standardtechniken gemäß Protokollen geschult und standardisiert. Gewicht, Länge und Kopfumfang wurden unter Verwendung der Referenzstandards der Weltgesundheitsorganisation (WHO) von 2006 in Z-Werte umgewandelt. Die Prävalenz von Wachstumsverzögerung, Auszehrung und Untergewicht wurde unter Verwendung von minus 2 Z-Scores für jeden Indikator (Länge oder Größe für das Alter, Gewicht für die Länge oder Größe und Gewicht für das Alter) an bestimmten Grenzwerten für Alter und berechnet Sex. Übergewicht/Adipositas wurden definiert als Gewicht für Länge/Höhe oben plus 2 z-Score.

Die Hämoglobinkonzentration wurde in Kapillarblutproben bestimmt, die durch Fingerstich entnommen und in einem tragbaren Photometer – HemoCue – zu Studienbeginn gemessen wurden. Wenn ein Kind < 9,0 g/dl aufwies, wurde es gemäß den Auswahlkriterien an das nächstgelegene Gesundheitszentrum überwiesen. Nach dem Fasten über Nacht wurden venöse Blutproben (10 ml) aus der Antekubitalvene zu Beginn und nach 8 und 16 Wochen danach entnommen. Die Proben wurden von einer ausgebildeten Krankenschwester, die Erfahrung in der Arbeit mit Kindern hatte, und gemäß den von der Biosicherheitskommission des National Institute of Public Health (NIPH) festgelegten Protokollverfahren entnommen. In jeder Tagesstätte wurden kapillare und venöse Blutproben entnommen. Kapillarblutproben wurden nur zu Studienbeginn entnommen. Einige Mütter brachen die Studie wegen der Blutentnahme ab. Die Proben wurden unter Verwendung einer tragbaren Zentrifuge EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Deutschland) bei 280 × g zentrifugiert; 20 min in situ und das Serum wurde in farbkodierten kryogenen Fläschchen gelagert und in flüssigem Stickstoff geschützt vor Licht bis zur Lieferung an das Labor für Biochemie und Ernährung am NIPH aufbewahrt.

Im Labor wurden die Proben bei -70 °C gelagert, bis sie für die Analyse bereit waren. Jeder Mikronährstoff wurde wie folgt gemessen: Ferritin, Zink und Folsäure: Kommerzielle Kits wurden verwendet, um die Serumkonzentrationen von Ferritin (Dade Behring Inc.) zu bestimmen. Die Serumkonzentrationen von Zink wurden durch Atomemissionsspektroskopie mit induktiv gekoppeltem Plasma unter Verwendung eines Varian Vista Pro CCD-Spektrometers gemessen. Das Serumfolat wurde unter Verwendung von Natriumhydroxid, Dithiothreitol und Kaliumcyanid aus Protein freigesetzt und in Cyanocobalamin und stabile Folate umgewandelt. Ihre Konzentrationen wurden durch kompetitive enzymatische Immunoassays in einer automatisierten TOSOH-Immunanalyse gemessen. Vitamin D: Serum 25-OH-D3 wurde durch CMIA unter Verwendung eines Abbott Architect-Moduls analysiert. Vitamin A: Serumretinol wurde mit 100 % reinem Ethanol extrahiert; das Ethanol wurde unter einem Stickstofffluss verdampft und in 100 ml 10 %igem Ethanol gelöst. Die Bestimmungen wurden durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) in einem Waters-Instrument (Waters Co., Milford, MA, USA) unter Verwendung einer 3,9 x 150 mm-Säule Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.) mit einer mobilen Phase durchgeführt von CH3OH, 100 % mit einer Flussgeschwindigkeit von 1,5 ml/min, bei einer Wellenlänge von 325 nm. Serumlipide: Das Lipidserumprofil wurde mit einem Gaschromatographen (5890 Series II, Hewlett-Packard, USA) bestimmt. Morbiditätsdaten wurden täglich in jedem Tagespflegezentrum gesammelt. Anhand einer Checkliste wurden Symptome von Durchfall und akuten Atemwegsinfekten erfasst. Mütter oder Betreuer wurden gebeten, sich an Symptome bezüglich des Milchkonsums zu erinnern.

Sozioökonomischer Status Informationen über die Haushaltsmerkmale der Teilnehmer, das Bildungsniveau und den Beruf der Eltern wurden durch Befragung der Mutter erhoben.

Interventionsmilchpulver wurde jeden Wochentag in jeder Kindertagesstätte gemäß den Richtlinien der WHO und der Tagespflege zubereitet und rekonstituiert. Morgens um etwa 7 Uhr bereitete geschultes Personal die Milch gemäß der Farbcodierung zu, die jedem Kind zugewiesen wurde. Flaschen wurden verwendet, um das Messen in Millilitern zu erleichtern. Jede Flasche wurde vor und nach der Zubereitung von Milch in einer Diät-Messwaage (OHOUSE, Modell CS5000, Kapazität 5000 g × 2 g) gewogen. Es wurden auch trainierte Becher verwendet. Jedes Kind erhielt eine individuelle Flasche oder Tasse mit seiner eigenen Milch (240 ml). Sobald jede Flasche oder Tasse zubereitet war, wurde sie dem Kind gegeben. Nachdem das Kind die Milch getrunken hatte, wurden die Reste gewogen und im Verzehrformular festgehalten. Die Milch wurde erneut gemäß den Protokollen zubereitet (240 ml), bevor jedes Kind ungefähr um 16:00 Uhr ging. Übrig gebliebene Milch wurde gewogen, gemessen und aufgezeichnet. Mütter oder Betreuer wurden in die Zubereitung von Milchpulver zu Hause gemäß den WHO-Richtlinien eingewiesen. Dies geschah an Wochenenden und für Kinder, die vor der Ankunft in der Kindertagesstätte Milch getrunken hatten. Den Müttern wurde am Wochenende die Menge Milch gegeben, die für die Zubereitung von 480 ml pro Tag erforderlich war. Mütter registrierten die vom Kind hinterlassene Milchmenge in einem Verzehrformular und wurden darin geschult, den Milchverbrauch abzuschätzen und zu registrieren.

Definition von Mikronährstoffmangel:

1. Folat: Kinder mit Folat-Serumkonzentrationen unter < 4 ng/ml wurden als mangelhaft eingestuft.
2. Ferritin: Kinder mit Serumkonzentrationen unter < 12 μg/L (LIS).
3. Zink: Kinder mit Serumkonzentrationen unter <65 μg/dL.
4. Vitamin A: Kinder mit Serumkonzentrationen unter < 20,02 ug/dl (< 0,70 µmol/l).
5. Vitamin D: Kinder mit Serumkonzentrationen unter < 20 nmol/l (< 8 ng/ml) wurden als schwerer Mangel angesehen.

Statistische Analyse Allgemeine Grundlinienmerkmale wurden zwischen den Studiengruppen unter Verwendung der t-Statistik für unabhängige Stichproben verglichen. Für kategoriale Merkmale wurde die Chi-Quadrat-Statistik verwendet.

Für jede kontinuierliche Antwortvariable – d. h. B. Wachstum oder Mikronährstoffe – wurde der differenzielle Effekt der Nahrungsergänzung mit einem multiplen Regressionsmodell geschätzt, das eine Indikatorvariable der Studiengruppe, eine Indikatorvariable des Nachbeobachtungszeitraums und die entsprechende Wechselwirkung dieser beiden Begriffe umfasste. Für binäre Ergebnisse wurde ein logistisches Regressionsmodell verwendet. Baseline-Charakteristika, die sich signifikant zwischen den Studiengruppen unterschieden, wurden als Kovariaten aufgenommen. Alle Standardfehler wurden um Datenabhängigkeiten auf Subjektebene bereinigt. Anthropometrische kontinuierliche Reaktionen wurden unter der Annahme von Normalität analysiert, während angenommen wurde, dass kontinuierliche Reaktionen auf Mikronährstoffe eine lognormale Verteilung aufweisen. Für letzteres wurde die Ergebnisvariable vor der Schätzung des Modells logarithmisch transformiert, und als Nachschätzung wurden angepasste geometrische Mittel erhalten. Angepasste Wahrscheinlichkeiten wurden nach Anpassung der logistischen Modelle und Anwendung der Inversen der Logit-Funktion auf die lineare Vorhersage erhalten. Angepasste geometrische Mittel und Wahrscheinlichkeiten wurden durch Vorhersagemargen und ihre Standardfehler durch die Delta-Methode erhalten; Änderungen im Laufe der Zeit für diese Vorhersagespannen wurden als durchschnittliche Randeffekte erhalten.

Ein Indikator für den sozioökonomischen Status wurde erhalten, indem die erste Hauptkomponente von materiellen Merkmalen und Dienstleistungen des Haushalts abstrahiert wurde. Die erste Hauptkomponente erklärte 30 % der Gesamtvarianz.